فسفوریلاسیون و دفسفوریلاسیون پروتئین ها در سلول ها کلیدهای تنظیم کننده بسیاری از فعالیت های مهم بیولوژیکی مانند انتقال سیگنال، تکثیر سلولی، تمایز سلولی و آپوپتوز هستند. بنابراین، کنترل عمل فسفاتازها از اهمیت فیزیولوژیکی قابل توجهی در تحقیقات پروتئینی برخوردار است. بافت ها و سلول ها با تعداد زیادی پروآنزیم پر می شوند که پس از لیز کاملاً فعال می شوند و شروع به هضم پروتئین های اطراف می کنند. بنابراین، حفاظت از حالت فسفوریلاسیون پروتئین ها در مطالعه مسیرهای فسفوریلاسیون پروتئین و انتقال سیگنال بسیار حیاتی است.

این محصول مخلوط ویژه ای از مهارکننده های فسفاتاز متعدد است که به طور گسترده فسفاتازهای اسیدی/قلیایی غیر اختصاصی و همچنین پروتئین تیروزین فسفاتازهای خاص، پروتئین فسفاتازهای سرین/ترئونین (PPA، PP2A) و غیره را مهار می کند.

این محصول در قالب لوله های A و B ارائه می شود و این دو محلول می توانند انواع مختلفی از فسفاتازها را برای اعمال اثرات مهاری هم افزایی مورد هدف قرار دهند.

لوله A حاوی Cantharidin، Bromotetramisole و Microcystin-LR است که به عنوان یک محلول آماده برای استفاده در DMSO ارائه شده است، و ایزوآنزیم L آلکالین فسفاتاز و پروتئین فسفاتازهای سرین/ترئونین، مانند پروتئین فسفاتاز 1 و 2A (PP1 و PP2A) را مهار می کند. لوله B حاوی اورتووانادات سدیم، مولیبدات سدیم، تارتارات سدیم، ایمیدازول و فلوراید سدیم است که به عنوان محلول آماده برای استفاده در ddH2O ارائه شده است که پروتئین فسفاتازهای تیروزین، فسفاتازهای اسیدی و فسفاتازهای قلیایی را مهار می کند.

این محصول را می توان برای WB، Co-IP، Pull-down assay، IF، IHC، تحقیقات کیناز و آنالیزهای مختلف دیگر استفاده کرد.

اجزاء

حمل و نقل و ذخیره سازی

این محصول با بسته یخ ارسال می شود و می توان آن را در 15-~-25 نگهداری کرد℃ به مدت 1 سال یا در 2 تا 8 ذخیره می شود℃ به مدت 2 ماه

دستورالعمل ها

قبل از استفاده، محصول را از یخچال خارج کرده و اجازه دهید تا به دمای اتاق برسد. محلول A و محلول B را به نسبت 1:100 (v/v) به نمونه اضافه کنید و پس از هر افزودن کاملاً مخلوط کنید.

1. حلال لوله A DMSO و برای لوله B ddH2O است. DMSO کندتر حل می شود، بنابراین برای حل کامل محلول A در مقایسه با محلول B زمان بیشتری طول می کشد. در دماهای پایین تر، محلول A را می توان در 25 قرار داد℃ حمام آب برای انحلال

2.مخلوط کردن محلول های A و B قبل از استفاده به راحتی می تواند رسوب ایجاد کند، بنابراین باید از این روش اجتناب شود. توصیه می شود مقادیر مناسبی از محلول A و محلول B را جداگانه به نمونه اضافه کنید.

3. این محصول می تواند 1% SDS، Triton، NP-40 را تحمل کند.

یادداشت ها

1. توصیه می شود برای جلوگیری از تکرار چرخه های انجماد و ذوب، محلول 100× استوک را به مقدار کمی و منجمد کنید. محلول های کاری باید تازه تهیه شوند.

2. این محصول حاوی مهارکننده های پروتئاز نمی باشد. مهارکننده های پروتئاز مناسب را می توان به نمونه اضافه کرد تا با توجه به نیازهای تجربی آنالیز شود.

3. حلال لوله A DMSO است، لطفا با احتیاط رفتار کنید.

4. DTT، EDTA، EGTA و غیره ممکن است بر سدیم ارتووانادات موجود در این محصول تأثیر بگذارند، بنابراین با احتیاط رفتار کنید.

5. لطفاً برای اطمینان از سلامت و ایمنی خود، تجهیزات حفاظتی لازم، مانند کت و دستکش آزمایشگاهی را بپوشید!

