شرح
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step Probe Kit RT-qPCR (UDG Plus) یک کیت PCR کمی چندگانه بر اساس RNA به عنوان الگو است. در فرآیند آزمایش، رونویسی معکوس و PCR کمی در همان لوله انجام شد که عملیات آزمایشی را ساده کرد و خطر آلودگی را کاهش داد.
در این کیت، اولین رشته cDNA به طور موثر توسط Hifair™ مقاوم در برابر حرارت سنتز شد. ترانس کریپتاز معکوس و به طور کمی توسط UNICON™ تقویت شده است HotStart Taq DNA Polymerase. این کیت عمدتا حاوی بافر MP بهینه شده، ترکیب آنزیم ها است. محلول بافر از قبل حاوی منیزیم است2+ و dNTP Mix. علاوه بر این، عواملی که می توانند به طور موثری تقویت غیر اختصاصی PCR را مهار کنند و راندمان تقویت چندین واکنش qPCR را بهبود بخشند، اضافه می شوند که می توانند کارایی تقویت را تضمین کنند و تا واکنش تقویت چندگانه را انجام دهند. سیستم dUTP/UDG برای جلوگیری موثر از خطر آلودگی آئروسل اضافه شد.
ویژگی
ویژگی ها
1. جیتطبیق پذیری: برای تقویت qPCR و تشخیص اسیدهای نوکلئیک میکروارگانیسم های بیماری زا، ژنوم انسان، گیاهان و سایر گونه ها مناسب است..
2. حساسیت بالا: سیستم بافر با دقت بهینه سازی شده، حساسیت تشخیص الگوهای کم غلظت را تا 250 کپی در میلی لیتر بهبود می بخشد..
3. سیستم dUP/UDG: dUTP/ سیستم ضد آلودگی UDG حساس به حرارت برای کاهش آلودگی آئروسل محصولات به طور موثر، کاهش مثبت کاذب و اطمینان از نتایج معتبر معرفی شده است..
4. پشتیبانی کنیدing برنامه سریع: سازگار با برنامه سریع 40 دقیقه.
5. پایداری فوق العاده: پایداره در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 14 روز، انجماد و ذوب را 10 بار تکرار کنید.
مشخصات
اجزای شماره | 16901ES60 / 16901ES80 / 16901ES92 |
اندازه | 100 T / 1000 تی / 10000 ت |
اجزاء
نام | 16901ES60 (100T) | 16901ES80 (1000 تن) | 16901ES92 (10000 تن) | |
16901-الف | 500 میکرولیتر | 5 میلی لیتر | 50 میلی لیتر | |
16901-ب | Hifair™ مخلوط آنزیمی | 100 میکرولیتر | 1 میلی لیتر | 10 میلی لیتر |
توجه داشته باشید: 1) 5×Hifair™ MP Buffer مخفف Hifair™ است Superior Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer که شامل dNTPs، dUTP، Mg است.2+، تثبیت کننده ها و موارد دیگر.
2) Hifair™ مخلوط آنزیمی عمدتا شامل Hifair™ رونوشت معکوس، UNICON™ پلیمرهای HotStart Taq DNAبازدارنده RNaseinhibitor، و UDGase و غیره.
ذخیره سازی
این محصول باید به مدت 1 سال در دمای 25- ~ 15- درجه سانتیگراد نگهداری شود. باید از انجماد و ذوب مکرر خودداری شود.
دستورالعمل ها
حجم (میکرولیتر) | غلظت نهایی | |
5×Hifair™ بافر MP | 5 | 1× |
Hifair™ مخلوط آنزیمی | 1 | - |
مخلوط پرایمر (10 میکرومولار) | هر کدام 0.4 | 0.16 میکرومولار |
مخلوط پروب (10 میکرومولار) | هر کدام 0.2 | 0.08 میکرومولار |
1-5 | - | |
RNase Free H2O | تا 25 | - |
1. ترکیب واکنش:
توجه داشته باشید:حتما قبل از استفاده خوب مخلوط کنید، از ایجاد حباب بیش از حد ناشی از لرزش شدید اجتناب کنید.
