मैक्रोफेज शरीर के विभिन्न भागों में अद्वितीय और महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, हालांकि, विशिष्ट क्षेत्रों में मैक्रोफेज के विशिष्ट कार्यों और रोग विकास पर उनके प्रभाव का बेहतर अध्ययन करने के लिए सटीक मैक्रोफेज निष्कासन एक महत्वपूर्ण शोध उपकरण बन गया है। क्लोड्रोनेट लिपोसोम मैक्रोफेज हटाने के लिए सबसे सिद्ध, लागत प्रभावी और आदर्श उपकरणों में से एक है। क्लोड्रोनेट लिपोसोम को इंट्रापेरिटोनियल, टेल नस में और विभिन्न ऊतकों से मैक्रोफेज को हटाने के लिए विभिन्न अन्य तरीकों से प्रशासित किया जा सकता है।
आगे हम विभिन्न स्थानों पर मैक्रोफेज हटाने की विधियों और प्रभावशीलता को प्रदर्शित करने के लिए विषयों की एक श्रृंखला साझा करेंगे, जिससे शोधकर्ताओं के लिए उपयोगी संदर्भ और संदर्भ उपलब्ध होने की आशा है।
इंजेक्शन विधियों का परिचय
पूंछ शिरा इंजेक्शन
पूंछ शिरा इंजेक्शन 24 घंटे के बाद अधिकतम कमी पर पहुंच जाता है। पता लगाने के समय बिंदु पर ध्यान दिया जाना चाहिए।
1、चूहों को उल्टे लंच बॉक्स में रखें, पूंछ को छिद्र से बाहर खींचें, दो हैं धमनियों और तीन चूहों की पूँछ में दो नसें धमनियां पूंछ के पृष्ठीय और अधर पक्षों में होती हैं, और तीन शिराएँ ज़िगज़ैग पैटर्न में वितरित होती हैं, आमतौर पर शिराओं के बाएँ और दाएँ हिस्से का उपयोग किया जाता है;
2、धुंध को लगभग 70 ℃ गर्म पानी में भिगोएँ (या इसे शराब में भिगोएँ), इसे बाहर निकालें और पूंछ को लपेटें, ताकि पूंछ के वासोडाइलेटेशन के उद्देश्य को प्राप्त किया जा सके और एपिडर्मल केराटिन को नरम किया जा सके;
3、पूंछ के अंतःशिरा इंजेक्शन के लिए, चूहे की पूंछ को दबाए रखने से पहले और बाद में बाएं अंगूठे और तर्जनी के साथ, लगभग 2 सेमी का एक खंड छोड़ दें, ताकि त्वचा तनावपूर्ण हो, नसें अधिक भरी हों, दाहिने हाथ में 1 एमएल सुई सिरिंज पकड़ें, ताकि सुई और नस समानांतर हों (30 डिग्री से कम कोण), पूंछ के निचले 1/4 से सुई में, दवा के इंजेक्शन की शुरुआत धीमी, सावधानीपूर्वक अवलोकन होनी चाहिए, अगर कोई प्रतिरोध नहीं है, तो कोई सफेद डर्मेटोम दिखाई नहीं दिया, इसका मतलब है कि रक्त वाहिकाओं को छेद दिया गया है और दवाओं का औपचारिक इंजेक्शन हो सकता है।
4、कुछ प्रयोगों में कई दिनों तक बार-बार पूंछ शिरा इंजेक्शन की आवश्यकता होती है, इंजेक्शन साइट को यथासंभव पूंछ के अंत से शुरू करना चाहिए, और अनुक्रम में पूंछ की जड़ तक जाना चाहिए, और इंजेक्शन के लिए संवहनी स्थिति को बदलना चाहिए। सुई निकालने के बाद, इंजेक्शन साइट को 1 के लिए कपास की गेंद के साथ दबाएं - रक्तस्राव रोकने के लिए 2 मिनट।
इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन
इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन 48 के बाद अधिकतम कमी तक पहुँच जाता है - 72 घंटे. समय बिंदुओं का पता लगाने पर ध्यान दिया जाना चाहिए।
1、सबसे पहले, चूहों को पकड़ने के लिए पृष्ठीय बेलिंग विधि का उपयोग करें, ताकि उनके सिर को थोड़ा पीछे झुकाया जाए और उनके पेट ऊपर की ओर हों, चूहों के बाएं पिछले अंग को छोटी उंगली से स्थिर किया जाता है, और फिर इंजेक्शन स्थल को 75% अल्कोहल वाली कॉटन बॉल से निष्फल किया जाता है।
