ریبونوکلئاز A (RNase A) یک پلی پپتید تک رشته ای حاوی 4 پیوند دی سولفیدی با وزن مولکولی حدود 13.7 کیلو دالتون است. RNase A یک اندوریبونوکلئاز است که به طور خاص RNA تک رشته ای را در باقیمانده های C و U تجزیه می کند. به طور خاص، شکاف پیوند فسفودی استری تشکیل شده توسط ریبوز 5 یک نوکلئوتید و گروه فسفات روی 3'-ریبوز نوکلئوتید پیریمیدین مجاور را تشخیص می‌دهد، به طوری که فسفات‌های حلقوی 2'، 3' - هیدرولیز می‌شوند. pG-pG-pC-pA-pG توسط RNase A برای تولید pG-pG-pCp و A-PG بریده می شود. RNase A فعال ترین در برش RNA تک رشته ای است. غلظت کاری توصیه شده 1-100 میکروگرم بر میلی لیتر است که با سیستم های واکنش مختلف سازگار است. غلظت کم نمک (0-100 میلی مولار NaCl) را می توان برای برش زنجیره های RNA تک رشته ای، RNA دو رشته ای و RNA تشکیل شده توسط هیبریداسیون RNA-DNA استفاده کرد. با این حال، در غلظت نمک بالا (≥ 0.3 M)، RNase A فقط به طور خاص RNA تک رشته ای را می شکافد.

RNase A معمولاً برای حذف RNA در هنگام تهیه DNA پلاسمید یا DNA ژنومی استفاده می شود. فعال بودن یا نبودن DNase در طول فرآیند آماده سازی می تواند به راحتی بر واکنش تأثیر بگذارد. از روش سنتی جوشاندن در حمام آب می توان برای غیرفعال کردن فعالیت DNase استفاده کرد. این محصول حاوی DNase و پروتئاز نیست و قبل از استفاده نیازی به عملیات حرارتی ندارد. علاوه بر این، این محصول می تواند در آزمایشات زیست شناسی مولکولی مانند آنالیز حفاظت RNase و تجزیه و تحلیل توالی RNA نیز استفاده شود.

این محصول به صورت محلول با غلظت 100 میلی گرم بر میلی لیتر ارائه می شود. غلظت کاری توصیه شده 1-100 میکروگرم در میلی لیتر است، بسته به نوع کاربرد.

ویژگی ها

ریبونوکلئاز A (RNase A)، از پانکراس گاو

فعالیت ≥80 کونیتز U/mg

خیر باقیمانده DNase

برنامه های کاربردی

RNases

تجزیه و تحلیل Epitranscriptome

استخراج و خالص سازی DNA ژنومی

مشخصات

حمل و نقل و ذخیره سازی

این محصول باید به مدت 2 سال در دمای 25- تا 15- درجه سانتیگراد نگهداری شود.

بافر نگهداری 50 میلی مولار Tris-HCl (pH 7.4) و 50 درصد (V/V) گلیسرول بود.

ارقام

نمونه 1 ندارد RNase A،نمونه 2-4 اضافه شده است 1 میکرولیتر از 100 میلی گرم در میلی لیتر RNase A. سپس الفdd 500 نانوگرم RNA. پس از انکوباسیون در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه، 1 میکرولیتر از بافر بارگذاری RNA 10X اضافه کنید. سپس تمام نمونه ها را روی ژل آگارز با منافذ متوسط ​​0.8 درصد برای الکتروفورز در ولتاژ 160 ولت به مدت 10 دقیقه قرار دهید.

اسناد:

برگه اطلاعات ایمنی

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

دفترچه راهنما

10406نسخه_دستی HB240703_EN.pdf

استنادها و مراجع:

[1] چن کیو، شین ام، وانگ ال، و همکاران. مهار LDHA برای القای آزادسازی eEF2 باعث افزایش ترومبوسیتوپوز می شود. خون 2022؛ 139 (19): 2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Chen K، Guo T، Li XM، و همکاران. تنظیم ترجمه پاسخ گیاه به دمای بالا توسط یک tRNAHis گوانیلیل ترانسفراز دو کاره در برنج. گیاه مول. 2019؛ 12 (8): 1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)