(1) س: تفاوت بین انتقال DNA و انتقال siRNA چیست؟

پاسخ: 1. از آنجایی که تنها 20 جفت باز وجود دارد، siRNA بسیار کوچکتر از DNA با هزاران یا حتی بیش از 10000 جفت باز است.

2. معرف های ترانسفکشن و روش های مورد استفاده برای ترانسفکشن DNA برای ترانسفکشن siRNA مناسب نیستند.

3. ترانسفکشن siRNA دارای الزامات سختگیرانه تری در مورد سمیت سلولی معرفهای ترانسفکشن نسبت به ترانسفکشن DNA است.

(2) س: آیا معرف ترانسفکشن پس از ترانسفکشن نیاز به تغییر دارد؟

پاسخ: برای تغییر متوسط، دو وضعیت قابل تشخیص است:

1. اگر هیچ تغییری در محیط قبل از ترانسفکشن وجود نداشته باشد، محیط باید حدود 6 ساعت پس از ترانسفکشن تعویض شود تا از مواد مغذی مورد نیاز برای رشد سلول اطمینان حاصل شود.

2. اگر قبل از ترانسفکشن تغییری ایجاد شود، وقتی محیط دارای کمبود مواد مغذی است، محیط را می توان طبق معمول تغییر داد.

(3) س: کارایی معرف ترانسفکشن PEI برای انتقال siRNA و پلاسمید چیست؟

پاسخ: این معرف ترانسفکشن PEI به طور ویژه برای siRNA ساخته شده است و ترانسفکشن پلاسمید توصیه نمی شود.

(4) س: آیا می توان معرف ترانسفکشن را منجمد کرد؟

پاسخ: منجمد نکنید، زیرا معرف ترانسفکشن یک معرف ترانسفکشن کاتیونی PEI است. انجماد در دمای پایین باعث از بین رفتن فعالیت معرف ترانسفکشن PEI می شود. بنابراین، بهتر است آن را در دمای 4 درجه نگهداری کنید تا بهترین راندمان ترانسفکشن حفظ شود.

(5) س: چگونه می توان کارایی انتقال را بهبود بخشید؟

الف: الف: تراکم سلول ها در زمان ترانسفکشن 30%-50%.

b: محیط عاری از سرم Opti-MEM باید برای رقت کردن siRNA و لیپوزوم در طول ترانسفکشن استفاده شود.

c: محیط را می توان 4-6 ساعت پس از ترانسفکشن تغییر داد.

[1] Zhang Y، Hu R، Xi B، Nie D، Xu H، Liu A. مکانیسم‌های آزادسازی لیگاندهای NKG2D مرتبط با پیری و فرار ایمنی ناشی از شیمی‌درمانی در سلول‌های نوروبلاستوما. Front Cell Dev Biol. 2022؛ 10:829404. منتشر شده در 2 مارس 2022. doi:10.3389/fcell.2022.829404(IF:6.684)

[2] Cui B، Wang Y، Jin J، و همکاران. رسوراترول با بیان ضد MMP، از طریق خواص ضد التهابی، آنتی اکسیدانی و ضدآپوپتوتیک، پیری ناشی از UVB را درمان می کند و با افزایش بیان VEGF-B، پیری پوست را درمان می کند. Oxid Med Cell Longev. 2022; 2022: 6037303. منتشر شده در 4 ژانویه 2022. doi:10.1155/2022/6037303(IF:6.543)

[3] Liu Y، Zeng Y، Si HB، Tang L، Xie HQ، Shen B. اگزوزوم های مشتق شده از سلول های بنیادی مشتق شده از ادرار انسان که بیان بیش از حد miR-140-5p را از طریق کاهش VEGFA در مدل موش، کاهش می دهد آرتروز زانو را کاهش می دهد. Am J Sports Med. 2022؛ 50 (4): 1088-1105. doi:10.1177/03635465221073991(IF:6.203)

[4] Zhang ZD، Wen B، Li DJ، و همکاران. فسفوریلاسیون فاسین ترئونین 403 با واسطه AKT سرین/ترئونین کیناز 2 پیشرفت سرطان مری را تنظیم می کند. Int J Biochem Cell Biol. 2022؛ 145:106188. doi:10.1016/j.biocel.2022.106188(IF:5.085)

[5] Tan S، Zhou Y، Zhao H، و همکاران. تجزیه و تحلیل جامع رونوشت هیپوتالاموس ژن های مرتبط با اختلالات رشد جنسی در خوک ها را نشان می دهد. J Steroid Biochem Mol Biol. 2021؛ 210:105875. doi:10.1016/j.jsbmb.2021.105875(IF:4.294)

[6] Niu M, Yi M, Dong B, Luo S, Wu K. دگرگونی محور STAT1-CCL5 یک نشانگر زیستی سرطان روده بزرگ است و تکثیر سلول های سرطانی کولون را ترویج می کند. Ann Transl Med. 2020؛ 8 (15): 951. doi:10.21037/atm-20-4428(IF:3.297)