فیبرونکتین (FN) یک گلیکوپروتئین خارج سلولی است که به شکل محلول در مایعات بدن یا به شکل نامحلول در ماتریکس خارج سلولی وجود دارد. به عنوان یکی از مولکول های اصلی چسبندگی سلولی، FN نقش کلیدی در بسیاری از فرآیندهای فیزیولوژیکی مهم مانند جنین زایی، بهبود زخم، هموستاز و ترومبوز دارد. تغییرات در بیان، تخریب و ترکیب فیبرونکتین ارتباط نزدیکی با تعداد زیادی از رخدادهای پاتولوژیک از جمله سرطان و فیبروز دارد.

کاربردهای فیبرونکتین (FN):

1) به عنوان ماتریکس کشت سلولی؛ عملکرد آن ترویج رشد سلولی، افزایش میزان چسبندگی سلولی، افزایش سطح متابولیسم سلولی، کوتاه کردن زمان رشد سلولی است. افزایش سرعت همجوشی سلولی در فناوری هیبریدوم و غیره

2) تشخیص و درمان بیماری؛ عملکرد آن ترمیم و التیام زخم، تشخیص و درمان سرطان، درمان سیستم عروقی و بیماری های قلبی عروقی و عروقی مغز و غیره است.

این محصول یک فیبرونکتین انسانی نوترکیب مشتق شده از سلول های آندوسپرم برنج است که به شکل مونومر وجود دارد و می تواند به عنوان ماتریکس کشت سلولی برای جایگزینی ماتریژل، کلاژن دم موش، فیبرونکتین مشتق از خون و غیره برای افزایش میزان چسبندگی سلولی، افزایش سطح متابولیسم سلولی و کوتاه کردن چرخه رشد سلولی استفاده شود. همچنین می‌توان آن را مستقیماً به محیط کشت اضافه کرد تا میزان سرم مصرفی را جایگزین یا کاهش دهد، به چسبندگی سلولی، مهاجرت، رشد متحرک و حفظ وضعیت سلولی کمک کند.

این محصول یک پودر خشک شده منجمد است که از درجه کشت سلولی است و دارای ویژگی های تفاوت های کوچک دسته به دسته و بدون خطر احتمالی عفونت ویروسی است.

محصول خواص

حمل و نقل و ذخیره سازی

این محصول باید در دمای -25 تا 15 درجه سانتیگراد نگهداری شود 3 سال

بازسازی

فیبرونکتین نوترکیب انسانی (rFN) را در 1×PBS حل کنید تا محلول ذخیره سازی با غلظت 1 میلی گرم بر میلی لیتر تهیه شود. برای جلوگیری از انجماد و ذوب مکرر در دمای 20- درجه سانتیگراد در مقادیر مقرون به صرفه مطابق با دوزهای یکبار مصرف نگهداری شود. برای 3-6 ماه موثر است.

دستورالعمل استفاده

1. آزمایش پوشش (در نظر گرفتن صفحه 6 چاهی به عنوان مثال، برای سایر صفحات کشت، لطفاً به جدول 1 مراجعه کنید)

1.1 مقدار مناسبی از فیبرونکتین انسانی نوترکیب (rFN) را خارج کرده و آن را با غلظت محلول کاری با 1×PBS استریل، pH 7.2 تا 7.4 رقیق کنید و محدوده مرجع غلظت نهایی 50 تا 100 میکروگرم بر میلی لیتر است. پس از مخلوط کردن، آن را به صفحه 6 چاهی 800 میکرولیتر در چاه اضافه کنید تا مطمئن شوید که محلول کار کف صفحه 6 چاهی را کاملاً می پوشاند.

1.2 صفحه 6 چاهی را با محلول کار rFN در دمای 4 ℃ در طول شب یا 37 ℃ برای پوشش به مدت 1 ساعت قرار دهید.

1.3 محلول کار را در صفحه 6 چاهی جمع آوری کرده و در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید. می توان از آن برای پوشش دهی بطری ها/صفحات کشت دیگر در عرض یک هفته استفاده کرد.

1.4 صفحه 6 چاهی پوشیده شده با rFN را خارج کنید، محیط کشت سلولی معمولی را اضافه کنید و مستقیماً سلول ها را تلقیح کنید. rFN باعث افزایش چسبندگی و رشد سلولی می شود.

1.5 اگر صفحه 6 چاهی روکش شده در حال حاضر استفاده نمی شود، در ظرف در بسته در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید. استفاده از آن در عرض یک هفته توصیه می شود.

جدول 1. مقادیر افزودنی rFN توصیه شده برای بطری ها/صفحه های کشت مختلف

در آزمایش پوشش/آبکاری، مقدار محلول کاری فیبرونکتین انسانی نوترکیب (rFN) اضافه شده باید مطابق با اندازه ظرف/بطری کشت تنظیم شود، همانطور که در جدول 1 در زیر نشان داده شده است.

2. آزمایش کشت سلولی

در طی کشت سلولی، افزودن rFN به طور مستقیم به محیط کشت سلولی می‌تواند باعث افزایش چسبندگی، مهاجرت و حفظ وضعیت سلولی شود. محدوده مرجع غلظت نهایی 5 تا 50 میکروگرم در میلی لیتر است.

یادداشت ها

1. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است.

2. لطفا با کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف کار کنید،برای امنیت شما