روش BCA (بیسینکونیک اسید) در حال حاضر روشی پرکاربرد برای تعیین غلظت پروتئین است. بر اساس واکنش بیورت، یعنی در یک محیط قلیایی، پروتئین مس را کاهش می دهد²⁺ به مس⁺، یک کمپلکس آبی بنفش تولید می کند که در طول موج 562 نانومتر دارای مقدار جذب بالایی است. مقدار محصول واکنش متناسب با غلظت پروتئین است. روش تعیین غلظت پروتئین BCA ساده، حساس، سریع و پایدار است. استاندارد پروتئین ارائه شده در کیت راحتی را برای کاربران فراهم می کند تا منحنی های استاندارد را ایجاد کنند.
کیت تعیین غلظت پروتئین BCA را می توان برای سنجش رنگ سنجی و سنجش میکروپلیت استفاده کرد. اولی به مقدار زیادی (100 میکرولیتر) نمونه پروتئین نیاز دارد، نسبت نمونه پروتئین به محلول کاری BCA 1:20 (v/v) است، که تاثیر مواد مزاحم را کاهش می دهد. کارکرد دومی ساده و راحت است و فقط به مقدار کمی (25-10 میکرولیتر) نمونه پروتئین نیاز دارد. با این حال، به دلیل اینکه نسبت نمونه پروتئین به محلول کاری BCA 1:8 (v/v) است، غلظت تحمل مواد مزاحم تا حدی محدود شده و حداقل سطح تشخیص کاهش می‌یابد. شرکت ما سه اندازه کیت تشخیص غلظت پروتئین BCA را ارائه می دهد که روش رنگ سنجی را می توان به ترتیب 50 بار، 250 بار و 500 بار استفاده کرد. روش برچسب گذاری آنزیمی به ترتیب 500 بار، 2500 بار و 5000 بار قابل استفاده است.

ویژگی ها

• حساسیت بالا، با حداقل پروتئین تشخیص 0.2 میکروگرم. حد پایین تر غلظت تشخیص به 10 میکروگرم در میلی لیتر می رسد.
• نسبت به کیت عمومی تعیین غلظت پروتئین BCA سریعتر است و زمان کمتری برای ایجاد رنگ نیاز دارد. این روش حدود 4 برابر سریعتر از روش سنتی Lowry است.
• محدوده خطی گسترده، محدوده خطی خوبی در محدوده غلظت 20-2000 میکروگرم در میلی لیتر وجود دارد.
• در اکثر نمونه ها تحت تأثیر مواد شیمیایی قرار نمی گیرد.

برنامه

• کمیت پروتئین

مشخصات

اجزاء

ذخیره سازی

معرف A و معرف B در کیت باید در دمای اتاق یا 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شوند. استاندارد پروتئین (BSA) را می توان در دمای 25- ~ 15- درجه سانتیگراد به مدت 12 ماه در صورت عدم استفاده طولانی مدت نگهداری کرد.

ارقام

شکل 1.محدوده خطی خوب، R² مقادیر منحنی های استاندارد در بین دسته های مختلف همه بالاتر از 0.995 بود.