S-Adenosyl methionine (S-Adenosyl methionine، SAM) یک بستر کمکی درگیر در واکنش انتقال متیل است که در بدن از آدنوزین تری فسفات و متیونین در متیونین آدنوزیل ترانسفراز تحت عمل سنتز تشکیل شده است. SAM در محلول 10 میلی مولار HCl، 10٪ اتانول و pH 4 در دمای 25 درجه سانتیگراد تهیه می شود. این محصول با الزامات فرآیند GMP تولید و به صورت مایع ارائه می شود.

ویژگی ها

• فرآیندها و روش های تحلیلی معتبر، خاص محصول
• ثبات محصول خاص
• مستندات از دستورالعمل های GMP قابل اجرا پیروی می کند
• فرآیند تولید و مواد خام AOF (TSE & BSE)
• بیانیه نیتروزامین
• اسناد پشتیبانی نظارتی موجود است
• تولید در مقیاس بزرگ

برنامه های کاربردی

• فرآیند پوشش آنزیمی برای واکسن‌های mRNA و روش‌های درمانی
• متیلاسیون آنزیمی بیوپلیمرها

مشخصات

شماره CAS	485-80-3
فرمول	سی15اچ23ن6O5S+
وزن مولکولی	399.44 g/moL
خلوص (HPLC)	＞ 90%
محتوا	2 ± 32 میلی‌مولار
ترکیب (1X)	10 میلی مولار هیدروکلراید، 10 درصد اتانول pH 4 در دمای 25 درجه سانتیگراد
ساختار

اجزاء

حمل و نقل و ذخیره سازی

این محصول با یخ خشک ارسال می شود و می توان آن را در دمای -15 ~ -25 درجه سانتیگراد به مدت یک سال نگهداری کرد.

ارقام

• ارزیابی خلوص

شکل 1. خلوص (HPLC) محصول SAM می تواند بیش از 98% باشد (شکل 1A) و خلوص نوری (ee,%) ایزوفرم (S, S) -SAM همیشه حدود 70% باشد (شکل 1B).

• تشخیص باقیمانده آنزیمی

شکل 2. هیچ باقیمانده آنزیمی با الکتروفورز ژل آگارز شناسایی نشد.

یک واکنش 20 میکرولیتری در بافر حاوی 500 نانوگرم هضم Hind III λDNA و 2 میکرولیتر S-آدنوزیل متیونین (SAM) که به مدت 4 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شده است، هیچ تفاوتی در مقایسه با شاهد (SAM بدون SAM در سیستم واکنش) با الکتروفورز ژل آگارز ندارد (شکل 2A).یک واکنش 20 میکرولیتری در بافر حاوی 500 نانوگرم پلاسمید pUC19 و 2 میکرولیتر S-آدنوزیل متیونین (SAM) که به مدت 4 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شده بود، در مقایسه با شاهد (SAM بدون SAM در سیستم واکنش) با الکتروفورز ژل آگارز تفاوتی نداشت (شکل 2B).

• تست و تایید عملکردی

شکل 3 راندمان دربندی واکنش پوشش دهی پس از رونویسی YEASEN می تواند نزدیک به 99٪ باشد.

یک واکنش 20 میکرولیتری در بافر حاوی 1 میکروگرم λDNA، 1 واحد M. SssI (CpG متیل ترانسفراز)، و 160 میکرومولار S-آدنوزیل متیونین (SAM) به مدت 1 ساعت در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه می شود. DNA به دست آمده در برابر هضم با BstUI که توسط الکتروفورز ژل آگارز تعیین می شود مقاوم است (شکل 3A). 10 میکروگرم RNA با انکوباسیون در دمای 65 درجه سانتیگراد به مدت 5 دقیقه قبل از دربندی دناتوره شدند. یک واکنش پوششی 20 میکرولیتری پس از رونویسی تنظیم شد و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 2 ساعت در دستگاه PCR انکوبه شد. رونوشت ها با مهره های مغناطیسی خالص شدند (Cat#12602). سپس بازده درپوش توسط LC-MS تشخیص داده می شود (شکل 3B).