Figure 1. Structure de l'albumine sérique humaine ^[1]

3.Application de Récocombinant Serum UNl'albumine

3.1. L'albumine est un complément de milieu de culture sans sérum

L'albumine est un composant important de nombreux systèmes de culture cellulaire sans sérum, tels que ceux des cellules d'hybridome et des cellules d'ovaire de hamster chinois (CHO).L'albumine peut être incorporée dans des structures cellulaires pour fournir aux cellules des nutriments essentiels et une source de facteurs de croissance, favorisant la survie et la prolifération cellulaires. L'albumine sérique humaine est utilisée comme complément de milieu de culture cellulaire pour maintenir la croissance et la santé des cellules utilisées dans la production d'anticorps monoclonaux, de protéines recombinantes et d'autres produits biologiques. L'albumine peut également rendre l'environnement de culture cellulaire plus stable et plus contrôlable, réduisant ainsi la variabilité d'un lot à l'autre et les risques de contamination associés au sérum d'origine animale.

3.2. Culture de cellules de mammifères

L'albumine se lie à une large gamme de substances bioactives, ce qui en fait une molécule de transport essentielle. L'albumine élimine également les espèces réactives de l'oxygène qui nuisent à la survie cellulaire. Ces propriétés font de l'albumine un excellent choix pour favoriser la croissance cellulaire et maintenir une variété de cellules eucaryotes in vitro. L'albumine humaine recombinante est bien adaptée à une variété de types de cellules souches, primaires et de production, notamment les cellules immunitaires, VERO, les cellules souches mésenchymateuses, HEK293, les cellules diploïdes, CHO et d'autres types de cellules.

3.3. Production et préparation des vaccins

L'HSA est un composant important pour la stabilisation des vaccins, offrant de multiples avantages pour une variété de types de vaccins, y compris les virus vivants atténués, les virus inactivés ou tués, les particules de type viral et les vaccins sous-unitaires. L'une des propriétés notables de l'HSA est sa capacité à recouvrir les surfaces hydrophobes et hydrophiles, empêchant ainsi l'adsorption non spécifique indésirable des vaccins tout au long de leur cycle de vie, de la production à la formulation jusqu'au stockage. Grâce à sa capacité de liaison, capable d'interactions à la fois ioniques et hydrophobes, l'HSA peut protéger les surfaces exposées des vaccins contre l'agrégation et la formation de particules indésirables, qui pourraient autrement compromettre l'efficacité du vaccin.

3.4. Diagnostic in vitro/in vivo des maladies

L'HSA est un biomarqueur pour une variété de maladies, notamment le cancer, la polyarthrite rhumatoïde, l'ischémie, les maladies du foie, l'obésité et le diabète.

3.5 Application de l'albumine sérique humaine à la thérapie par cellules souches

L'albumine est depuis longtemps un composant essentiel des milieux de culture cellulaire. Sa capacité à favoriser la croissance de divers types de cellules est bien documentée, notamment les cellules souches mésenchymateuses (CSM), les cellules souches embryonnaires (CSE), les cellules souches pluripotentes induites (CSPi) et les cellules immunitaires. Dans la culture cellulaire, l'albumine est plus qu'une simple source de nutriments. Elle agit comme un réservoir multifonctionnel, protégeant les métaux essentiels et d'autres entités moléculaires, créant ainsi un environnement optimal pour la croissance et la viabilité continues des cellules.

Outre son application en culture cellulaire, l'albumine peut également être utilisée pour la cryoconservation des cellules souches. La capacité de revêtement de surface de l'albumine garantit la sécurité des cellules pendant le processus de congélation. De plus, la capacité tampon de l'albumine maintient l'équilibre du pH nécessaire à l'intégrité cellulaire, tandis que sa capacité stabilisatrice maintient les cellules en suspension, prolongeant ainsi leur viabilité pendant la cryoconservation.

De plus, l’albumine peut également être utilisée comme vecteur de médicaments pour prolonger le temps de circulation des médicaments dans le corps et améliorer leur efficacité.

