---Élimination des interférences bactériennes de fond et de la contamination par la RNase
dans la détection des agents pathogènes en un seul coup !
L'inhibiteur de la RNase (ARNase, en abrégé RNasin) est capable de se lier spécifiquement à la RNase par des interactions non covalentes pour former un complexe, inactivant ainsi la RNase et préservant l'intégrité de l'ARN. Il est largement utilisé dans les méthodes de détection des agents pathogènes telles que la RT-qPCR, la mNGS et la tNGS. Lors de la détection des agents pathogènes, il est essentiel de contrôler strictement la contamination bactérienne de fond des enzymes moléculaires ; si les enzymes moléculaires sont perturbées par des bactéries de fond, elles peuvent éclipser les acides nucléiques cibles en faible abondance ou être détectées avec eux, affectant ainsi l'interprétation des résultats.
Inhibiteur de RNase à très faible résidu Yeasen
L'inhibiteur de RNase murine Yeasen UCF.ME® (réf. 14672ES/14673ES/14674ES) est un inhibiteur de RNase recombinant dérivé de la souris exprimé et purifié sous une forme soluble à partir d'E. coli. Il a la capacité d'inhiber largement divers types de RNases, notamment les RNases A, B et C. Ce produit a été testé par RT-PCR et RT-qPCR et s'est avéré compatible avec les transcriptases inverses conventionnelles et une variété d'ADN polymérases. Par rapport aux inhibiteurs de RNase d'origine humaine, l'inhibiteur de RNase murine Yeasen UCF.ME® ne présente pas les deux résidus de cystéine qui sont très sensibles à l'oxydation dans les protéines humaines, offrant ainsi une activité antioxydante plus élevée. Il est particulièrement adapté aux expériences sensibles aux concentrations élevées de DTT, telles que la qPCR.
De plus, par rapport aux inhibiteurs de RNase conventionnels (Cat#10603ES/10610ES/14671ES), l'inhibiteur de RNase murine Yeasen UCF.ME® présente des niveaux résiduels inférieurs d'ADN génomique de l'hôte, ce qui aide à traiter l'interférence bactérienne de fond dans la détection des agents pathogènes et améliore la précision de la détection.
Caractéristiques du produit
- Résiduel ultra-faible : niveau de résidus d'ADN d'E. coli < 0,1 copie/100 U, adapté aux applications avec des exigences bactériennes de fond plus strictes.
- Activité inhibitrice de l'ARNase à large spectre : capable d'inhiber les ARNases, notamment l'ARNase A, l'ARNase B, l'ARNase C et d'autres.
- Compatible avec une large gamme de conditions de réaction : actif dans des conditions de pH de 5,0 à 9,0 et de températures de 25°C à 60°C, adapté aux transcriptases inverses thermophiles.
- Compatible avec un large éventail d'expériences en aval : aucun impact sur l'activité enzymatique des ARN polymérases SP6, T7 ou T3, des transcriptases inverses AMV, M-MLV et des ADN polymérases Taq.
- Stabilité d'un lot à l'autre : la plate-forme de production d'enzymes moléculaires ultra-propres UCF.ME®, avec un contrôle qualité strict, garantit l'uniformité, la stabilité et l'approvisionnement rapide du produit.
Performances du produit
1) Pas d'exonucléase, d'enzyme d'incision et de RNase résidu
Figure 1. Détection de résidus de nucléase, d'enzyme de coupure et d'ARNase dans l'inhibiteur d'ARNase murin UCF.ME®.
Remarque : N représente le contrôle négatif ; 1, 2, 3 représentent trois séries d’expériences parallèles.
2) Le résidu d'ADN génomique de coli est inférieur à 0,1 copie/100 U, ce qui est nettement inférieur à la version conventionnelle.
En effectuant une détection des résidus d'ADN génomique de l'hôte (E.coli) sur différents lots d'inhibiteur de RNase murine UCF.ME® et en le comparant aux niveaux de résidus de l'hôte des inhibiteurs de RNase murine conventionnels, les résultats montrent que le résidu d'ADN génomique de l'hôte de l'inhibiteur de RNase murine UCF.ME® est inférieur à 0,1 copie/100 U, significativement inférieur à celui de la version conventionnelle.
Figure 2 : Comparaison des résultats de détection des résidus génomiques d’E. coli entre l’UCF.IRM ME® et IRM conventionnelle.
3) La capacité inhibitrice de la RNase est nettement supérieure à celle des marques importées.
En utilisant l'ARN total comme modèle, la réaction RT-qPCR a été réalisée à l'aide du kit de sonde Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) (Cat#13650ES) pour vérifier la capacité de digestion de la RNaseA de l'inhibiteur de RNase murine UCF.ME®. Les résultats ont indiqué que l'effet inhibiteur de Yeasen UCF.ME® MRI sur la RNaseA est significativement supérieur à celui de produits concurrents internationaux similaires.
Figure 3 : Validation de la capacité d'inhibition de la RNase de l'IRM UCF.ME®
Remarque : IRM Yeasen UCF : IRM UCF.ME® 8 U + 80 ng RNaseA ; IRM Yeasen : IRM 8 U + 80 ng RNaseA ; Concurrent N* : 8 U d'un produit concurrent similaire + 80 ng RNaseA ; Contrôle : pas d'IRM ni de RNaseA.
Recommandation de produit
| Taper | Nom | Chat |
| Série d'enzymes PCR ultra-propres à très faible résidu hôte | ADN polymérase Taq sensible au démarrage à chaud Hieff UCF.ME® (5 U/μL) | 14314ES |
| Transcriptase inverse Hifair UCF.ME® V (200 U/μL) | 14608ES | |
| UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), thermolabile, 1 U/μL | 14466ES | |
| Inhibiteur de RNase murine UCF.ME® (40 U/µL) | 14672ES | |
| Série monoenzyme PCR haute performance | ADN polymérase Hieff UNICON® Hotstart E-Taq, 5 U/μL | 10726ES |
| Transcriptase inverse Hifair® V (200 U/μL) | 11300ES | |
| Uracile ADN glycosylase (UDG/UNG), thermolabile, 1 U/μL | 10303ES | |
| Inhibiteur de RNase murine (40 U/µL) | 10603ES | |
| Mélange dNTP (25 mM chacun) | 10125ES | |
| Prêt pour Lyo Série monoenzymatique PCR | ADN polymérase Hieff UNICON® HotStart E-Taq, sans glycérol (5U/μL) | 14316ES |
| Transcriptase inverse Hifair® V, sans glycérol (600 U/μL) | 11301ES | |
| Uracile ADN glycosylase (UDG), thermolabile (1 U/μL, sans glycérol) | 10707ES | |
| Inhibiteur de RNase murine (200 U/µL, sans glycérol) | 10703ES |