شرح
پروتئاز SUMO پروتئین کامل برچسب SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier) را با 100 اسید آمینه شناسایی می کند و به طور موثر SUMO را از پروتئین فیوژن جدا می کند. در مقایسه با مکان‌های تشخیص EK و TEV، پروتئاز SUMO به دلیل توالی تشخیص طولانی‌اش ویژگی بالایی دارد و فعالیت بالایی را در طیف گسترده‌ای از سیستم‌های محیطی واکنش، مانند دما (4-30 درجه سانتیگراد)، pH (5.5-9.5) و غیره حفظ می‌کند. SUMO پروتئاز همچنین دارای یک پروتئاز پروتئازی است که با پلیمریزه کردن پروتئین هدف به وسیله SU برچسب زدن و خالص‌سازی می‌شود. کروماتوگرافی میل ترکیبی
مشخصات
| گربه شماره | 20410ES60 / 20410ES70 / 20410ES80 |
| اندازه | 100 U / 500 U / 1000 U |
| فعالیت آنزیمی | 1 U/μL |
| واحد تعریف | مقدار آنزیم مورد نیاز برای برش دادن بیش از 85 درصد از بستر 3 میکروگرم در بافر 1×rTEV (50 میلی‌مولار Tris، pH 8.0، 0.1 میلی‌مولار EDTA، 1 میلی‌مولار DTT) در دمای 30 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت به‌عنوان واحد فعالیت تعریف شد. |
| منبع | بیان شده در E. coli |
| برچسب بزنید | برچسب او را پلیمریزه کرد |
| خلوص پروتئین | > 90% |
| وزن مولکولی | 26.55 کیلو دالتون |
| ذخیره سازی بافر | 25 میلی مولار Tris-HCl، pH 8.0،0.1٪ ایگپال (NP-40)،250 میلی مولار NaCl،500 میکرومولار DTT،50% گلیسیرین |
اجزاء
توجه داشته باشید：تعریف فعالیت آنزیم از بافر پروتئاز 10× استفاده می کند (-نمک). SUMO Protease فعالیت نسبتا بالایی دارد در 10× بافر پروتئاز (-نمک) اما برای بسترهای ناپایدار، بافر 10× پروتئاز (+ نمک) باید انتخاب شود. ما همچنین بافر واکنش 20410-B2 را با نمک + ارائه می دهیم.بافر صحیح را برای آزمایش خود انتخاب کنید. 20410-B2：500 میلی مولار Tris-HCl، pH 8.0، 2٪ ایگپال (NP-40)، 1.5 مولار NaCl، 10 میلی متر DTT；20410-B1：500 میلی مولار Tris-HCl، pH 8.0، 2٪ ایگپال (NP-40)، 10 میلی متر DTT. | ||||||||||||||||||||
ذخیره سازی
این محصول باید در -85~-65℃ به مدت 1 سال.
دستورالعمل ها
- سیستم واکنش زیر در لوله EP فرموله شده است:
- در دمای 30 درجه سانتیگراد انکوبه کنید، 20 میکرولیتر از محلول واکنش فوق را در 1، 2، 4 و 6 ساعت در یک لوله EP جداگانه مکش کنید. به ترتیب.
- 20 میکرولیتر اضافه کنید از 2×SDS بافر را در لوله EP قرار دهید و آن را در دمای -20 درجه سانتیگراد قرار دهید.
- پس از اتمام واکنش تمام نمونه ها، نمونه ها به مدت 5 دقیقه جوشانده شدند و 30 میکرولیتر برای آنالیز SDS-PAGE گرفته شد. زمان پاسخگویی بهینه را تعیین کنید.
| اجزاء | حجم (μL) (سیستم واکنش را می توان به همان اندازه کوچک کرد) |
| پروتئین فیوژن | 50 میکروگرم |
| 10× بافر پروتئاز | 20 μL |
| SUMO Protease (1U/μL) | 10 میکرولیتر |
| ddH2O | تا 200 میکرولیتر |
توجه: اگر پروتئین فیوژن نیاز به عملیات دمای پایین داشته باشد، محلول واکنش را می توان در دمای 4 درجه سانتیگراد قرار داد تا زمان واکنش طولانی شود و مقدار آنزیم SUMO برای اطمینان از اثر هضم آنزیم افزایش یابد.
جدول 1. SUMO پروتئاز فعالیت گوارشی در دماهای مختلف
| جوجه کشی زمان(ساعت) | فعالیت هضم در دماهای مختلف (%) | |||
| 4℃ | 16 درجه سانتیگراد | 25℃ | 30 درجه سانتیگراد | |
| 0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
| 1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
| 2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
| 3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
یادداشت ها
1. لطفاً برای اطمینان از سلامت و ایمنی خود از تجهیزات حفاظتی لازم، مانند کت و دستکش آزمایشگاهی استفاده کنید.
2. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است.
پرداخت و امنیت
اطلاعات پرداخت شما با اطمینان پردازش می شود. ما جزئیات کارت اعتباری را ذخیره نمی کنیم و به اطلاعات کارت اعتباری شما دسترسی نداریم.
تحقیق
شما همچنین ممکن است دوست داشته باشید
پرسش
این محصول فقط برای اهداف تحقیقاتی است و برای استفاده درمانی یا تشخیصی در انسان یا حیوانات در نظر گرفته نشده است. محصولات و محتوا توسط پتنت ها، علائم تجاری، و حق چاپ متعلق به Yeasen Biotechnology محافظت می شوند. نمادهای علامت تجاری نشان دهنده کشور مبدا هستند، نه لزوما ثبت در همه مناطق.
برخی از برنامه‌های کاربردی ممکن است به حقوق مالکیت معنوی شخص ثالث دیگری نیاز داشته باشند.
Yeasen به علم اخلاق اختصاص داده شده است و معتقد است که تحقیقات ما باید به سؤالات مهم و در عین حال اطمینان از ایمنی و استانداردهای اخلاقی بپردازد.