Hieff Trans™ معرف ترانسفکشن لیپوزومی سوالات متداول

(1) س: آیا هنگام تهیه کمپلکس معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک سرم وجود دارد؟

پاسخ: وجود سرم بر تشکیل لیپوزوم ها تأثیر می گذارد. هنگام تهیه کمپلکس های معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک، استفاده از محیط بدون سرم (معمولاً محیط MEM) توصیه می شود.

(2) س: آیا می توان معرف ترانسفکشن را منجمد کرد؟

پاسخ: خیر. این معرف باید در دمای 2-8 ℃ نگهداری شود و باید مراقب بود که از باز کردن مکرر درپوش برای مدت طولانی جلوگیری شود، زیرا باز کردن طولانی مدت درپوش باعث اکسیداسیون لیپوزوم می شود و راندمان ترانسفکشن را تحت تأثیر قرار می دهد.

(3) س: هنگام استفاده از معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزوم Hieff Trans™ باید به چه نکاتی توجه کنم؟

A: 1) در طول عملیات ترانسفکشن، بهتر است که تلاقی سلول به 80٪ - 95٪ برسد و چگالی آبکاری خاص با توجه به وضعیت سلول ها تعیین شود.

2) استفاده از DNA با خلوص بالا به دستیابی به راندمان انتقال بالاتر کمک می کند.

3) هنگام تهیه کمپلکس های ترانسفکشن، DNA و معرف های ترانسفکشن باید با محیط بدون سرم رقیق شوند.

4) در طول ترانسفکشن نمی توان آنتی بیوتیک ها را به محیط اضافه کرد.

5) غلظت DNA و مقدار معرف لیپوزوم کاتیونی باید برای اولین استفاده بهینه شود تا حداکثر راندمان انتقال حاصل شود. نسبت DNA به معرف ترانسفکشن است به طور کلی توصیه می شود 1:2-1:3 باشد.

(4) س: آیا پس از ترانسفکشن باید خاتمه داده شود؟

ج: نیازی نیست. کمپلکس های لیپوزوم به مدت 6 ساعت پایدار هستند. اگر محیط سلولی قبل از ترانسفکشن تغییر نکند، برای اطمینان از مواد مغذی مورد نیاز برای رشد طبیعی سلول، لازم است پس از 4 تا 6 ساعت به محیط جدید تغییر دهید. اما اگر محیط قبل از ترانسفکشن تعویض شده باشد، پس از ترانسفکشن لیپوزوم نیازی به تعویض محیط نیست.

(5) س: اگر بخواهم کارایی ترانسفکشن را بهبود ببخشم باید به چه چیزی توجه کنم؟

الف: الف: تراکم سلول ها در زمان ترانسفکشن 90 تا 95 درصد است.

ب: در طول ترانسفکشن، از محیط بدون سرم MEM برای رقت های نوکلئیک اسید و لیپوزوم استفاده کنید.

c: محیط را می توان 4-6 ساعت پس از ترانسفکشن تغییر داد.

(6) س: آیا می توان انتقال مشترک DNA و siRNA را انجام داد؟ تاثیرش چطوره؟

ج: ترانسفکشن همزمان انجام می شود، اما توصیه می شود ترانسفکشن جداگانه انجام شود و ترانسفکشن DNA باید 6 ساعت پس از siRNA انجام شود. اگر با هم عمل شود، بازده انتقال siRNA بدتر خواهد بود.

(7) س: آیا می توان از معرف ترانسفکشن برای ترانسفکشن بسته بندی لنتی ویروسی استفاده کرد؟

پاسخ: بسته بندی لنتی ویروسی امکان پذیر است، اما کارایی بسته بندی لنتی ویروسی لزوماً به بازده ترانسفکشن مربوط نیست، بلکه به انتخاب پلاسمیدهای بسته بندی و نسبت بین پلاسمیدها نیز مربوط می شود.

(8) س: آیا می توان از معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزوم Hieff Trans™ برای ترانسفکشن سلول های سوسپانسیون استفاده کرد؟

پاسخ: معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزوم Hieff Trans™ را می توان برای ترانسفکشن سلولی سوسپانسیون استفاده کرد، برای جزئیات به پروتکل مراجعه کنید. علاوه بر این، ما همچنین یک معرف ترانسفکشن به طور خاص برای سلول‌های سوسپانسیون (Cat No. 40805، معرف ترانسفکشن اسید نوکلئیک لیپوزوم برای سلول‌های سوسپانسیون) راه‌اندازی کرده‌ایم.

