شرح
این مغناطیسی باقیمانده DNA نمونه کیت آماده سازی است مناسب برای را پیش درمان از باقی مانده DNA در مختلف بیولوژیکی نمونه ها می‌تواند جداسازی و خالص‌سازی مقادیر کمی از DNA باقیمانده سلول میزبان را در نمونه‌ها با استفاده از دانه‌های مغناطیسی منحصربه‌فرد و با دقت به حداکثر برساند. سیستم بافر بهینه شده
مغناطیسی کیت آماده سازی نمونه DNA باقیمانده می توان با انواع DNA باقیمانده سلول میزبان استفاده کرد کیت های تشخیص، از جمله کیت تشخیص باقیمانده DNA سلول میزبان CHO (Cat#41301ES)، کیت تشخیص باقیمانده DNA سلول میزبان HEK293 (Cat#41302ES)، کیت تشخیص باقیمانده DNA سلول میزبان Vero (Cat#41303ES)، و کیت تشخیص باقیمانده DNA سلول میزبان E.coli (Cat#41304ES).
اجزای محصول
| دسته بندی | اجزاء خیر | اجزاء نام | گربه#/اندازه | |
| 18461ES25 (25T) | 18461ES60 (100T) | |||
| قسمت اول | 18461-A | پروتئیناز K (20 میلی گرم در میلی لیتر) | 0.5 میلی لیتر / ویال x1 ویال | 1 میلی لیتر / ویال x2 ویال |
| قسمت Ⅱ | 18461-B | ذرات مغناطیسی | 0.5 میلی لیتر / ویال x1 ویال | 1 میلی لیتر / ویال x2 ویال |
| 18461-C | لیز بافر | 2.5 میلی لیتر / ویال x1 ویال | 10 میلی لیتر / ویال x1 ویال | |
| 18461-D | محلول الزام آور | 10 میلی لیتر / ویال x1 ویال | 40 میلی لیتر / ویال x1 ویال | |
| 18461-E | بافر شستشو A* | 6 میلی لیتر / ویال x1 ویال (قبل از استفاده 9 میلی لیتر اتانول اضافه کنید) | 24 میلی لیتر / ویال x1 ویال (قبل از استفاده 36 میلی لیتر اتانول اضافه کنید) | |
| 18461-F | بافر شستشو B* | 3 میلی لیتر / ویال x1 ویال (قبل از استفاده 12 میلی لیتر اتانول اضافه کنید) | 12 میلی لیتر / ویال x1 ویال (قبل از استفاده 48 میلی لیتر اتانول اضافه کنید) | |
| 18461-G | بافر شستشو | 2.5 میلی لیتر / ویال x1 ویال | 10 میلی لیتر / ویال x1 ویال | |
| بخش Ⅲ | 18461-H | گلیکوژن | 225 میکرولیتر/ویال x1 ویال | 900 میکرولیتر/ویال x1 ویال |
| 18461-I | نمک پتاسیم پلی (A). | 150 میکرولیتر / ویال x1 ویال | 600 میکرولیتر / ویال x1 ویال | |
حمل و نقل و ذخیره سازی
1. قسمت اول با کیسه یخ، 4 درجه سانتیگراد به مدت 1 سال یا ارسال می شود -20 درجه سانتیگراد برای نگهداری طولانی مدت.
2. قسمت دوم در دمای اتاق ارسال می شود و به مدت 1 سال در دمای اتاق ذخیره می شود.
3. قسمت III بر روی یخ خشک ارسال می شود و در دمای -20 درجه سانتی گراد نگهداری می شود به مدت 1 سال
4. لطفا پس از دریافت کالا، کامل بودن سه جزء قسمت اول، دوم و سوم را بررسی کنید و بلافاصله آنها را در دمای نگهداری مربوطه نگهداری کنید.
هشدارها
1. لطفاً قبل از استفاده، دفترچه راهنما را به دقت بخوانید و مطابق با دستورالعمل دستورالعمل عمل کنید. پردازش نمونه توصیه می شود روی یک نیمکت تمیز یا یک کابینت ایمنی بیولوژیکی انجام شود.
