डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट (डीएसएस, कोलाइटिस ग्रेड) अल्सरेटिव कोलाइटिस मॉडल की स्थापना

डीएसएस मॉडलिंग का विकास इतिहास

दवा के विकास के लिए प्रभावकारिता का परीक्षण करने के लिए पशु मॉडल की आवश्यकता होती है। 50 से अधिक वर्षों के विकास और अनुकूलन के साथ, विभिन्न पशु मॉडलों में से डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम साल्ट (DSS) अल्सरेटिव कोलाइटिस (UC) मॉडल का व्यापक रूप से सूजन आंत्र रोग (IBD) के एटियलजि और रोगजनन का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है।

चित्र 1. डीएसएस अल्सरेटिव कोलाइटिस मॉडल का विकास

सीयूसी मॉडल की विशेषताएँ द्वारा निर्मित डीएसएस

यूसी के कई तीव्र या दीर्घकालिक लक्षण उत्पन्न हो सकते हैं, जैसे दस्त, बलगम जैसा मल, मल में गुप्त रक्त, बहुत अधिक खूनी मल, वजन घटना, गतिविधि में कमी, और खराब कोट का रंग, विभिन्न डीएसएस खुराक द्वारा।

तालिका 1 डीएसएस कोलाइटिस मॉडल की ऊतकवैज्ञानिक विशेषताएं

डीएसएस कोलाइटिस मॉडल श्रेणी

तीव्र कोलाइटिस मॉडल

क्रोनिक फेज़ कोलाइटिस मॉडल

ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन

बृहदान्त्र हाइपरमिया, शोफ, छोटा होना, भंगुरता, वजन-से-लंबाई अनुपात में वृद्धि

काफी छोटा हुआ बृहदान्त्र

अलग-अलग डिग्री के कोलन अल्सर

म्यूकोसल का मोटा होना, लिम्फैडेनोपैथी

म्यूकोसल एडिमा, गॉब्लेट सेल हानि, क्रिप्ट सूजन और विनाश

गॉब्लेट सेल हानि, क्रिप्ट हानि

म्यूकोसा और सबम्यूकोसा में सूजन कोशिकाओं की घुसपैठ की अलग-अलग डिग्री, उपकला कोशिका क्षति

कुछ पशुओं में एडेनोमेटस पॉलीप्स और ट्यूमर जैसे परिवर्तन

डीएसएस यूसी मॉडल के लाभ

  1. प्रोटोकॉल का क्रियान्वयन आसान है।
  2. डीएसएस यूसी मॉडल उच्च पुनरावृत्ति के साथ मानव यूसी लक्षणों से काफी मिलता जुलता है।
  3. प्रशासित डीएसएस खुराक को नियंत्रित करके विभिन्न विशिष्ट लक्षण प्रेरित किए जा सकते हैं, जो डीएसएस यूसी मॉडल के लिए अद्वितीय था।
  4. डीएसएस यूसी मॉडल को विभिन्न प्रकार के व्यापक रूप से प्रयुक्त मॉडल पशुओं, जैसे कि चूहे, ज़ेब्राफिश, सूअर, फल मक्खियों आदि के साथ तैयार किया जा सकता है।
  5. आईबीडी-प्रेरित कोलाइटिस से संबंधित कैंसर (सीएसी) मॉडल को एज़ोक्सीमेथेन (एओएम) के संयुक्त उपयोग से बनाया जा सकता है।

डीएसएस यूसी मॉडल निर्माण उदाहरण

  1. चूहों नमूना（विवरण के लिए क्लिक करें）

1) BALB/c चूहे, मादा, 6-8 सप्ताह, 25 ग्राम;

2) 3% डीएसएस के साथ बाँझ पेयजल, और 0.22μm झिल्ली के साथ फिल्टर;

3) डीएसएस को 7 दिनों तक प्रशासित किया गया;

