Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (High Rox) یک راه حل اولیه برای تقویت کمی PCR 2× زمان واقعی است که دارای شدت فلورسانس بالا، حساسیت و ویژگی بالا و بازده تقویت بالا است. جزء اصلی، Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase، با روش آنتی بادی گرم شروع می شود، که می تواند به طور موثری از تقویت غیر اختصاصی ناشی از بازپخت پرایمر در طول آماده سازی نمونه جلوگیری کند. در همان زمان، فرمول فاکتورهایی را برای افزایش کارایی تقویت واکنش PCR و تسهیل کننده هایی برای یکسان سازی تکثیر ژن ها با محتوای GC مختلف (30 تا 70٪) اضافه می کند، به طوری که PCR کمی می تواند رابطه خطی خوبی را در محدوده وسیعی از مناطق کمی به دست آورد. این محصول از واکنش تغییر رنگ مخلوط رنگ های مختلف برای نظارت بر عملیات پیپت استفاده می کند که به طور موثری وقوع خطاهای پیپت را کاهش می دهد.

ویژگی ها

ردیابی پیپت: خطر خطاهای از دست رفته/افزودن را کاهش دهید

تقویت عالی: خطی بودن خوب در یک محدوده خطی گسترده

دقت بالا: می تواند قالب ها را با اختلاف غلظت 2 برابر به دقت تشخیص دهد

تکرارپذیری خوب: تغییرپذیری کوچک بین چاهک در چاه های تکراری که منجر به تکرارپذیری بهتر می شود

پایدار و قابل اعتماد: سیستم واکنش را می توان به مدت 24 ساعت در دمای اتاق نگهداری کرد و محصول پس از 20 چرخه انجماد و ذوب بدون تأثیر باقی می ماند.

برنامه های کاربردی

تجزیه و تحلیل تفاوت بیان ژن

تحلیل کمی مطلق

مشخصات

اجزاء

حمل و نقل و ذخیره سازی

این محصول باید به مدت 1 سال در دمای -25~-15 درجه سانتیگراد نگهداری شود.

ارقام

شکل 1. نتایج قابل اعتمادی را می توان در محدوده دینامیکی به دست آورد.

با استفاده از 2 میکرولیتر از قالب های پلاسمید با گرادیان 10^1-10^7، ژن های مربوطه تکثیر شدند. هیف UNICON™ ترکیب اصلی ColorGPS می تواند به طور موثر محدوده مقدار الگوی 7 مرتبه بزرگی را تشخیص دهد و خطی بودن خوبی را در یک محدوده خطی گسترده به دست آورد.

شکل2. می تواند به دقت تفاوت غلظت قالب را 2 برابر تشخیص دهد.

با استفاده از 2 میکرولیتر پلاسمید رقیق شده در یک گرادیان 2 برابری به عنوان الگو، ژن های مربوطه تکثیر شدند. هیف UNICON™ ترکیب اصلی ColorGPS می تواند تفاوت غلظت قالب را به دقت حل کند.

شکل3. تنوع بین چاهی کوچک مشاهده می شود که تکرارپذیری بهتری را نشان می دهد.

با استفاده از ده‌ها نسخه از پلاسمید به‌عنوان الگو، تقویت با معرف‌های کمی فلورسنت مختلف مطابق با روش‌های مشخص‌شده در دستورالعمل‌های مربوطه انجام شد. مقادیر SD نشان می‌دهد که در مقایسه با دیگر معرف‌های رونویسی معکوس، محصول جدید تفاوت‌های کمتری بین چاه‌های تکراری و تکرارپذیری بهتر دارد.

شکل4. انعطاف پذیرتر، مناسب برای روش های استاندارد یا سریع.

در روش استاندارد، زمان دناتوراسیون و زمان گسترش به ترتیب بر روی 10 ثانیه و 30 ثانیه تنظیم می شود، در حالی که در روش سریع، زمان دناتوراسیون و زمان گسترش به ترتیب به 3 ثانیه و 10 ثانیه برای تشخیص مقادیر Ct مربوط به 10 ژن هدف تنظیم می شود.نتایج نشان می دهد که مقادیر Ct به دست آمده با محصول جدید در هر دو روش استاندارد و سریع دارای همبستگی قوی هستند و محصول جدید می تواند با استفاده از روش سریع به نتایج خوبی دست یابد.

شکل5. پس از آماده شدن سیستم واکنش، می تواند به مدت 24 ساعت در دمای اتاق پایدار بماند.

با استفاده از ژن‌های مختلف سلول‌های 293 موش، انسان و Arabidopsis thaliana به عنوان هدف، پس از آماده‌سازی سیستم واکنش، به مدت 24 ساعت در تاریکی در دماهای مختلف قبل از شناسایی قرار گرفت. در مقایسه با پردازش فوری، تفاوت تشخیص برای ژن‌های مختلف از 0.5 Ct تجاوز نمی‌کند، که نشان می‌دهد نتایج پایداری نیز با عملیات طولانی‌مدت به دست می‌آید.

اسناد:

دفترچه راهنما

11190_دستی_نسخه EN20241218pdf