2. توجه داشته باشید که آیا بارندگی یا کدورت محلول ذخیره شده در دمای اتاق وجود دارد (مخصوصاً زمانی که دمای اتاق پایین است مانند زمستان)، می توانید برای جلوگیری از تأثیرگذاری بر اثر استفاده، در دمای 37 درجه سانتی گراد حمام آب بگیرید تا محلول شفاف شود.
3. ممکن است دانه های مغناطیسی باقیمانده در طول شستشو وجود داشته باشد، بنابراین سعی کنید در هنگام کشیدن نمونه از آسپیراسیون مهره های مغناطیسی خودداری کنید.
4. لطفاً هنگام کار با این محصول، نکات را مرتباً تغییر دهید تا از آلودگی متقابل جلوگیری کنید.
5. برای ایمنی و سلامتی خود، لطفاً هنگام کار با این محصول از تجهیزات حفاظت فردی (PPE) مانند روپوش آزمایشگاهی و دستکش یکبار مصرف استفاده کنید.
6. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است!
پیش آماده سازی
1. تجهیزات خود ارائه شده: لرزاننده گرداب، حمام آب یا حمام فلزی، سانتریفیوژ، قفسه جداسازی مغناطیسی، استخراج کننده خودکار اسید نوکلئیک Hangzhou Aosheng Auto-Pure32A یا سایر مارک های استخراج کننده اسید نوکلئیک کاملاً خودکار.
2. مواد مصرفی خود تهیه شده: 10μL-1000μL نوک فیلتر با جذب کم، لوله های سانتریفیوژ 1.5 میلی لیتری با جذب کم، لوله های PCR یا صفحات 96 چاهی و درپوش ها یا غشاهای لوله مربوطه.
3. معرف های خود تهیه شده: اتانول مطلق (گرید تحلیلی)، بافر 1×PBS (pH 7.4، بدون یون های منیزیم و کلسیم)، آب فوق خالص.
4. برای اولین استفاده، اتانول بدون آب با حجم مشخص شده روی برچسب یا دستورالعمل ها را به بطری های محلول شستشوی A* و محلول شستشوی B* اضافه کنید. قبل از استفاده کاملاً مخلوط کنید و آنها را به خوبی علامت بزنید. پس از استفاده درب بطری را محکم ببندید تا سطح اتانول در بطری حفظ شود.
استخراج دستی DNA باقیمانده
1. پردازش نمونه
1.1 اگر نمونه حاوی محتوای DNA نسبتاً بالایی است، مانند واکسن، لطفاً آن را به نسبت مناسب با بافر 1×PBS (pH 7) رقیق کنید.4، بدون یون های منیزیم و کلسیم) و سپس استخراج کنید (رقت نمونه برای این است که مقدار تشخیص در محدوده خطی منحنی استاندارد باشد و سپس از صحت تشخیص اطمینان حاصل شود. و معمولاً می توان رقت 100 برابری را در نظر گرفت).
1.2 اگر نمونه مورد آزمایش قرار گیرد پودر خشک است، آن را رقیق کنید 10 میلی گرم در میلی لیتر یا 100 میلی گرم در میلی لیتر با آب فوق خالص قبل از استفاده
1.3 اگر نمونه دارای ماتریس پیچیده باشد، برای تعیین رقت مناسب باید یک آزمایش استاندارد افزودن و بازیابی انجام شود.
2. 100 میکرولیتر نمونه را به لوله 1.5 میلی لیتری اضافه کنید. سپس 100 میکرولیتر بافر لیز، 10 میکرولیتر پروتئیناز K، ورتکس را اضافه کرده و به مدت 10 ثانیه مخلوط کنید.
[یادداشت]: اگر غلظت نمونه پروتئین 0-100 میلی گرم بر میلی لیتر باشد، 10 میکرولیتر پروتئیناز K اضافه کنید و اگر غلظت نمونه پروتئین 100-200 میلی گرم در میلی لیتر باشد، 20 میکرولیتر پروتئیناز K اضافه کنید.