4) सूजन, जैसे बृहदान्त्र HE अभिरंजन के बाद शोफ और जमाव देखा गया।

चित्र 2 डीएसएस तीव्र कोलाइटिस अनुभागों के एचई धुंधला परिणाम [1]

  1. ज़ेब्राफ़िश मॉडल（विवरण के लिए क्लिक करें）
1) ज़ेब्राफ़िश भ्रूण प्राकृतिक स्पॉनिंग से प्राप्त किए गए और 28 डिग्री सेल्सियस पर एक इनक्यूबेटर में निषेचन (डीपीएफ) के 1 दिन बाद तक विकसित किए गए।5℃ पुनःपरिसंचरण जल में (60 μg/mL तत्काल महासागरीय समुद्री लवण) और 1 dpf तक मेथीलीन ब्लू के साथ पूरक;
2) 1 डीपीएफ के बाद, 3 डीपीएफ तक संवर्धन के लिए मेथीलीन ब्लू के बिना ई3 भ्रूण संवर्धन माध्यम का उपयोग करें;
3) E3 माध्यम के साथ 10% DSS भंडारण समाधान तैयार करें;
4) डीएसएस को संस्कृति माध्यम के साथ अधिकतम गैर घातक खुराक तक पतला करें (डीएसएस एकाग्रता संदर्भ: 0.5%);
5）जेब्राफिश को 3 डीपीएफ से 6 डीपीएफ तक 0.5% डीएसएस के साथ इलाज किया गया था, और सूचकांक थे।

चित्र 3 डीएसएस ज़ेब्राफ़िश के यकृत में सूजन प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है [2]

3.सुअर मॉडल（विवरण के लिए क्लिक करें）

1) यॉर्कशायर पिगलेट 18 वर्ष की आयु में 4-5 दिन;

2) डीएसएस खुराक: 1.25 ग्राम/किग्रा, 5 दिनों के लिए मौखिक सेवन;

3) डी-मैनिटोल अवशोषण दर में वृद्धि देखी गई।

चित्र 4 पिगलेट्स में डीएसएस-प्रेरित डी-मैनिटोल सांद्रता नियंत्रण समूह की तुलना में अधिक थी [3]

4.ड्रोसोफिला मॉडल（विवरण के लिए क्लिक करें）

1) ड्रोसोफिला, मादा, 5-10 दिन;

2) खिलाना मध्यम 5% सुक्रोज घोल के साथ तैयार किया गया जिसमें 3% डीएसएस और 25 μg/mL था ब्लियोमाइसिन;

3) ड्रोसोफिला को 29°C पर तीन दिनों तक संवर्धित किया गया, जिसमें प्रतिदिन संवर्धन बोतल बदली जाती थी;

4) डीएसएस ने आईएससी पूर्ववर्ती कोशिकाओं के प्रसार को प्रेरित किया और ड्रोसोफिला पर घातक प्रभाव डाला।

चित्र 5 डीएसएस ड्रोसोफिला में आईएससी अग्रदूत कोशिकाओं के प्रसार को प्रेरित करता है [4] .

5.सीओलिटिस से संबंधित कैंसर（विवरण के लिए क्लिक करें）

1）BALB/c चूहा, नर, 7 सप्ताह पुराना;
2) पहले दिन, चूहों का वजन करें और उन्हें चिन्हित करें। चूहों को पेट के अंदर 10 मिलीग्राम/किग्रा एओएम घोल इंजेक्ट करें।
3) चूहे के पिंजरे में पीने के लिए पानी भरें। प्रति दिन प्रति चूहे 7-10 एमएल पानी की गणना करें। एक सप्ताह तक खिलाएँ।
4) एक सप्ताह तक पीने के पानी को 2.5% डीएसएस से बदलें;
5) दो सप्ताह तक नियमित पीने के पानी के साथ खिलाएं;
6) चरण 3-4 को 3 बार दोहराएं।

    चित्र 6 सीएसी का योजनाबद्ध आरेख एओएम/डीएसएस द्वारा प्रेरित [5] .

