شرح
ریبونوکلئاز R (RNase R) از E. coli، یک اگزوریبونوکلئاز 3'→5' وابسته به منیزیم است که می تواند تمام RNA های خطی را هضم می کند اما ساختارهای RNA دایره ای یا لاریات را هضم نمی کند. اکثر RNA های سلولی به استثنای tRNA ها، 5S RNA و لاریات های اینترون به طور کامل توسط RNase R هضم می شوند. RNase R برای غنی‌سازی circRNAها در نمونه‌های بیولوژیکی، شناسایی توالی‌های لاریات اینترونیک، شناسایی circRNAهای خارجی، مطالعه پیوند جایگزین استفاده می‌شود.
ویژگی ها
کارایی و کیفیت تضمین شده با گواهینامه ISO 13485.
به صورت عمده یا سفارشی موجود است.
به طور موثر RNA خطی را تجزیه می کند، در حالی که حلقه های لاریات و RNA های دایره ای را حفظ می کند.
هضم انتخابی RNA های خطی جداسازی RNA های حلقوی برای تولید پروتئین یا ساخت کتابخانه cDNA درونی را افزایش می دهد.
ارائه GMP-Grade RNAse R (14615)
مشخصات
| منبع | یک نوترکیب E. coli سویه حامل ژن RNAse R از E. coli |
| دمای مطلوب | 37 درجه سانتیگراد |
| بافر ذخیره سازی | 50 میلی‌مولار Tris-HCl، 100 میلی‌مولار NaCl، 0.1 میلی‌مولار EDTA، 0.1٪ Triton® X-100، 1 میلی متر DTT، 50٪ گلیسرول، pH 7.5 در 25 درجه سانتیگراد |
| تعریف واحد | یک واحد 1 میکروگرم پلی-r(A) را در 10 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد در 20 میلی مولار Tris-HCl (pH 8.0)، 100 میلی‌مولار KCl و 0.1 میلی‌مولار MgCl به نوکلئوتیدهای محلول در اسید تبدیل می‌کند.2. |
برنامه
RNase R به عنوان یک جزء اساسی در سنتز RNA دایره ای (circRNA) عمل می کند. CircRNA نویدبخش افزایش پایداری دارویی و زیست پایداری است. circRNAها با ساختارهای بسته کووالانسی خود، در برابر اگزونوکلئازهای RNA مقاومت می کنند. [1،2] RNase R کاربرد گسترده‌ای در مطالعات مختلف پیدا می‌کند، از جمله پیرایش جایگزین، تولید cDNA اینترون، و جداسازی واسطه‌ها و لاریات‌های پیوند.
اجزاء
| اجزای شماره | نام | 14606ES72 | 14606ES86 | 14606ES92 |
| 14606-A | RNase R (20 U/μL) | 12.5 میکرولیتر | 125 میکرولیتر | 500 میکرولیتر |
| 14606-B | بافر واکنش 10×RNase R | 250 میکرولیتر | 3 × 1 میلی لیتر | 10 میلی لیتر |
ذخیره سازی
این محصول باید به مدت 2 سال در دمای -25 ~ -15 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
دستورالعمل ها
سیستم واکنش زیر را در یک لوله میکروسانتریفیوژ استریل آماده کنید
| جزء | حجم |
| بافر واکنش 10×RNase R | 2 μL |
| نمونه RNA | 1 میکروگرم |
| RNase R (20 U/μL) | 2-4 U |
| ddH بدون RNase2O | تا 20 μL |
جوجه کشی در دمای 37 ℃ برای 10 - 30 دقیقه.
ارقام
شکل 1: مولکول های RNA خطی را می توان توسط Yeasen RNAse R هضم کرد.
شکل 2: CircRNA توسط Yeasen RNAse R قابل هضم نیست.
یادداشت ها
- فعالیت RNase R به 0.1-1.0 میلی مولار Mg نیاز دارد2+;
- با افزایش RNA، زمان واکنش را می توان افزایش داد و مقدار آنزیم را می توان به طور مناسب افزایش داد.
- محتوای EDTA در نمونه‌های RNA ممکن است بر فعالیت RNase R تأثیر بگذارد.
- انکوبه در دمای 70 درجه به مدت 10 دقیقه می تواند آنزیم را غیرفعال کند.
مرجع
- Qu L، Yi Z، Shen Y، و همکاران. واکسن های RNA دایره ای علیه SARS-CoV-2 و انواع در حال ظهور. سلول 2022؛ 185 (10): 1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- چن ال، وانگ سی، سان اچ، و همکاران. جعبه ابزار بیوانفورماتیک برای کشف و تجزیه و تحلیل circRNA. بیوانفورم مختصر 2021؛ 22 (2): 1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001
دفترچه راهنما
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.