هیفر^™ کیت Advanced One Step RT-qPCR کیتی برای تعیین کمیت فلورسانس بر اساس رنگ SYBR Green I است. با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن، رونویسی معکوس و واکنش‌های qPCR در یک لوله تکمیل می‌شوند، که نیاز به عملیات‌های مکرر درپوش باز کردن و لوله‌گذاری را از بین می‌برد، کارایی سنجش را تا حد زیادی بهبود می‌بخشد و خطر آلودگی را کاهش می‌دهد. برای نمونه‌های RNA، کیت از Hifair مقاوم در برابر حرارت استفاده می‌کند^™ V Reverse Transcriptase برای سنتز cDNA کارآمد و UNICON^™ HotStart Taq DNA Polymerase برای تقویت کمی. تحت سیستم بافر بهینه شده، حساسیت کیت می تواند تا 0.1 pg برای اهداف با بیان بالا و تا 1 pg برای اهداف با بیان متوسط ​​باشد، و کیت همچنین برای تقویت و کمی سازی نمونه های DNA مناسب است. این کیت برای تکثیر و کمی سازی نمونه های DNA مناسب است. تشخیص حساس و کمی اسیدهای نوکلئیک از نمونه های مختلف گیاهی و حیوانی، سلول ها و میکروارگانیسم ها را امکان پذیر می کند.

مشخصات

اجزاء

ذخیره سازی

این محصول باید در دمای -25 ~ -15 درجه سانتیگراد نگهداری شود دور از نور برای 1 سال

دستورالعمل ها

1. واکنش سیستم پیکربندی*****

* مدل های Low Rox و مدل های بدون اصلاح Rox به طور مستقیم طبق سیستم واکنش فوق تهیه می شوند. هنگام استفاده از مدل High Rox، Hieff™ SP High Rox را به بافر 2 x Hifair™ Advanced SG در 1:250 v/v اضافه کنید، خوب مخلوط کرده و سانتریفیوژ کنید. 2× Hifair^™ بافر پیشرفته SG با Hieff™ SP High Rox بر استفاده از مدل‌های اصلاح Low Rox و No Rox تأثیری ندارد.

** غلظت نهایی پرایمر 0.2 میکرومول در لیتر بود که می‌توان آن را بین 0.1 و 1 میکرومول در لیتر نیز تنظیم کرد.

*** معرف بسیار حساس است، با RNA مجموع در محدوده 1 pg-1 میکروگرم، و آزمایش نمونه های انسانی ورودی بهینه 1 pg-100 ng را نشان داد و مقدار کلی Ct را در محدوده 15-30 در صورت لزوم کنترل می کند.

**** توصیه می شود از 20 میکرولیتر یا 50 میکرولیتر برای اطمینان از اعتبار و تکرارپذیری تکثیر ژن هدف استفاده شود.

***** لطفاً در نیمکت فوق تمیز آماده شوید و از نوک ها و لوله های واکنش بدون باقیمانده هسته استفاده کنید. نکاتی در مورد کارتریج های فیلتر توصیه می شود. از آلودگی متقاطع و آلودگی آئروسل خودداری کنید.

2) برنامه واکنش

* دمای رونویسی معکوس را می توان با توجه به نیازهای آزمایشی بین 50-55 درجه سانتی گراد انتخاب کرد. برای نمونه های DNA، فرآیند رونویسی معکوس را می توان حذف کرد.

** در موارد خاص، دمای بازپخت / گسترش را می توان با توجه به مقدار Tm پرایمر تنظیم کرد، 60 درجه سانتی گراد توصیه می شود.

3) مدل قابل اجرا

مدل های ابزاری که نیازی به کالیبراسیون Rox ندارند:

Bio-Rad: CFX96، CFX384، iCycler iQ، iQ5، MyiQ، MiniOpticon، Opticon، Opticon 2، Chromo4؛

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q، Rotor-Gene 3000، Rotor-Gene 6000;

علم کاربردی Roche: LightCycler 480، LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

مدل های قابل اجرا Low Rox:

ABI 7500، 7500 Fast، ViiA7، QuantStudio 3 و 5، QuantStudio 6، 7، 12k Flex.

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

مدل های قابل اجرا High Rox*:

ABI 5700، 7000، 7300، 7700، 7900HT Fast، StepOne، StepOne Plus.

* برای مدل های High Rox، توجه داشته باشید که Hieff™ SP High Rox باید متناسب با 2 x Hifair اضافه شود.^™ بافر پیشرفته SG قبل از استفاده.

یادداشت ها

1. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است.
2. لطفا برای ایمنی خود با کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف کار کنید.

اسناد:

برگه اطلاعات ایمنی

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-سی-MSDS-HB230927.PDF

دفترچه راهنما