    मॉडल मूल्यांकन मानदंड

    1. रोग गतिविधि सूचकांक ( डीएआई स्कोर)

    मॉडल का मूल्यांकन शरीर के वजन, मल की श्यानता और गुप्त रक्त सहित कई मापदंडों के आधार पर किया गया, जिसके माध्यम से समग्र DAI उत्पन्न होता है।

    तालिका 2 DAI स्कोरिंग नियम

    अंक

    वजन में कमी का प्रतिशत

    मल की स्थिरता

    मल गुप्त रक्त

    0

    0

    सामान्य

    नकारात्मक

    1

    1-5%

    नरम मल

    हल्का नीला रंग

    2

    5-10%

    श्लेष्मा मल

    नीला

    3

    10-20%

    पतले दस्त

    गहरा नीला

    4

    >20%

    \

    बहुत ज़्यादा खून वाला मल
    1. ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन स्कोर

    तीव्र कोलाइटिस मॉडल के लिए लिम्फ नोड गठन को छोड़कर हिस्टोलॉजिकल परिवर्तनों के आधार पर उपरोक्त संकेतकों के लिए स्कोर दिए गए थे। इस्तेमाल किया गया HE धुंधला अभिकर्मक Cat#60524ES60 है।

    तालिका 3 ऊतकवैज्ञानिक परिवर्तन स्कोर

    अंक

    अल्सर

    उपकला परिवर्तन

    भड़काऊ घुसपैठ

    लसीकापर्व )

    0

    0

    सामान्य

    कोई नहीं

    कोई नहीं

    1

    1

    गॉब्लेट सेल हानि

    पेरीक्रिप्ट घुसपैठ

    1

    2

    2

    गॉब्लेट सेल हानि

    पेशी श्लेष्मा में घुसपैठ

    2

    3

    3

    क्रिप्ट विलोपन

    पेशी म्यूकोसा की सामान्य घुसपैठ, म्यूकोसा का मोटा होना

    3

    4

    >3

    व्यापक क्रिप्ट क्षति या पॉलीपॉइड पुनर्जनन

    सबम्यूकोसा आक्रमण

    >3
    1. COLON लंबाई
    क्रोनिक कोलाइटिस मॉडल के लिए छोटी हुई बृहदांत्र लंबाई एक स्पष्ट लक्षण थी, जबकि तीव्र कोलाइटिस मॉडल के लिए इसी प्रकार के परिवर्तन 8वें दिन देखे जा सकते हैं।
      4.सारांश

      डीएसएस यूसी पशु मॉडल का उपयोग उचित नियंत्रण के साथ करने के लिए प्रारंभिक प्रयोगों की सिफारिश की जाती है। प्रति समूह 8-10 पशु न्यूनतम आवश्यकता है।

      इस संसाधन के लिए लिंक

      1) ज़ियाओना गाओ, एट अल. जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री 83 (2020) 108438.
      2）जिंग मा, एट अल. एक्वाकल्चर और फिशरीज (2021) 548–557.
      3）कोनी जे. किम, एट अल. जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री 21 (2010) 468–475.
      4）फैंगफैंग रेन, एट अल.पीएनएएस.2010.107 (49) 21064-21069.
      5）जिया-रोंग हुआंग, एट अल.फ्रंटियर्स इन फार्माकोलॉजी.2020.11:586885.

