شرح
CRISPR/Cas9 تکنیکی است که در آن Cas nuclease هدایتشده با RNA برای ایجاد تغییرات خاص DNA در ژنهای هدف، که یک مکانیسم دفاعی ایمنی اکتسابی است که توسط باکتریها و باستانباکتریها در پاسخ به حملات فاژها و پلاسمیدهای خارجی تکامل یافته است. در این سیستم، نوکلئاز Cas9 با RNA راهنما (sgRNA) بهینه سازی شده مصنوعی هدایت می شود تا DNA دو رشته ای (dsDNA) را در محل مورد نظر قطع کند و باعث شکسته شدن DNA شود. DNA با اتصال انتهایی غیر همولوگ یا مکانیزم ترمیم جهت هدایت هومولوژی در داخل بدن ترمیم می شود که منجر به جهش، جایگزینی یا حذف ژن ها می شود.
کیت سنتز sgRNA HifairTM از یک مخلوط RNA پلیمراز T7 برای رونویسی موثر sgRNA spCas9 استفاده می کند. کیت حاوی یک توالی خاص است که توسط پروتئین Cas9 شناخته می شود و به عنوان یک داربست عمل می کند. بخشی از توالی می تواند تا حدی با توالی خاص هدف طراحی شده توسط کاربر همپوشانی داشته باشد. رشته های مکمل توسط DNA پلیمراز پر می شود تا الگوهای dsDNA برای رونویسی تولید شود. با استفاده از معرف عرضه شده و توالی های DNA خاص طراحی شده توسط کاربر، کیت می تواند 20-100 بدست آورد. μگرم از sgRNA عملکردی در عرض 4 ساعت در یک واکنش تک لوله ای.
ویژگی ها
بازده سنتز بالا: در یک واکنش تک لوله ای طی 4 ساعت، بازده sgRNA می تواند به 20 تا 100 میکروگرم برسد.
دامنه کاربرد گسترده: راندمان بالا را می توان برای انواع مختلف sgRNA به دست آورد.
خلوص بالا: sgRNA سنتز شده دارای یک باند است.
فعالیت بالا: sgRNA سنتز شده می تواند به طور موثر Cas9 را برای جدا کردن DNA هدف هدایت کند.
برنامه های کاربردی
ویرایش ژن CRISPR/Cas
اجزاء
اجزای شماره | نام | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
11355-الف | مخلوط آنزیم 10×sgRNA | 10 میکرولیتر | 50 میکرولیتر | 100 میکرولیتر | 200 میکرولیتر |
11355-ب | بافر واکنش 10×sgRNA | 10 میکرولیتر | 50 میکرولیتر | 100 میکرولیتر | 200 میکرولیتر |
11355-C | 2× مخلوط آنزیم Canace | 62.5 میکرولیتر | 312.5 میکرولیتر | 625 میکرولیتر | 1.25 میلی لیتر |
11355-د | قالب داربست | 6.25 میکرولیتر | 31.25 میکرولیتر | 62.5 میکرولیتر | 125 میکرولیتر |
11355-E | NTP (هر کدام 25 میلی متر) | 40 میکرولیتر | 200 میکرولیتر | 400 میکرولیتر | 800 میکرولیتر |
11355-F | کنترل sgRNA الیگو (10 μم) | 2 میکرولیتر | 10 میکرولیتر | 20 میکرولیتر | 40 میکرولیتر |
حمل و نقل و ذخیره سازی
این محصول باید در دمای -25 تا -15 نگهداری شودoسی برای 2 سال
ارقام
شکل 1.مقدار سنتز sgRNA در مقاطع زمانی مختلف
شکل 2.بازده سنتز sgRNA با توالی های مختلف
شکل 3.خلوص sgRNA سنتز شده (تعیین شده توسط Agilent 2100)
شکل 4.نمودار کارایی برش sgRNA
اسناد:
برگه اطلاعات ایمنی
دفترچه راهنما
11355_Manual_Ver.EN20240710.pdf
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامههای کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.