3. در دمای 60 درجه سانتی گراد جوجه کشی کنید به مدت 20 دقیقه
4. سپس اضافه کنید 400 میکرولیتر از محلول اتصال، 9 میکرولیتر گلیکوژن و 6 میکرولیتر نمک پتاسیم پلی A، ورتکس کرده و خوب مخلوط کنید.
5. 20 میکرولیتر از دانه های مغناطیسی را اضافه کنید، ورتکس کنید و خوب مخلوط کنید و بگذارید 10 دقیقه بماند. لطفا ورتکس کنید و به مدت 10 ثانیه مخلوط کنید هر 3 دقیقه
[یادداشت ها]: برای اطمینان از اینکه مهره های مغناطیسی کاملاً معلق هستند، قبل از استفاده باید مهره های مغناطیسی گردابی شوند. پس از افزودن نمونه ها 4-5 بار در یک بار، توصیه می شود دوباره مخلوط کنید.
7. مدت کوتاهی سانتریفیوژ کنید تا محلول پایین بیاید و لوله سانتریفیوژ را به مدت 1-2 دقیقه روی قفسه مغناطیسی قرار دهید. پس از جذب کامل دانه های مغناطیسی، مایع را با دقت خارج کنید.
8. 500 میکرولیتر محلول شستشوی A اضافه کنید (لطفاً بررسی کنید که آیا اتانول مطلق قبل از استفاده اضافه شده است)، تکان دهید یا گرداب بزنید تا مطمئن شوید که دانه های مغناطیسی پراکنده شده اند و هیچ دانه مغناطیسی روی دیواره لوله سانتریفیوژ جمع نشده است.
9. برای مدت کوتاهی سانتریفیوژ کنید و لوله سانتریفیوژ را به مدت 1-2 دقیقه روی یک قفسه مغناطیسی قرار دهید. پس از جذب کامل دانه های مغناطیسی، مایع را با دقت خارج کنید.
10. 500 میکرولیتر محلول شستشوی B اضافه کنید (لطفا قبل از استفاده بررسی کنید که آیا اتانول مطلق اضافه شده است یا خیر) برای اطمینان از پراکندگی مهره های مغناطیسی و عدم تجمع دانه های مغناطیسی روی دیواره لوله سانتریفیوژ، آن ها را تکان دهید یا ورتکس کنید تا مخلوط شوند.
11. برای مدت کوتاهی سانتریفیوژ کنید و لوله سانتریفیوژ را به مدت 1-2 دقیقه روی یک قفسه مغناطیسی قرار دهید. پس از جذب کامل دانه های مغناطیسی، مایع را با دقت خارج کنید.
12. برای اطمینان از اینکه مایع باقیمانده تا حد ممکن حذف می شود، لوله را به مدت 10 ثانیه سانتریفیوژ کنید. به سرعت آن را روی یک قفسه مغناطیسی قرار دهید و از یک پیپت 10 میکرولیتری برای آسپیره کردن مایع باقیمانده استفاده کنید.
13. درب لوله را باز کرده و به مدت 3 دقیقه در دمای اتاق قرار دهید تا زمانی که اتانول کاملاً تبخیر شود. هیچ انعکاس یا ترک ظاهری روی سطح مهره های مغناطیسی نشان می دهد که اتانول کاملاً تبخیر شده است.
14. لوله را از پایه مغناطیسی خارج کنید، 50-100 میکرولیتر از مایع شستشوی از قبل گرم شده در دمای 65 درجه سانتیگراد اضافه کنید، تکان دهید و خوب مخلوط کنید. سپس برای مدت کوتاهی سانتریفیوژ کرده، آن را در دمای 65 درجه سانتیگراد به مدت 5 دقیقه انکوبه کنید، تکان دهید و هر 2 تا 3 دقیقه یک بار مخلوط کنید.
15. دوباره به طور خلاصه سانتریفیوژ کنید، لوله سانتریفیوژ را به مدت 2 دقیقه روی پایه مغناطیسی قرار دهید. پس از جذب کامل دانه های مغناطیسی، محلول DNA را با دقت به یک لوله سانتریفیوژ جدید منتقل کنید و آن را در دمای 20- درجه سانتیگراد یا 80- درجه سانتیگراد برای نگهداری طولانی مدت نگهداری کنید.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.