        येसेन डीएसएस के साथ मॉडलिंग का सफल मामला

        येसेन डीएसएस (कैट#60316ईएस, एमडब्लू: 36000~50000) के साथ 7 दिनों में सफल तीव्र कोलाइटिस मॉडल प्रमुख फेनोटाइप के साथ तैयार किए गए हैं, जैसा कि निम्नलिखित तालिका में दिखाया गया है।

        तालिका 4 डीएसएस के साथ विभिन्न प्रकार के आंत्रशोथ मॉडल का निर्माण

        नमूना

        मॉडलिंग नमूने

        मॉडलिंग योजना

        मॉडलिंग परिणाम

        उपयोग मूल्यांकन

        तीव्र बृहदांत्रशोथ

        BALB/c चूहे, मादा, 6-8 सप्ताह, 25 ग्राम

        3%-5% DSS लगातार 7 दिनों तक खुलेआम शराब पीते हैं

        5वां दिन आया, बृहदान्त्र की लंबाई छोटी हो गई, HE धुंधलापन, और सूजन स्पष्ट थी

        मोल्डिंग की गति तेज़ है और समय कम है। तीव्र कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप

        C57BL/6 चूहे, नर, 8 सप्ताह, 20 ग्राम

        3%-5% डीएसएस गैवेज द्वारा, निरंतर प्रशासन

        5वें दिन, बृहदान्त्र छोटा होना, वजन कम होना, मल में रक्त आना, दस्त होना

        उच्च मोल्ड दर और छोटी अवधि। तीव्र कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप

        क्रोनिक कोलाइटिस

        C57BL/6 चूहा, नर, 8 सप्ताह, 22 ग्राम

        1-2% डीएसएस गैवेज द्वारा, निरंतर प्रशासन

        दिन 40 दिखाई देता है, बृहदान्त्र छोटा होना, वजन कम होना, मल में रक्त, दस्त

        उच्च मोल्डिंग दर। क्रोनिक कोलाइटिस मॉडल की विशेषताओं के अनुरूप

        पेट का कैंसर

        C57BL/6 चूहा, नर, 8 सप्ताह, 21 ग्राम

        3 सप्ताह के लिए 5 दिनों के लिए 1%-2% DSS

        14 सप्ताह में बृहदान्त्र की लंबाई कम हो जाना, वजन कम होना, HE धुंधलापन, तथा स्पष्ट सूजन

        उच्च मोल्डिंग दर। कोलन कैंसर मॉडल विशेषताओं के अनुरूप

        एफएक्यूएस

        तीव्र डीएसएस कोलाइटिस मॉडल या क्रोनिक डीएसएस कोलाइटिस मॉडल के बावजूद, आंत्रशोथ की गंभीरता और सफलता माउस प्रजातियों (विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि), डीएसएस एकाग्रता और खुराक चक्र से संबंधित हैं।

        तालिका 5 डीएसएस कोलाइटिस मॉडलिंग की सामान्य समस्याएं

        संभावित समस्याएं

        संभावित कारण

        सुझाया गया समाधान

        चूहों में उच्च मृत्यु दर

        डीएसएस सांद्रता बहुत अधिक

        प्रशासित डीएसएस की सांद्रता कम करें

        आंत्रशोथ के कोई या कम लक्षण वाले चूहे

        डीएसएस सांद्रता बहुत कम

        डीएसएस खुराक सांद्रता बढ़ाएं; चक्र अंतराल घटाएं (10-14 दिन)

        चूहों के एक ही समूह में, आंत्रशोथ के लक्षण बहुत भिन्न होते हैं

        बोतल का ढक्कन बंद हो गया

        चूहे की पानी की बोतल की प्रतिदिन जांच करें

        पीउत्पाद क्रम

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        पीउत्पाद एनए एम इ

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        विनिर्देश

        डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम साल्ट (DSS), कोलाइटिस ग्रेड MW:36000~50000

        60316ES25/60/76/80

        25 ग्राम/100 ग्राम/500 ग्राम/1 किग्रा

        एज़ोक्सीमेथेन (एओएम)

