شرح
Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR نشان دهنده تکرار پیشرفته Hifair™ Ⅲ 1st Strand سنتز cDNA SuperMix برای qPCR (gDNA Digester Plus). این برای برآوردن نیازهای انجام رونویسی معکوس و واکنش های حذف ژنوم در یک لوله طراحی شده است. علاوه بر این، فرآیند واکنش را ساده می کند، زمان واکنش را به میزان قابل توجهی کاهش می دهد و بازده محصول رونویسی معکوس را افزایش می دهد. 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix تمام معرف های ضروری برای واکنش رونویسی معکوس را در بر می گیرد. در طول واکنش، شما فقط باید آن را با مخلوط حذف کننده gDNA، الگوی RNA و آب تکمیل کنید تا به طور موثر رشته اولیه cDNA را سنتز کنید و همزمان آلودگی DNA ژنومی را از بین ببرید. این محصول برای رونویسی معکوس الگوهای پیچیده RNA مناسب است و برای رونویسی معکوس که شامل مقادیر اندک الگو و ژن‌های کم‌کپی است، بسیار موثر است.
محصول رونویسی معکوس تولید شده توسط این محصول خاص کاملاً با هر دو روش qPCR مبتنی بر پروب و مبتنی بر رنگ سازگار است. برای qPCR مبتنی بر پروب، استفاده از ترکیب اصلی qPCR چندگانه Hieff Unicon® Universal TaqMan (Cat#11211) را توصیه می‌کنیم، در حالی که برای qPCR مبتنی بر رنگ، Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) انتخاب توصیه‌شده برای تجزیه و تحلیل بیان ژن با عملکرد بالا است.
با این حال، توجه به این نکته مهم است که محصول رونویسی معکوس تولید شده توسط این محصول برای کاربردهای بعدی مانند تقویت قطعات طولانی مناسب نیست. اگر برای این اهداف به رونویسی معکوس کارآمد نیاز دارید، توصیه می کنیم از کیت سنتز cDNA رشته 1 Hifair AdvanceFast (Cat#11149، Cat#11150) استفاده کنید.
ویژگی ها
- 5 دقیقه RT
-
هضم RT و gDNA یکپارچه در یک لوله
برنامه های کاربردی
- RT-qPCR
- سنتز RNA آنتی سنس
مشخصات
| نوع محصول نهایی | cDNA (رشته اول) |
| روش PCR | RT-PCR |
| نوع معرف | رونویسی معکوس |
| نوع نمونه | RNA |
| دمای واکنش بهینه | 37 درجه سانتیگراد |
| ترانس کریپتاز معکوس | M-MLV |
اجزاء
| خیر | نام | 11151ES10 (10T) | 11151ES60 (100T) |
| 11151-الف | 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 50 میکرولیتر | 500 میکرولیتر |
| 11151-B | مخلوط حذف کننده gDNA | 10 μL | 100 میکرولیتر |
| 11151-C | آب بدون RNase | 1 میلی لیتر | 2×1 میلی لیتر |
حمل و نقل و ذخیره سازی
این محصول با یخ خشک ارسال می شود و می توان آن را در دمای -15 تا -25 درجه سانتیگراد به مدت 12 ماه نگهداری کرد.
دستورالعمل استفاده
برفک اجزای 11151-A/B/C را روی یخ، به آرامی هم بزنید و هر جزء معرف را کاملاً مخلوط کنید. سپس موارد زیر را مونتاژ کنید اجزاء در یک لوله بدون RNase:
| جزء | حجم (μL) |
| بدون RNase آب | تا 20 میکرولیتر |
| 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix | 5 میکرولیتر |
| مخلوط حذف کننده gDNA | 1 میکرولیتر |
| RNA کل | 10 pg -5 میکروگرم* |
| یا mRNA | 10 pg-500 ng* |
جدول 1: آماده سازی واکنش
*پیشنهاد می کنیم از 2 میکروگرم به عنوان کل ورودی RNA تجاوز نکنید. در صورت فراوانی بیان کم ژن هدف، ورودی RNA کل را می توان تا حداکثر 5 میکروگرم افزایش داد.
| دما | زمان |
| 37 درجه سانتیگراد | 5 دقیقه* |
| 85 درجه سانتیگراد | 30 ثانیه |
جدول 2: پروتکل های واکنش
*این فرآیند هم شامل رونویسی معکوس و هم هضم gDNA می شود.
محصول رونویسی معکوس برای استفاده فوری در واکنش های qPCR مناسب است یا می تواند برای مدت کوتاهی در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شود. برای نگهداری طولانی مدت، توصیه می کنیم برای جلوگیری از چرخه های متعدد انجماد و ذوب، آن را در دمای 80- درجه سانتی گراد نگهداری کنید.
موارد احتیاط:
1. تمام مراحل باید روی یخ و با نهایت دقت برای جلوگیری از آلودگی RNase انجام شود.
2. با پوشیدن کت آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف، ایمنی و رفاه خود را تضمین کنید.
3. این محصول صرفاً برای اهداف تحقیقاتی علمی در نظر گرفته شده است و نباید در موارد دیگر استفاده شود.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.