1. Contexte Introduction
La streptavidine est une protéine de liaison à la biotine dérivée de Streptomyces avidinii. Sa liaison non spécifique est bien inférieure à celle de l'avidine et, par rapport à l'avidine du blanc d'œuf, qui a une charge nette positive à pH neutre et contient environ 7 % de glucides, la streptavidine a des propriétés chimiques plus favorables telles qu'une charge nette presque nulle à pH neutre et aucun glucide. Par conséquent, elle est largement utilisée comme alternative à l'avidine.
2. Caractéristiques du produit
Structure tétramère:La streptavidine existe sous forme d’homotétramère d’une taille de 66 kDa ;
Haute affinité:Chaque molécule de streptavidine peut se lier de manière très spécifique à quatre molécules de biotine, avec une affinité extrêmement forte entre elles ;
Applications variées : La constante de dissociation du complexe streptavidine-biotine est de l'ordre du nanomolaire, une propriété couramment utilisée dans les applications de biologie moléculaire. Dans la plupart des applications, elle peut être utilisée de manière interchangeable avec les protéines d'anticorps.
Extraction de haute qualité:Obtenu par purification à partir de Streptomyces avidinii;
Figure 1. Streptavidine
Produit Application
Application 1 : Résine purifiée avec streptavidine
1) Principe d'applicationBasée sur l'interaction entre la streptavidine et la biotine, la streptavidine est fortement réticulée à 6 % d'agarose et le processus de préparation unique lui confère des propriétés physicochimiques supérieures, lui permettant de résister à des pressions plus élevées. Elle peut purifier la protéine cible à des débits relativement élevés, ce qui la rend plus adaptée à la purification industrielle des protéines à grande échelle.
Figure 2. Principe de purification de la résine streptavidine
2) Yeasen s'engage à vous fournir des produits à haute efficacité pour purifier des protéines plus parfaites pour vous.
Figure 3. Protéine purifiée par résine streptavidine
3) Questions fréquemment posées| Question | Raison possible | Solution recommandée |
| La contre-pression de la colonne est trop élevée | L'emballage est bloqué | Nettoyer la résine. |
| Le tampon de lyse contient de petites particules solides, il est recommandé de filtrer avec une membrane filtrante de 0,22 μm ou 0,45 μm avant le chargement, ou de centrifuger pour éliminer. | ||
| L'échantillon est trop visqueux. | L'échantillon contient une concentration élevée d'acides nucléiques, prolongez le temps de lyse jusqu'à ce que la viscosité soit réduite ou ajoutez de la DNase I (concentration finale de 5 μg/ml), du Mg2+ (concentration finale de 1 mM), incuber sur glace pendant 10 à 15 minutes | |
| Le tampon est trop visqueux | Les réactifs organiques ou les réactifs stabilisateurs de protéines (tels que le glycérol, etc.) peuvent provoquer une augmentation de la contre-pression et réduire le débit de fonctionnement. | |
| Protéine sans but dans le composant d'élution | Un clivage excessif dénature la protéine d'intérêt | Utiliser des conditions de lyse douces. Les conditions expérimentales sont basées sur l'expérience. |
| La protéine cible s'agrège pour produire une précipitation | Ajoutez du DTT à la solution de pré-lyse cellulaire à une concentration finale de 1 à 10 mM. | |
| La protéine cible n'est pas complètement éluée | Le volume d'élution est trop petit | Augmenter le volume d’éluant et diminuer le débit d’élution. |
| Le pH du tampon d'élution change | Utiliser un éluant fraîchement préparé | |
| Le temps d'incubation de l'éluant n'est pas suffisant | Augmenter le temps d’incubation du tampon d’élution avec le gel. |
Application 2 : Groupe fluorescent et conjugué enzymatique marqué à la streptavidine.
Figure 4. Différentes streptavidines conjuguées
1) Streptavidines conjuguées à des enzymes- Streptavidine conjuguée à la peroxydase de raifort (HRP)
Ⅰ.Produit par de la streptavidine de haute pureté et de la peroxydase de raifort grâce à une technique de conjugaison spéciale ;
Ⅱ.Maintient l'activité spécifique élevée de la peroxydase. Applications : Immunohistochimie (IHC), immunocytochimie (ICC), hybridation in situ (ISH), etc.
Concentration recommandée : 0,01-0,1 µg/mL pour WB (méthode de chimioluminescence) ; 1-2 µg/mL pour ELISA, HC/ICC, WB (développement de la couleur du substrat)
- Streptavidine conjuguée à la phosphatase alcaline (AP)
Ⅰ.Convient pour l'analyse en phase solide, les systèmes de coloration des tissus/cellules et les applications de transfert, avec une liaison covalente spécifique ;
Ⅱ.Le conjugué est stable et très actif.
Applications : immunohistochimie (IHC), immunocytochimie (ICC), dosage immuno-enzymatique (ELISPOT), dosage immuno-enzymatique (ELISA), hybridation in situ (ISH) et applications de transfert.
Concentration recommandée : 1-2 µg/mL pour ELISA, IHC/ICC ; 0,1-1 µg/mL pour WB
2) Streptavidines conjuguées à des fluorophores- Fluor® Streptavidine conjuguée à la fluorescéine
Ⅰ.Recommandé pour l’immunofluorescence de routine ;
Ⅱ.Hautement purifié avec de très faibles caractéristiques de liaison non spécifique ;
Ⅲ.Haute affinité pour la biotine ;
Applications : Immunofluorescence (IF), Hybridation in situ (ISH), Cytométrie de flux (Flow Cyt).
Concentration recommandée : 0,5-2 µg/mL (IF)
- Streptavidine conjuguée au colorant DyLight™
Ⅰ.Peut être utilisé pour détecter des seconds anticorps biotinylés et d’autres grosses molécules dans des applications d’immunofluorescence, d’hybridation in situ ou de cytométrie de flux ;
Ⅱ.Hautement purifié avec de très faibles caractéristiques de liaison non spécifique ;
Ⅲ.Affinité extrêmement élevée pour la biotine ;
Ⅳ.Photostabilité élevée, insensible au pH et fluorescence plus brillante ;
Applications : Immunofluorescence (IF), Hybridation in situ (ISH), Cytométrie de flux (Flow Cyt).
Concentration recommandée : 0.5-2 µg/mL (SI)
Informations sur le produit
| Série de produits | Numéro de produit | Nom du produit | Spécification |
| Streptavidine | 35099ES | Streptavidine (poudre) | 100 mg/1 g |
| 35101ES | Streptavidine (5 mg/ml) | 1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1 g | |
| Streptavidines conjuguées à des enzymes | 35105ES | Streptavidine HRP | 100 μL |
| 35106ES | Streptavidine AP | 100 μL | |
| Streptavidine marquée par fluorescence | 35102ES | Streptavidine DyLight 405™ | 100 μL |
| 35103ES | Fluor YSMT Streptavidine conjuguée à 488 | 100 μL | |
| 35104ES | YS FluorMT Streptavidine conjuguée au 647 | 100 μL | |
| 35107ES | YS FluorMT Streptavidine conjuguée à 584 | 100 μL | |
| 35108ES | Streptavidine conjuguée à Cy3 | 1 mg | |
| Série de purification de la streptavidine | 20512ES | Résine d'agarose streptavidine 6FF | 5 mL/5 mL × 5/100 mL |
| 20513ES | Colonne de chromatographie BiotSep Streptavidin 6FF, 1 ML | 1 mL/1 mL × 5 | |
| 20514ES | Colonne de chromatographie BiotSep Streptavidin 6FF, 5 ML | 5 ml/5 ml×5 |