        60751ईएस03/08/10

        1 मिलीग्राम/5 मिलीग्राम/10 मिलीग्राम

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        18528ES48

        48 टी

        मोलप्योर®मैग सॉइल/स्टूल डीएनए किट

        18526ईएस20/50/70

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        100टी

        एल्कियन ब्लू पीरियोडिक एसिड-शिफ (एबी-पीएएस) स्टेनिंग सॉल्यूशन

        60534ईएस50/60

        6×50 एमएल/6×100 एमएल/

        पीहमारे अभिकर्मकों के साथ प्रकाशित लेख

        2024

        • [1] झोंग डी, जिन के, वांग आर, एट अल. इन्फ्लेमेटरी बाउल डिजीज और इससे जुड़ी चिंता और अवसाद के लिए माइक्रोएल्गी-आधारित हाइड्रोजेल। एडव मैटर। 2024 जनवरी 26:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
        • [2] झांग वाई, तू एस, जी एक्स, वू जे, मेंग जे, गाओ जे, शाओ एक्स, शि एस, वांग जी, किउ जे, झांग जेड, हुआ सी, झांग जेड, चेन एस, झांग एल, झू एसजे।डुबोसिएला न्यू यॉर्केंसिस एल-लाइसिन-सक्रिय AhR-IDO1-Kyn मार्ग के माध्यम से कोलाइटिस में प्रतिरक्षा सहिष्णुता को नियंत्रित करता है। नैट कम्यून. 2024 फरवरी 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6
        • [3] ज़ुआन झांग, ज़िया गाओ, ज़ियांगज़ोउ यी, एट अल. अल्सरेटिव कोलाइटिस की प्रभावी रोकथाम के लिए कैनाबिडिओल के साथ मल्टी-टार्गेटिंग इनुलिन-आधारित नैनोकण [जे]। मैटेरियल्स टुडे बायो.2024, 25100965. IF=8.2

        2022

        • मेंगमेंग जू, यिंग कोंग, नन्नन चेन, एट अल. सक्रिय अल्सरेटिव कोलाइटिस में प्रतिरक्षा-संबंधित जीन हस्ताक्षर की पहचान और CeRNA नेटवर्क की भविष्यवाणी [जे]। फ्रंटियर्स इन इम्यूनोलॉजी। 2022; 13: 855645।आईएफ=7.561
        • लुजुआन जिंग, लिजुआन फू, सोंगमिन काओ, एट अल. एलपीएस-प्रेरित आरए में गोजातीय हड्डी-जिलेटिन-व्युत्पन्न पेप्टाइड्स का विरोधी भड़काऊ प्रभावW264.7 मैक्रोफेज कोशिकाएं और डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम-प्रेरित C57BL/6 चूहे [जे]। पोषक तत्व 2022, 14, 1479। आईएफ=5.717
        • वैंग एस,  हुआंग जे,  टैन के.एस., एट अल. आइसोस्टेविओल सोडियम मेटाबोलिक प्रोफाइलिंग, मैक्रोफेज पोलराइजेशन और एनएफ-बी पाथवे के विनियमन के माध्यम से डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट-प्रेरित क्रोनिक कोलाइटिस को ठीक करता है [जे]। ऑक्सीडेटिव मेडिसिन और सेलुलर दीर्घायु। 2022,4636618।आईएफ=5.076
        • युआनगेंगली, पिंगयु, वेनवेनफू, एट अल. पैनाक्स जिनसेंग सीए मेयर से पॉलीसेकेराइड ने चूहों में JAK2/STAT1/NLPR3 इन्फ्लेमसोम सिग्नलिंग मार्ग को बाधित करके DSS-प्रेरित IBD को कम किया [जे]। जर्नल ऑफ फंक्शनल फूड्स। 2022, 105013।आईएफ=4.451
        • लेई-निंगचेन, ताओजिंग, ज़ी-बिनलिन, एट अल. डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम प्रेरित कोलाइटिस के लिए माउस वृषण की मेटाबॉलिक और ट्रांसक्रिप्टोमिक प्रतिक्रियाएं [जे]। प्रजनन विष विज्ञान। 2022, पृष्ठ 35-42।आईएफ=3.143