4.Mécanisme d'action de l'albumine en milieu de culture

4.1 Acides gras liants

L'albumine est le transporteur de 99 % des acides gras non estérifiés (AG) présents dans le plasma. L'albumine possède 7 sites de liaison aux AG à haute affinité et plus de 20 sites de liaison à faible affinité. Les acides gras tels que l'acide linoléique, l'acide linolénique et l'acide oléique sont insolubles en solution aqueuse et doivent être délivrés aux cellules par des molécules porteuses. L'albumine circulante peut généralement transporter 1 ou 2 acides gras libres. La liaison des acides gras contribue également à stabiliser l'albumine. En tant qu'additif de culture cellulaire, l'activité de l'albumine dépend en partie des acides gras spécifiques qu'elle lie et délivre aux cellules.

4.2 Liaison des ions métalliques

Les ions métalliques sont des composants essentiels pour la culture cellulaire. L'HSA est un transporteur clé pour les ions métalliques clés Cu 2+ et Zn 2+. De plus, les atomes de cuivre peuvent subir des réactions redox monovalentes et catalyser la génération de radicaux libres, rendant le cuivre cytotoxique. In vivo, les ions cuivre extracellulaires se lient à l'albumine, affaiblissant la toxicité potentielle du cuivre. Chaque molécule d'albumine possède un site de liaison au cuivre à haute affinité, et lorsque le cuivre est lié à ce site, il ne participera pas aux réactions redox liées aux radicaux libres. L'albumine peut également se lier à d'autres cations divalents tels que Ca, Mg, Mn, Cd, Co et Ni.

4.3 Propriétés antioxydantes de l'HSA

L'activité antioxydante de l'HSA est principalement attribuée aux propriétés redox de quatre principaux sites de liaison des métaux. Cu libre 2+, Fe Les ions 2+ et d'autres ions métalliques réagissent avec l'oxygène pour générer des ROS , qui peut également interagir avec H2O2 pour produire des radicaux hydroxyles nocifs. D'autre part, la liaison de l'albumine aux ions métalliques limite la capacité de ces ions à participer à la génération de ROS.

Les cultures de cellules eucaryotes à l'échelle industrielle réalisées dans des bioréacteurs contiennent de l'oxygène dissous et des métaux libres tels que le fer, le cuivre, le cobalt et le nickel, qui produisent des ROS qui dégradent les membranes cellulaires. L'ajout de BSA ou de HSA réduit la pression des ROS, ce qui permet d'obtenir des cultures cellulaires saines. D'autre part, la liaison de l'albumine à ces métaux, en particulier le cuivre, le zinc, le vanadium et le sélénium, favorise l'absorption de ces métaux par les cellules, stimule la croissance des cultures et améliore considérablement la production de protéines recombinantes dans les cellules eucaryotes.

4.4 Liaison du pyridoxal

Les acides aminés sont des composants clés des milieux de culture cellulaire. Le pyridoxal et son dérivé, le 5' pyridoxal phosphate (PLP), peuvent réagir de manière non enzymatique avec les acides aminés et former des bases de Schiff. Ces bases de Schiff sont très instables et, au contact d'ions métalliques, elles entraînent une dégradation des acides aminés et une inhibition de la croissance cellulaire. La fraction libre de pyridoxal est séquestrée par liaison à l'albumine, ce qui empêche le pyridoxal de réagir avec les acides aminés in vitro et de les détruire.

4.5 Liaison de la riboflavine

La riboflavine est un autre facteur qui réagit avec les acides aminés libres et les dégrade. En solution aqueuse, la riboflavine peut se lier au tryptophane pour former un complexe. Sous l'effet de la lumière, ce complexe se décompose en produits toxiques. L'albumine peut se lier à la riboflavine et à son phosphate (flavine monophosphate) et les protéger de la dégradation. L'albumine possède un seul site de liaison au tryptophane.

5. Caractéristiques du produit

Yeasen fournit une variété d'albumine sérique recombinante, notamment humaine, de souris, de rat, de singe et d'autres espèces.