D-Luciferin یک سوبسترای رایج برای آنزیم لوسیفراز لوسیفراز است و معمولاً در سراسر بیوتکنولوژی، به ویژه در تصویربرداری in vivo in vivo استفاده می شود. مکانیسم اثر این است که لوسیفرین (سوبسترا) می تواند در حضور ATP و لوسیفراز برای انتشار نور اکسید شود. هنگامی که لوسیفرین بیش از حد وجود دارد، تعداد کوانتای نور تولید شده با غلظت لوسیفراز همبستگی مثبت دارد (شکل زیر را ببینید). پس از ترانسفکشن سلول‌ها با پلاسمید حامل ژن کدکننده لوسیفراز (Luc) و معرفی آن به حیوانات تحقیقاتی مانند موش و موش، لوسیفرین به سلول‌ها تزریق می‌شود و تغییرات شدت نور توسط BLI تشخیص داده می‌شود که امکان نظارت در زمان واقعی وضعیت پیشرفت بیماری یا نمونه‌ای از اثربخشی دارو را فراهم می‌کند. اثر ATP بر روی این سیستم واکنش همچنین می تواند برای نشان دادن انرژی یا علائم حیاتی بر اساس تغییرات در شدت بیولومینسانس مورد استفاده قرار گیرد.

D-Luciferin همچنین معمولاً در مطالعات آزمایشگاهی از جمله تجزیه و تحلیل سطح لوسیفراز و ATP، تجزیه و تحلیل ژن گزارشگر، توالی یابی با توان بالا و سنجش های مختلف آلودگی استفاده می شود. در حال حاضر سه نوع محصول در بازار وجود دارد، D-Luciferin (اسید آزاد)، D-Luciferin نمک سدیم و D-Luciferin نمک پتاسیم. تفاوت اصلی بین این سه محصول در ویژگی های حلالیت آنها است. D-Luciferin (اسید آزاد) در آب و در سیستم های بافر ضعیف است، مگر اینکه در بازهای ضعیف مانند محلول های NaOH و KOH محلول باشد. D-Luciferin به شکل نمک های سدیم و پتاسیم بسیار آسان و سریع در آب یا بافر حل می شود، استفاده از آن آسان است و حلال ها غیر سمی هستند و آن را به ویژه برای آزمایش های in vivo مناسب می کند. هنگامی که به صورت مایع فرموله می شوند، برای اکثر کاربردها تفاوت قابل توجهی بین این سه محصول وجود ندارد.

ویژگی ها

• بدون تشعشع، تقریباً برای موجودات زنده بی ضرر است.
• بیولومینسانس، بدون منبع نور تحریکی.
• آنقدر حساس است که می توانید آن را در چند صد سلول تشخیص دهید.
• نفوذ خوب، عمق بافت 3-4 سانتی متر هنوز قابل تشخیص است.
• نسبت سیگنال به نویز بالا، سیگنال فلورسانس قوی و ضد تداخل خوب.

برنامه های کاربردی

• در آزمایش تومورزایی در موش‌های برهنه، رشد تومور بدون تهاجم در زمان واقعی، بدون اندازه‌گیری حذف تومور مشاهده شد.
• برای آزمایش اثر تجویز بر رشد یا متاستاز تومور، بستر فلورسین را می توان به طور کامل در عرض 3 ساعت بدون تداخل در آزمایش دارو حذف کرد.
• محلی سازی و توزیع سلول های خارجی در حیوانات تشخیص داده شد.
• ژن هدف یا پروموتر ژن هدف به ژن لوسیفراز ادغام می شود تا تغییرات بیان ژن را در طول درمان دارویی یا پیشرفت بیماری تشخیص دهد.
• نظارت بر پیوند، بقا و تکثیر سلول های بنیادی؛ ردیابی توزیع و مهاجرت سلول های بنیادی در داخل بدن.

مشخصات

اجزاء

حمل و نقل و ذخیره سازی

حمل و نقل در بسته های یخ؛ در دمای 20- درجه سانتیگراد خشک و دور از نور نگهداری شود. معتبر برای 1 سال

ارقام

اسناد:

برگه اطلاعات ایمنی

دفترچه راهنما

استنادها و مراجع:

[1] جی سی، ژائو ام، وانگ سی، و همکاران. نانوذرات تانتالیوم زیست سازگار به عنوان حساس‌کننده‌های پرتوی برای افزایش اثربخشی درمان در تومور اولیه و غدد لنفاوی متاستاتیک نگهبان [منتشر شده آنلاین قبل از چاپ، 6 ژوئن 2022]. نانو ACS. 2022;10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z، Tian W، Ye Y، و همکاران. Hsp90 باعث فروپتوز گلیوما وابسته به Acsl4 از طریق فسفریله کردن Ser637 در Drp1 می شود. سلول مرگ دیس. 2022؛ 13 (6): 548. منتشر شده در 13 ژوئن 2022. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Zhang L، Sun Y، Zhang XX، و همکاران. مقایسه سلول های بنیادی مزانشیمی +/- CD146 در بهبود نارسایی زودرس تخمدان. سلول های بنیادی Res Ther. 2022؛ 13 (1): 267. منتشر شده در 21 ژوئن 2022. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ، He W، Wang XB، و همکاران. هایپرمتیلاسیون فاکتور 5 شبه کروپل با حفظ DNMT1 در پیشرفت کارسینوم سلول کلیوی سلول شفاف نقش دارد.سلول مرگ دیس. 2017؛ 8 (7): e2952. منتشر شده در 27 ژوئیه 2017. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P، Wu L، Cao M، و همکاران. شناسایی اجزای پیچیده MBW دخیل در بیوسنتز فلاونوئیدها در توت فرنگی جنگلی. علوم گیاهی جلویی 2021؛ 12:774943. منتشر شده در 8 نوامبر 2021. doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] بای اس، تائو آر، یین ال، و همکاران. دو پروتئین B-box، PpBBX18 و PpBBX21، بیوسنتز آنتوسیانین را از طریق ارتباط رقابتی با Pyrus pyrifolia ELONGATED HYPOCOTYL 5 در پوست میوه گلابی به طور متضاد تنظیم می کنند. Plant J. 2019; 100 (6): 1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX، Wu TT، Ding CH، Zhou PC، Chen ZZ، Gou JY. SAHH و SAMS یک کمپلکس دهنده متیل با CCoAOMT7 برای متیلاسیون ترکیبات فنلی تشکیل می دهند. Biochem Biophys Res Commun. 2019؛ 520 (1): 122-127. doi:10.1016/j.bbrc.2019.09.101(IF:2.705)