الف) غلظت پرایمر: پرایمر مخلوط شامل پرایمر مالتی پلکس، بسته به موقعیت، غلظت بهینه پرایمر ممکن است بین 0.1 تا 1.0 میکرومولار باشد.
ب) غلظت پروب: مخلوط پروب شامل گروه فلورسنت تفاوت برچسب زدن پروب چندگانه، بسته به موقعیت غلظت پروب بهینه ممکن است بین 0.05 و 0 باشد.5 μM.
ج) رقیق سازی الگو: qPCR بسیار حساس است و توصیه می شود که قالب را رقیق کنید. مقدار Ct کنترلی بین 20 تا 35 مناسب است.
د) آماده سازی سیستم: un head با عنصر فیلتر. از آلودگی متقاطع و آلودگی آئروسل خودداری کنید.
2. پروتکل دوچرخه سواری بهینه شده
(1) روش استاندارد تقویت
مرحله واکنش | دما | زمان | چرخه | |
1 | رونویسی معکوس | 50 درجه سانتی گرادالف | 1 | |
2 | دناتوراسیون اولیه | 95 درجه سانتی گراد | 5 دقیقه | 1 |
3 | واکنش تقویت | 95 درجه سانتی گراد | 15 ثانیه | 45 سیکل |
60 درجه سانتی گرادب | 30 ثانیهج |
توجه داشته باشید:
الف) رونویسی معکوس: دما را می توان انتخاب کرد 50درجه سانتیگراد یا 55درجه سانتی گراد به مدت 10-15 دقیقه.
ب) واکنش تقویت: درجه حرارت با توجه به مقدار Tm پرایمرهای طراحی شده تنظیم می شود.
ج) دریافت سیگنال فلورسانس: لطفاً روش آزمایشی را مطابق با الزامات تنظیم کنید ساز کتابچه راهنمای کاربر.
(2) برنامه تقویت سریع
| مرحله واکنش | دما | زمان | چرخه |
1 | رونویسی معکوس | 50 درجه سانتی گراد | 5 دقیقه | 1 |
2 | دناتوراسیون اولیه | 95 درجه سانتی گراد | 30 ثانیه | 1 |
3 | واکنش تقویت | 95 درجه سانتی گراد | 5 ثانیه | 45 سیکل |
60 درجه سانتی گراد | 20 ثانیه |
توجه داشته باشید:اگر آشکارساز qPCR واقعی از تقویت سریع پشتیبانی میکند، لطفاً یک آزمایش پیشآزمون برای تأیید انجام دهید.
3. تجهیزات کاربردی
ABI 5700، 7000، 7300، 7700، 7900HT Fast، StepOne™، StepOne Plus™،ABI 7500، 7500 Fast، ViiA™7، QuantStudio™ 3 و 5، QuantStudio™ 6،7،12k Flex;
Stratagene MX3000P™، MX3005P™، MX4000P™;
بیو راد CFX96™، CFX384™، iCycler iQ™، iQ™5، MyiQ™، MiniOpticon™، Opticon®، Opticon® 2، Chromo4™;
اپندورف Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
کیاگن Corbett Rotor-Gene® Q، Rotor-Gene® 3000، Rotor-Gene® 6000;
روشه Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96;
ترمو علمی PikoReal Cycler; قیفاووس SmartCycler®; ایلومینا Eco qPCR; SLAN 96S، 96P.
یادداشت ها
لطفاً برای اطمینان از سلامت و ایمنی خود از تجهیزات حفاظتی لازم، مانند کت و دستکش آزمایشگاهی استفاده کنید!
لطفا از مواد مصرفی RNasefree استفاده کنید برای آزمایش
این محصول برای تحقیق کنید فقط استفاده کنید!
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامههای کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.