        2021

        • ली झाओ, फी वांग, झेंगवेई कै, एट अल. अल्सरेटिव कोलाइटिस के इलाज के लिए इंजेक्टेबल म्यूकोएडेसिव हाइड्रोजेल के साथ दवा उपयोग मंच में सुधार [जे]। केमिकल इंजीनियरिंग जर्नल। 424 (2021) 130464।आईएफ=16.744
        • लिंगजुन टोंग, हैनिंग हाओ, झे झांग, एट अल. दूध से प्राप्त बाह्य कोशिकीय पुटिकाएं आंत की प्रतिरक्षा को विनियमित करके और आंत के माइक्रोबायोटा को फिर से आकार देकर अल्सरेटिव कोलाइटिस को कम करती हैं[जे].थेरानोस्टिक्स.2021; 11(17): 8570-8586 आईएफ=11.556
        • जिंगजिंग गण, युक्सियाओ लियू, लिंग्यु सन, एट अल. सूजन आंत्र रोग उपचार के लिए माइक्रोफ्लुइडिक्स से मौखिक रूप से प्रशासित न्यूक्लियोटाइड-डिलीवरी कण [जे]। एप्लाइड मैटेरियल्स टुडे। 2021 दिसंबर;25:101231 आईएफ=10.041
        • जियालीडोंग, युआनली, हुईवेनशियाओ, एट अल. ओरल माइक्रोबायोटा माउस मॉडल में कोलोरेक्टल कैंसर के लिए रेडियोथेरेपी की प्रभावकारिता और रोग का निदान को प्रभावित करता है [जे]। सेल रिपोर्ट। 2021, 109886।आईएफ=9.423
        • हाओ एच,  झांग एक्स,  टोंग एल,  लियू क्यू, एट अल. लैक्टोबैसिलस प्लांटारुम एक्स्ट्रासेल्यूलर वेसिकल्स का प्रभाव चूहों में आंत माइक्रोबायोटा और अल्सरेटिव कोलाइटिस पर Q7[जे]।फ्रंटियर्स इन इम्यूनोलॉजी.2021.777147।आईएफ=7.561
        • याओहुआ फैन, यानकुन फैन, कुनफेंग लियू, एट अल. खाद्य पक्षी का घोंसला Th17/Treg सेल संतुलन को बहाल करके C57BL/6J चूहों में डेक्सट्रान सल्फेट सोडियम-प्रेरित अल्सरेटिव कोलाइटिस को ठीक करता है [जे]। फार्माकोलॉजी में फ्रंटियर्स। 2021.632602।आईएफ=7.561

        2020

        • ली, वाई., डोंग, जे., जिओ, एच., झांग, एस., वांग, बी., कुई, एम., और फैन, एस.आंत से प्राप्त होने वाला वैलेरिक एसिड विकिरण चोटों से बचाता है। आंत के सूक्ष्मजीव, 2020 .1–18।आईएफ=10.245
        • जिया-रॉन्ग हुआंग, शेंग-ते वांग, मेंग-निंग वेई, एट अल. पाइपरलोंगुमाइन माउस कोलाइटिस और कोलाइटिस-संबंधी कोलोरेक्टल कैंसर को कम करता है [जे]। फार्माकोलॉजी में फ्रंटियर्स। 2020.586885।आईएफ=7.561
        • गाओ एक्स, फैन डब्ल्यू, टैन एल, एट अल. सोया आइसोफ्लेवोन्स ईआरα/एनएलआरपी3 इन्फ्लेमसोम मार्गों को लक्षित करके प्रायोगिक कोलाइटिस को बेहतर बनाते हैं[जे]। जर्नल ऑफ न्यूट्रिशनल बायोकैमिस्ट्री, 2020, 83।आईएफ=6.048

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