[1] Liu R، Yang J، Yao J، Zhao Z، He W، Su N، Zhang Z، Zhang C، Zhang Z، Cai H، Zhu L، Zhao Y، Quan S، Chen X، Yang Y. کنترل اپتوژنتیکی عملکرد RNA و متابولیسم با استفاده از پروتئین های مهندسی شده با قابلیت تعویض نور RNA. Nat Biotechnol. 3 ژانویه 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Epub جلوتر از چاپ. PMID: 34980910. (IF: 54.908)

[2] Zhou J، Chen P، Wang H، Liu H، Li Y، Zhang Y، Wu Y، Paek C، Sun Z، Lei J، Yin L. گونه‌های Cas12a طراحی شده‌اند تا از طریق تشخیص دقیق PAM، اثر خارج از هدف در سطح ژنوم پایین‌تر داشته باشند. Mol Ther. 2022 ژانویه 5؛ 30 (1): 244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 2021 Oct 20. PMID: 34687846; PMCID: PMC8753454. (IF: 11.454)

[3] چن اس، کائو ایکس، ژانگ جی، وو دبلیو، ژانگ بی، ژائو اف.circVAMP3 جداسازی فاز CAPRIN1 را تحریک می‌کند و با سرکوب ترجمه c-Myc، کارسینوم سلول‌های کبدی را مهار می‌کند. Adv Sci (Weinh). 2022 Mar;9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 Jan 24. PMID: 35072355; PMCID: PMC8922094. (IF: 16.808)

[4] Zhang Y، Yu X، Sun R، Min J، Tang X، Lin Z، Xie S، Li X، Lu S، Tian Z، Gu C، Teng L، Yang Y. فاکتور پیرایش آرژنین/سرین غنی از 8 از طریق اتصال جایگزین CACYBP و ارتباطات مبتنی بر اگزوزوم، بدخیمی و ضایعات استخوانی را ترویج می‌کند. Clin Transl Med. 2022 فوریه؛ 12 (2): e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF: 11.492)

[5] Tang X، Deng Z، Ding P، Qiang W، Lu Y، Gao S، Hu Y، Yang Y، Du J، Gu C. یک پروتئین جدید کدگذاری شده توسط circHNRNPU با تنظیم ریزمحیط مغز استخوان و پیرایش جایگزین، پیشرفت میلوم متعدد را ترویج می‌کند. J Exp Clin Cancer Res. 8 مارس 2022؛ 41 (1): 85. doi: 10.1186/s13046-022-02276-7. PMID: 35260179. (IF: 11.161)

[6] Hua Z، Wei R، Guo M، Lin Z، Yu X، Li X، Gu C، Yang Y. YTHDF2 تکثیر سلول های میلوم متعدد را از طریق محور STAT5A/MAP2K2/p-ERK ترویج می کند. انکوژن. 2022 مارس؛ 41 (10): 1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 24 ژانویه. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y، Lu Q، Li W، Zhang D، Zhang F، Zou Q، Chen L، Tong Y، Liu M، Wang S، Li W، Ren X، Xu P، Yang Z، Dong S، Zhang B، Huang Y، Li D، Wang H، Yu W. فعال شدن مجدد سرکوبگر تومور در سرطان پستان با تعویض شبکه تقویت کننده Nami. Nucleic Acids Res. 7 سپتامبر 2021؛ 49 (15): 8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF: 16.9)

[8] Dai L، Dai Y، Han J، Huang Y، Wang L، Huang J، Zhou Z. بینش ساختاری در مورد استخدام پیچیده BRCA1-BARD1 برای کروماتین آسیب دیده. سلول مول. 2021 ژوئیه 1؛ 81 (13): 2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 2021 7 ژوئن. PMID: 34102105. (IF: 17.97)

[9] Zhang K، Wang A، Zhong K، Qi S، Wei C، Shu X، Tu WY، Xu W، Xia C، Xiao Y، Chen A، Bai L، Zhang J، Luo B، Wang W، Shen C. محور UBQLN2-HSP70 ترکیبات پلی-Gly-Ala را کاهش می دهد. نورون. 2021 ژوئن 16; 109 (12): 1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 2021 14 مه. PMID: 33991504. (IF: 17.17)

[10] Liang Y، Lu Q، Li W، Zhang D، Zhang F، Zou Q، Chen L، Tong Y، Liu M، Wang S، Li W، Ren X، Xu P، Yang Z، Dong S، Zhang B، Huang Y، Li D، Wang H، Yu W. فعال شدن مجدد سرکوبگر تومور در سرطان پستان با تعویض شبکه تقویت کننده Nami. Nucleic Acids Res. 7 سپتامبر 2021؛ 49 (15): 8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF: 16.9)

[11] Li T، Chen X، Qian Y، Shao J، Li X، Liu S، Zhu L، Zhao Y، Ye H، Yang Y. یک دستگاه اپتوژنتیکی مبتنی بر BRET مصنوعی برای بیان ژن ضربانی که هموستاز گلوکز را در موش‌ها قادر می‌سازد. Nat Commun. 2021 ژانویه 27; 12 (1): 615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786; PMCID: PMC7840992. (IF: 14.92)

[12] Pan Y، He X، Li C، Li Y، Li W، Zhang H، Wang Y، Zhou G، Yang J، Li J، Qu J، Wang H، Gao Z، Shen Y، Li T، Hu H، Ma H. فعالیت عصبی از محور CRTC1/CREB برای هدایت اتوفاژی وابسته به رونویسی برای حفظ LD استفاده می کند. Cell Rep. 2021 ژوئیه 20; 36 (3): 109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF: 9.42)