6. فقط برای استفاده تحقیقاتی!

اسناد:

برگه اطلاعات ایمنی

20109-A-MSDS-CN20250110

20109-B-MSDS-CN20250110

دفترچه راهنما

20109_Manual_CN20250107_EN

استنادها و مراجع:

[1] Zhu R، Yan T، Feng Y، و همکاران. درمان سلول‌های بنیادی مزانشیمی از طریق مکانیسم‌های تعدیل‌کننده ایمنی متعدد، نتیجه بیماران COVID-19 را بهبود می‌بخشد. Cell Res. 2021؛ 31 (12): 1244-1262. doi:10.1038/s41422-021-00573-y(IF:25.617)

[2] لیو اچ، ژو وای، کیو اچ، و همکاران. Rab26 مهاجرت و تهاجم به سلول های سرطان سینه را از طریق تخریب اتوفاژیک Src فسفریله شده سرکوب می کند. سلول مرگ دیس. 2021؛ 12 (4): 284. منتشر شده در 17 مارس 2021. doi:10.1038/s41419-021-03561-7(IF:8.469)

[3] Chen Z، Xie J، Li Q، و همکاران. کلاستوژنیسیته 2-اتیل هگزیل دی فنیل فسفات (یک بازدارنده شعله) در سلول های پستانداران که توسط آنزیم CYP انسانی فعال می شود. آلودگی محیط زیست 2021؛ 285:117527. doi:10.1016/j.envpol.2021.117527(IF:8.071)

[4] Sun J، Guo Y، Fan Y، Wang Q، Zhang Q، Lai D. کاهش بیان IDH1 توسط استرس مزمن غیرقابل پیش بینی، تکثیر را سرکوب می کند و پیری سلول های گرانولوزا را از طریق مسیرهای سیگنالینگ MAPK فعال شده با ROS تسریع می کند. رادیک آزاد بیول مد. 2021؛ 169: 122-136. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2021.04.016(IF:7.376)

[5] Yang BY، Deng GY، Zhao RZ، و همکاران. متخلخل Se@SiO2 nanoکاتتر روکش کروی با تعدیل پلاریزاسیون ماکروفاژها از طریق مهار مسیر گونه های اکسیژن فعال-NF-kB، بهبود زخم مجرای ادرار پروستات را تسریع می کند. Acta Biomater. 2019؛ 88:392-405. doi:10.1016/j.actbio.2019.02.006(IF:6.638)

[6] Zhang Y، Li G، Zhang X، Lin L. گلیکو نانوپلتفرم مهارکننده ROS برای درمان هم افزایی ضد باکتریایی و ترمیم زخم کراتیت باکتریایی. J Mater Chem B. 2022؛ 10 (24): 4575-4587. منتشر شده در 22 ژوئن 2022. doi:10.1039/d2tb00667g(IF:6.331)

[7] دنگ ال، لی اچ، سو ایکس، و همکاران. کلرزوکسازون، یک داروی مولکولی کوچک، ظرفیت سرکوب کننده سیستم ایمنی سلول های بنیادی مزانشیمی را از طریق مدولاسیون فسفوریلاسیون FOXO3 افزایش می دهد. سلول مرگ دیس. 2020؛ 11 (3): 158. منتشر شده در 2 مارس 2020. doi:10.1038/s41419-020-2357-8(IF:6.304)

[8] Zhang X، Cai Z، Wu M، Huangfu X، Li J، Liu X. اگزوزوم‌های مشتق از سلول‌های بنیادی چربی متابولیسم ماتریکس مختل تاندون‌های روتاتور کاف انسان را با حفظ هموستاز بافتی بازیابی می‌کنند. Am J Sports Med. 2021؛ 49 (4): 899-908. doi:10.1177/0363546521992469(IF:6.203)

[9] Gao C، Wang SW، Lu JC، و همکاران. کمپلکس KSR2-14-3-3ζ به عنوان یک نشانگر زیستی و هدف درمانی بالقوه در سرطان کبدی مقاوم به سورافنیب عمل می کند. Biomark Res. 2022؛ 10 (1): 25. منتشر شده در 25 آوریل 2022. doi:10.1186/s40364-022-00361-9(IF:6.148)

[10] Chen L، Xu W، Yang Q، و همکاران. ایمپراتورین کاشکسی سرطان را کاهش می دهد و با مهار مستقیم STAT3 از تحلیل عضلات جلوگیری می کند. Pharmacol Res. 2020؛ 158:104871. doi:10.1016/j.phrs.2020.104871(IF:5.893)