شرح
LZCap GG (3'Acm) یک آنالوگ cap1 است. این محصول برای رونویسی با توالی اولیه 5'GG3' استفاده می‌شود و ساختار کلاهک1 طبیعی با درپوش رونویسی Cap1 تولید می‌شود.
پتنت آمریکا تایید شد
اجزاء
| گربه شماره | نام | اندازه |
| 10686 | LZCap GG (3'Acm) (50mM) | 100 μL |
| 1 میلی لیتر |
جزئیات محصول
| فرمول مولکولی | سی35اچ48ن16O25پ4 (اسید آزاد) |
| وزن مولکولی | 1216.19 (اسید آزاد) |
| تمرکز | 50 ± 3 میلی متر |
| خلوص | HPLC ≥95% |
LZCap الگوی DNA دسیgn
LZCap GG (3'Acm) است مناسب برای GG آغاز شده است دنباله ها همانطور که نشان داده شده است در شکل زیر، SP6 مروج (خط دار) دنبال شد توسط دنباله GG می توانید efبه طور موثر آغاز کند رونویسی
پروتکل
1. ذوب کردن اجزا مورد نیاز برای آزمایشent on یخ
2. اضافه کنید آب بدون RNase و NTP ها به لوله واکنش
3. گرما LZCap مقدار GG(3'Acm) برای 15 دقیقه در 60 درجه سانتی گراد خنک در دمای اتاق برای 5 دقیقه
4. بلافاصله اضافه کنید LZCap GG (3'Acm) به لوله و گرداب به مخلوط کردن چرخش به طور خلاصه به جمع آوری کنید مایع
5. اضافه کنید 10 برابر رونویسی بافر و گرداب.
6. اضافه کنید الگوی DNA الفnd SP6 آنزیم مخلوط کنید.
7. را مخلوط کنید آماده شده است محلول واکنش، چرخش به طور خلاصه، و جوجه کشی در 37 درجه سانتی گراد برای 2-3 ساعت اگر رونوشت طول است کمتر از 100 nt افزایش دهد زمان واکنش به 4-8 ساعت
| جزء | حجم (μL) | غلظت نهایی |
| RNase آب رایگان | تا 20 میکرولیتر | / |
| ATP (100 میلی‌مولار) | 1 | 5 میلی متر |
| UTP (100 میلی متر) | 1 | 5 میلی متر |
| CTP (100 میلی‌متر) | 1 | 5 میلی متر |
| GTP (100 میلی‌متر) | 0.2 | 1 میلی متر |
| LZCap GG (3'Acm) (50 میلی متر) | 1.6 | 4 میلی متر |
| 10× رونویسی بافر | 2 | 1 × |
| خطی DNA | 1 میکروگرم | 50 ng/μL |
| SP6 آنزیم مخلوط کنید | 2 | / |
| جلد نهایی | 20 میکرولیتر | |
یادداشت ها:
1) این SP6 آنزیم ما را مخلوط کنیم توصیه می شود به استفاده می شود است MEGAscript® کیت (AM1330).
2) LZCap GG(3'Acm) برای وکتور رونویسی پروموتر SP6 با 5 توالی آغاز شده 'GG 3' مناسب است، که نیاز دارد هنگام ساخت بردار در نظر گرفته شود.
3) این معرف ها، مواد مصرفی و ظروف استفاده می شود در را آزمایش هستند رایگان of RNase آلودگی
4) آن را است توصیه می شود به استفاده از a خطی شده دمای DNAدیر برای رونویسی
5) چه زمانی اصلاح شده است نوکلئوتیدها بودند استفاده می شود در محل از نوع وحشی نوکلئوتیدها را نهایی تمرکزیون از را واکنش بود بدون تغییر
6) اصلاح شد N1-Me-pUTP می تواند باشد استفاده می شود در محل از نوع وحشی UTP. این مدشناسایی شد N1-Me-pUTP را کاهش می دهد ایمنی زایی از mRNA Henovcom می تواند همچنین فراهم کند اصلاح شده است نوکلئوتید N1-Me-pUTP (گربه شماره: HN1002).
7) اگر PCR حرفه ایمجرای است استفاده می شود به عنوان رونویسی شروع DNA الگو، را مقدار از DNA قالب می تواند باشد کاهش یافته است توسط نصف
ذخیره سازی
این محصول را می توان در دمای -25~-15 ℃ به مدت دو سال نگهداری کرد.
موارد احتیاط
- برای ایمنی و سلامتی خود، لطفاً هنگام کار با این محصول از تجهیزات حفاظت فردی (PPE) مانند روپوش آزمایشگاهی و دستکش یکبار مصرف استفاده کنید.
- فقط برای استفاده تحقیقاتی
F&Q
1. چگونه LZCap را طراحی می کنید؟
آنزیم ها شناخت نسبتاً «ویژه ای» از سوبستراها دارند. بنابراین، هنگام طراحی یک ساختار کلاهک جدید، از یک سو، به اصلاحات ساختاری جدید برای اهداف ثبت اختراع نیاز داریم، اما از سوی دیگر، ما تلاش می کنیم تا حد امکان شباهت را با ساختارهای طبیعی / شناخته شده حفظ کنیم. ساختار طبیعی دارای یک ریبوز 3' OH است که می تواند اصلاح شود (مثلاً متیلاسیون). بر اساس این ملاحظات، ما انتخاب کردیم که یک کربن در موقعیت 3 برای تازگی ثبت اختراع اضافه کنیم، به دنبال آن یک NH برای تقلید از پیوند هیدروژنی OH، و سپس یک گروه استیل برای کاهش باز بودن NH و افزایش قابلیت پیوند هیدروژنی آن. فعالیت از LzCap بهتر از متیلات استکلاه طبیعی، احتمالاً به دلیل افزایش پیوند هیدروژنی است. در مقایسه با گروه‌های متیل و متوکسی، گروه استیل آمینو ممکن است برهمکنش‌های واندروالسی را بین سوبسترا (کلاهک) و عامل آغازگر (آنزیم) افزایش دهد.
2.آیا گروه استیل آمینو پایدار است؟
گروه آمینو استیل در حال حاضر به اندازه کافی پایدار است. این بسیار پایدارتر از موقعیت 7 متیله و پیوند فسفودی استر است که ناپایدارترین بخش های کلاهک هستند.
لطفاً برای جزئیات بیشتر در مورد مجوز LZCap با ما تماس بگیرید.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.