2、चूहों में इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन का स्थान 0.5 है निचले पेट की मध्य रेखा के दोनों ओर सेमी (जांघ की जड़ के साथ फ्लश)। अंगों को चोट से बचाने के लिए, माउस को पकड़ते समय माउस के सिर को पीछे की ओर झुकाया जाना चाहिए, ताकि निचले पेट के अंग ऊपर की ओर बढ़ सकें।
3、सिरिंज की सुई को त्वचा में घुसाएं, चमड़े के नीचे के क्षेत्र में प्रवेश करें, सुई को चमड़े के नीचे के क्षेत्र के साथ 2 सेकंड के लिए आगे की ओर धकेलें - 3 मिमी, और फिर सुई और त्वचा के बीच 45 डिग्री के कोण पर माउस के उदर गुहा में छेद करें। नोट: पेरिटोनियम में प्रवेश करने के बाद, सुई की नोक का प्रतिरोध गायब हो जाता है।
4、सुई प्लग वापस निकालें, अगर रक्त या तरल की कोई वापसी नहीं है, तो दवा को इंजेक्ट किया जा सकता है।
5. इंजेक्शन लगाने के बाद, सुई को धीरे से घुमाएं, फिर तरल रिसाव से बचने के लिए धीरे-धीरे सिरिंज को बाहर निकालें।
अलग-अलग अध्ययन स्थलों के लिए अलग-अलग इंजेक्शन विधियाँ भी होंगी, जैसे: चमड़े के नीचे इंजेक्शन, श्वासनली प्रशासन, अंतःकपाल इंजेक्शन और इसी तरह। आपको प्रयोग से पहले प्रासंगिक साहित्य का संदर्भ लेना चाहिए और येसेन तकनीकी टीम से परामर्श करना चाहिए।
खुराक चक्र और खुराक
अल्पावधि प्रशासन: क्लोरोफॉस्फेट लिपोसोम्स 200 µL का एक एकल इंजेक्शन (20 - 25 ग्राम वजन) को मैक्रोफेज निकासी दक्षता का पता लगाने या डाउनस्ट्रीम प्रयोगों के लिए एक विशिष्ट समय पर प्रयोग किया जाता है।
दीर्घकालिक प्रशासन: मैक्रोफेज क्लीयरेंस प्राप्त करने के लिए एक सप्ताह या उससे अधिक समय की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, WT चूहों में, 200 µL (20 - 25 ग्राम वजन) आमतौर पर पहली खुराक के रूप में दिया जाता है, इसके बाद 200 µL हर 2 - 3 दिन.
संदर्भ परीक्षण प्रोटोकॉल
| अंग/मैक्रोफेज | खुराक (20-25 ग्राम/चूहा) |
| प्लीहा/लाल गूदा मैक्रोफेज | एकल खुराक: 200 µL/माउस (IV या IP). |
| यकृत/कुफर कोशिकाएं | एकल खुराक: 200 µL/माउस (IV या IP). |
| फेफड़े/अल्वियोलर मैक्रोफेज | IV (150-200 µL) को इंट्राट्रेकियल या इंट्रानासल (50 µL) के साथ संयुक्त करने पर सर्वोत्तम परिणाम मिलते हैं। |
| लसीका ग्रंथि | इंजेक्शन (100-200 µL)/चूहा, विशिष्ट खुराक व्यवस्था साहित्य में पाई जा सकती है। |
| मस्तिष्क/माइक्रोग्लिया | मस्तिष्कमेरु द्रव में इंट्रासेरेब्रोवेंट्रीकुलर प्रवेश, 10 µL/चूहा, 50 µL/चूहा। |
| रक्त/मोनोसाइट्स | 150-200 µL/माउस (IV), अधिकतम कमी दर 24 घंटे के भीतर पहुँच जाती है, लेकिन 1 - 7 दिनों में अधिकतम कमी दर तनाव पर निर्भर करती है। |
नोट: उपरोक्त जानकारी केवल संदर्भ के लिए है, कृपया प्रासंगिक साहित्य देखें और प्रयोग से पहले येसेन तकनीकी टीम से परामर्श करें।
उत्पाद अनुशंसा
| प्रोडक्ट का नाम | आइटम नंबर | विनिर्देश |
| 40337ES08 | 5 एमएल | |
| 40337ES10 | 10 एमएल | |
| 40338ES08 | 5 एमएल | |
| 40338ईएस10 | 10 एमएल |