[13] Liu H، Xing R، Ou Z، Zhao J، Hong G، Zhao TJ، Han Y، Chen Y. گیرنده جفت شده با پروتئین GPR17 با افزایش تولید ROS با واسطه 1 کمپلکس سرکوب کننده پلی کامب، رشد گلیوما را مهار می کند. سلول مرگ دیس. 2021 ژوئن 12; 12 (6): 610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF: 8.463)

[14] فن Y، وانگ جی، جین دبلیو، سان ای، زو ای، وانگ ای، لیانگ ایکس، سو دی.CircNR3C2 اثر سرکوب کننده تومور با واسطه HRD1 را از طریق اسفنج miR-513a-3p در سرطان پستان سه گانه منفی ترویج می کند. مول سرطان. 2021 فوریه 2; 20 (1): 25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981; PMCID: PMC7851937. (IF: 27.403)

[15] Gu C، Wang Y، Zhang L، Qiao L، Sun S، Shao M، Tang X، Ding P، Tang C، Cao Y، Zhou Y، Guo M، Wei R، Li N، Xiao Y، Duan J، Yang Y. AHSA1 یک هدف درمانی امیدوارکننده برای تکثیر سلولی در سلول‌های سلولی در میهی‌بیتوروتات است. J Exp Clin Cancer Res. 6 ژانویه 2022؛ 41 (1): 11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674; PMCID: PMC8734095. (IF: 11.161)

[16] Luo Q، Wu X، Zhao P، Nan Y، Chang W، Zhu X، Su D، Liu Z. OTUD1 آپوپتوز مستقل از کاسپاز و وابسته به کاسپاز را با ترویج انتقال هسته ای AIF و تخریب MCL1 فعال می کند. Adv Sci (Weinh). 2021 فوریه 8; 8 (8): 2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171; PMCID: PMC8061361. (IF: 15.84)

[17] Luo Q، Wu X، Nan Y، Chang W، Zhao P، Zhang Y، Su D، Liu Z. TRIM32/USP11 ثبات ARID1A و وضعیت انکوژنیک/سرکوب کننده تومور کارسینوم سلول سنگفرشی را متعادل می کند. Cell Rep. 7; 30 ژانویه 2020 (1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF: 9.42)

[18] Sun X، Peng X، Cao Y، Zhou Y، Sun Y. ADNP تمایز عصبی را با تعدیل سیگنال‌دهی Wnt/β-catenin ترویج می‌کند. Nat Commun. 2020 ژوئن 12; 11 (1): 2984. doi: 10.1038/s41467-020-16799-0. PMID: 32533114; PMCID: PMC7293280. (IF: 14.911)

[19] Yang X، Wang H، Xie E، Tang B، Mu Q، Song Z، Chen J، Wang F، Min J. سیم‌کشی مجدد ERBB3 و سیگنالینگ ERK باعث مقاومت در برابر مهار FGFR1 در سرطان دستگاه گوارش می‌شود که دارای جهش ERBB3-E928G است. سلول پروتئین. دسامبر 2020؛ 11 (12): 915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529; PMCID: PMC7719122. (IF: 14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al. نانوماشین راهپیمای DNA نامحدود با آنزیم دوگانه برای تصویربرداری درون سلولی از microRNA با بیان کم. Nano Res. 12، 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (IF: 8.21)

[21] Zhang X، Qi Z، Yin H، Yang G. تعامل بین p53 و سیگنالینگ Ras مقاومت سیس پلاتین را از طریق تنظیم آپوپتوز و اتوفاژی با واسطه HDAC4- و HIF-1α کنترل می کند. ترانوستیک ها 2019 ژانویه 30; 9 (4): 1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF: 8.12)

[22] Zou Y، Wang A، Shi M، Chen X، Liu R، Li T، Zhang C، Zhang Z، Zhu L، Ju Z، Loscalzo J، Yang Y، Zhao Y. تجزیه و تحلیل مناظر ردوکس و پویایی در سلول‌های زنده و in vivo با استفاده از حسگرهای فلورسنت کدگذاری شده ژنتیکی. پروتوک Nat. 2018 Oct;13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175; PMCID: PMC6714056. (IF: 13.49)

[23] Zhang K، Zhao X، Chen X، Wei Y، Du W، Wang Y، Liu L، Zhao W، Han Z، Kong D، Zhao Q، Guo Z، Han Z، Liu N، Ma F، Li Z. بهبود اثرات درمانی اگزوزوم های مشتق شده از سلول های بنیادی مزانشیمی با ژل هندی قابل تزریق. رابط های ACS Appl Mater. 2018 سپتامبر 12؛ 10 (36): 30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 2018 29 اوت. PMID: 30118197. (IF: 8.09)

[24] Hao H، Hu S، Chen H، Bu D، Zhu L، Xu C، Chu F، Huo X، Tang Y، Sun X، Ding BS، Liu DP، Hu S، Wang M. از دست دادن CXCR7 اندوتلیال باعث اختلال در هموستاز عروقی و بازسازی قلبی پس از انفارکتوس قلبی عروقی می شود. گردش. 2017 مارس 28; 135 (13): 1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2017 2 فوریه. PMID: 28154007. (IF: 18.881)