LZCap AU (3'Acm) یک آنالوگ cap1 است. این محصول برای رونویسی با توالی اولیه 5'AU3' استفاده می شود و ساختار کلاهک 1 طبیعی با درپوش رونویسی Cap1 تولید می شود. در مقایسه با Cap0 تولید شده با روش درپوش سنتی، ساختار cap1 تولید شده توسط CapAU (3'Acm) SaRNA را قادر می‌سازد تا فعالیت و کارایی ترجمه بالاتری در داخل بدن داشته باشد.

پتنت آمریکا تایید شد

اجزاء

جزئیات محصول

LZCap^® طراحی قالب DNA

LZCap^®AU (3'Acm) برای توالی های آغاز شده با AG مناسب است. همانطور که در شکل زیر نشان داده شده است، پروموتر T7 (زیر خط کشیده شده) به دنبال دنباله AG می تواند به طور موثر رونویسی را آغاز کند.

پروتکل

1. اجزای مورد نیاز برای آزمایش روی یخ را ذوب کنید.

2. برای پیکربندی سیستم رونویسی در دمای اتاق به سیستم واکنش زیر مراجعه کنید.

N1-Me-pUTP اصلاح شده را می توان به جای UTP نوع وحشی استفاده کرد. N1-Me-pUTP اصلاح شده ایمنی زایی mRNA را کاهش می دهد. Henovcom همچنین می تواند نوکلئوتید اصلاح شده N1-Me-pUTP (شماره گربه: HN1002) را ارائه دهد.

یادداشت ها:

1)     LZCap^®AU (3'Acm) برای وکتور رونویسی پروموتر T7 با توالی 5 'AU 3' مناسب است، که باید در هنگام ساختن وکتور در نظر گرفته شود.

2)     معرف ها، مواد مصرفی و ظروف مورد استفاده در آزمایش عاری از آلودگی RNase هستند.

3)     توصیه می شود برای رونویسی از یک الگوی DNA خطی شده استفاده کنید.

4)     هنگامی که نوکلئوتیدهای اصلاح شده به جای نوکلئوتیدهای نوع وحشی استفاده شد، غلظت نهایی واکنش بدون تغییر بود.

5)     اگر محصول PCR به عنوان الگوی DNA شروع رونویسی استفاده شود، مقدار الگوی DNA را می توان به نصف کاهش داد.

3. محلول واکنش آماده شده را با هم مخلوط کرده، برای مدت کوتاهی سانتریفیوژ کرده و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 2-3 ساعت انکوبه کنید. اگر طول رونوشت کمتر از 100nt باشد، زمان واکنش را به 4-8 ساعت افزایش دهید.

نمایه ایمنی عمومی

ذخیره سازی

این محصول را می توان در دمای -25~-15 ℃ به مدت دو سال نگهداری کرد.

موارد احتیاط

1. برای ایمنی و سلامتی خود، لطفاً هنگام کار با این محصول از تجهیزات حفاظت فردی (PPE) مانند روپوش آزمایشگاهی و دستکش یکبار مصرف استفاده کنید.
2. فقط برای استفاده تحقیقاتی
   

F&Q

1. چگونه LZCap را طراحی می کنید؟

آنزیم ها شناخت نسبتاً «ویژه ای» از سوبستراها دارند. بنابراین، هنگام طراحی یک ساختار کلاهک جدید، از یک سو، به اصلاحات ساختاری جدید برای اهداف ثبت اختراع نیاز داریم، اما از سوی دیگر، ما تلاش می کنیم تا حد امکان شباهت را با ساختارهای طبیعی / شناخته شده حفظ کنیم. ساختار طبیعی دارای یک ریبوز 3' OH است که می تواند اصلاح شود (مثلاً متیلاسیون). بر اساس این ملاحظات، ما انتخاب کردیم که یک کربن در موقعیت 3 برای تازگی ثبت اختراع اضافه کنیم، به دنبال آن یک NH برای تقلید از پیوند هیدروژنی OH، و سپس یک گروه استیل برای کاهش باز بودن NH و افزایش قابلیت پیوند هیدروژنی آن. فعالیت از LzCap بهتر از متیلات استکلاه طبیعی، احتمالاً به دلیل افزایش پیوند هیدروژنی است. در مقایسه با گروه‌های متیل و متوکسی، گروه استیل آمینو ممکن است برهمکنش‌های واندروالسی را بین سوبسترا (کلاهک) و عامل آغازگر (آنزیم) افزایش دهد.

2. آیا گروه استیل آمینو پایدار است؟

گروه آمینو استیل در حال حاضر به اندازه کافی پایدار است. این بسیار پایدارتر از موقعیت 7 متیله و پیوند فسفودی استر است که ناپایدارترین بخش های کلاهک هستند.

لطفاً برای جزئیات بیشتر در مورد مجوز LZCap با ما تماس بگیرید.