پروتئین طبیعی A یک پروتئین سطح دیواره سلولی است که در استافیلوکوکوس اورئوس یافت می شود و شبیه پروتئین G جدا شده از جنس جی یا سی استرپتوکوک، باند بیشتر پستاندار IgG توسط در حال تعامل در درجه اول با را Fc منطقه از ایمونوگلوبولین (Ig)، اما در ویژگی اتصال آنها متفاوت است. می توان از آن برای جداسازی و خالص سازی انواع آنتی بادی ها (آنتی بادی مونوکلونال و آنتی بادی پلی کلونال) استفاده کرد. پروتئین A و پروتئین G از نظر خواص اتصال به زیر کلاس های مختلف ایمونوگلوبولین متفاوت هستند (برای جزئیات به پیوست 1 مراجعه کنید).
این محصول از پروتئین A اصلاح شده ژنتیکی استفاده می کند که نه تنها خواص میل ترکیبی Ig خود را حفظ می کند، بلکه دامنه اتصال غیر اصلی خود پروتئین طبیعی را نیز حذف می کند تا اتصال غیر اختصاصی را کاهش دهد. رزین آگارز SuRi rProtein A، که ژل آگارز بسیار متقابل به عنوان ماتریکس و پروتئین نوترکیب A مقاوم در برابر قلیایی اصلاح شده به عنوان لیگاند است، پایداری فیزیکوشیمیایی بالایی دارد. آنتی بادی با خلوص بالا را می توان از نمونه های آسیت، سرم و محیط کشت با کروماتوگرافی میل ترکیبی یک مرحله ای با این محصول بدست آورد که استفاده راحت و پرکاربرد است.

اجزاء

مشخصات

حمل و نقل و ذخیره سازی

محصولات با بسته یخ ارسال می شوند.   می توان آن را به طور پایدار در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد ذخیره کرد به مدت 5 سال

دستورالعمل ها

1. آماده سازی بافر

توصیه می شود موارد زیر انجام شود بافرها قبل از استفاده با یک غشای فیلتر 0.22 میکرومتر یا 0.45 میکرومتر فیلتر شوند. بافر تعادل / اتصال / شستشو: 0.15 مولار NaCl، 20 میلی‌مولار Na2 HPO4، pH 7.0

بافر شستشو: 0.1 مولار گلیسین، pH 3.0

بافر خنثی کننده: 1 MTris-HCl، pH 8.5

2. آماده سازی نمونه

اطمینان حاصل کنید که را نمونه راه حل دارد را مناسب یونی قدرت و pH قبل از در حال بارگذاری را ستون، یا توسط رقیق کردن نمونه سرم، آسیت یا محلول کشت سلولی با بافر اتصال/شستشو یا دیالیز نمونه با بافر اتصال/شستشو.

3. بسته بندی ستون

سوری rProtein را بارگیری کنید الف رزین آگارز در یک ستون کروماتوگرافی مناسب، مراقبت از ایجاد حباب.

4. تصفیه نمونه

1) تعادل: ستون کروماتوگرافی است متعادل با الف الزام آور بافر از 5 بارها را ستون حجم، بنابراین که بسته بندی در همان سیستم بافر است پروتئین هدف است و نقش محافظت از پروتئین را ایفا می کند.

2) نمونه بارگذاری: این نمونه بود بارگیری شده است به را متعادل r پروتئین الف آگارز رزین به اطمینان حاصل شود پر تماس بگیرید بین پروتئین هدف و رزین، بهبود را بهبود می بخشد نرخ پروتئین مورد نظر، و جمع آوری پساب به مورد آزمایش قرار گیرد.

3) شستن: شستن با 10-15 برابر ستون حجم از شستشو بافر، حذف کنید را ناخالصی پروتئین مگر اینکه به طور خاص جذب شده، محلول شستشو را جمع آوری کنید.

4) شستشو: شستشو با 5-10 بار ستون حجم از شستشو بافر، جمع آوری کنید شوینده، که است، را هدف پروتئین جزء

5) تمیز کردن CIP و حفظ: به طور کلی استفاده کنید 0.1-0.5 م NaOH بیشتر از 3CV و را تماس بگیرید زمان است 15 دقیقه سپس با محلول متعادل کننده 5CV شستشو دهید تا خنثی شود. بالاخره هست متعادل با 20% اتانول از 5 برابر ستون حجم، و سپس ذخیره شده است  در 20%  اتانول  از را  همان  حجم  در  4 درجه سانتی گراد  به  جلوگیری کند  را  بسته بندی  از  بودن آلوده به باکتری

5. تشخیص SDS-PAGE

این نمونه ها به دست آمده است در را تصفیه فرآیند (از جمله اصلی نمونه ها، پساب اجزاء، شستشو و اجزای شستشو و غیره) توسط SDS-PAGE برای تعیین اثر تصفیه شناسایی شدند.

یادداشت ها

1. محصول را در یخچال قرار ندهید.
2. rProteinAAgarose Resin باید چندین بار قبل از استفاده کاملاً معکوس شود تا رزین آگارز به طور یکنواخت مخلوط شود.
3. در تمام عملیات، نمونه باید در دمای 4 درجه سانتیگراد یا روی یخ کار شود.
4. برای ایمنی و سلامتی خود، لطفاً از کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف برای کار استفاده کنید.
5. فقط برای استفاده تحقیقاتی

جدول پیوست 1 : خلاصه قابلیت صحافی oF پروتئین A و G به Ig در متفاوت است گونه ها

سوری rProtein یک آگارز رزین