आइसोथर्मल न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन तकनीक को विभिन्न प्रवर्धन सिद्धांतों के आधार पर कई प्रकारों में वर्गीकृत किया जा सकता है। सबसे आम और व्यापक रूप से लागू विधि लूप-मध्यस्थ आइसोथर्मल प्रवर्धन (LAMP) तकनीक है जिसे 2000 में नोटोमी सहित जापानी विद्वानों द्वारा विकसित किया गया था। LAMP की तकनीकी विशेषता लक्ष्य जीन पर छह क्षेत्रों को लक्षित करने वाले चार प्राइमरों का डिज़ाइन है, जो 60~65°C के निरंतर तापमान पर प्रवर्धन प्रतिक्रिया का संचालन करने के लिए स्ट्रैंड-डिस्प्लेसिंग प्रकार Bst DNA पॉलीमरेज़ का उपयोग करते हैं। यह 10 प्राप्त करता है9-1010-15-60 मिनट के भीतर गुना प्रवर्धन।
Bst DNA पॉलीमरेज़ LAMP आइसोथर्मल एम्पलीफिकेशन तकनीक में मुख्य एंजाइम है। इसमें मजबूत थर्मल स्थिरता, स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि और पॉलीमरेज़ गतिविधि होती है, जो निरंतर तापमान की स्थितियों के तहत टेम्पलेट के तेज़, कुशल और विशिष्ट प्रवर्धन को सक्षम बनाती है। पीसीआर के विपरीत, जिसमें प्रवर्धन के लिए थर्मल विकृतीकरण चक्रों की आवश्यकता होती है, ऐसे चक्रों की आवश्यकता के बिना संपूर्ण LAMP प्रयोग एक घंटे के भीतर पूरा किया जा सकता है।
उत्पाद लाभ
ग्लिसरॉल-मुक्त एंजाइम, लाइओफिलाइज़ेशन के लिए उपयुक्त
परिवेश तापमान परिवहन, लागत में कमी
मजबूत स्ट्रैंड विस्थापन गतिविधि, संवेदनशील और स्थिर
तेजी से पुनर्जलीकरण, संचालित करने में आसान
प्रदर्शन की मुख्य बातें
01 फ्लोरोसेंट डाई विधि अनुप्रयोग
1、उच्च संवेदनशीलता और अच्छी विशिष्टता
RT-LAMP फ्लोरोसेंट डाई एम्पलीफिकेशन सिस्टम में, लाइओफिलाइज्ड पाउडर केक 14405ES का एम्पलीफिकेशन प्रदर्शन लिक्विड Bst एंजाइम (ग्लिसरॉल और ग्लिसरॉल-मुक्त सहित) के अनुरूप है, और दोनों 50 प्रतियों/T की संवेदनशीलता पर 100% पता लगा सकते हैं। विशिष्टता अच्छी है, NTC (नेगेटिव टेम्प्लेट कंट्रोल) के 48 कुओं में कोई पता नहीं चला।
2、अच्छा थर्मल त्वरित स्थिरता
RT-LAMP फ्लोरोसेंट डाई एम्पलीफिकेशन सिस्टम में, लाइओफिलाइज्ड पाउडर को क्रमशः 7 दिनों के लिए 45°C, 15 दिनों के लिए 45°C और 19 दिनों के लिए कमरे के तापमान पर भंडारण उपचार के अधीन किया गया था। थर्मल त्वरण के बाद, उत्पाद का प्रदर्शन ग्लिसरॉल-मुक्त Bst एंजाइम के तरल संस्करण के अनुरूप रहा, और NTC (नेगेटिव टेम्प्लेट कंट्रोल) में कोई शिखर नहीं देखा गया।
3、त्वरण के बाद पुनः जमने का समर्थन करता है
RT-LAMP फ्लोरोसेंट डाई एम्पलीफिकेशन सिस्टम में, लाइओफिलाइज्ड पाउडर को क्रमशः 7 दिनों के लिए 45°C और 15 दिनों के लिए 45°C पर स्टोरेज ट्रीटमेंट के अधीन किया गया था। थर्मल एक्सेलेरेशन ट्रीटमेंट के बाद लाइओफिलाइज्ड पाउडर को फिर लाइओफिलाइजेशन के दूसरे दौर (सिंगल एंजाइम और RT-LAMP अभिकर्मकों सहित) के अधीन किया गया। प्रयोगों से पता चलता है कि त्वरित उपचार और दूसरे लाइओफिलाइजेशन के बाद, उत्पाद का प्रदर्शन ग्लिसरॉल-मुक्त Bst एंजाइम के तरल संस्करण के अनुरूप रहता है, और NTC (नेगेटिव टेम्प्लेट कंट्रोल) में कोई शिखर नहीं देखा गया। उत्पाद की स्थिरता अच्छी है, जो सेकेंडरी लाइओफिलाइजेशन और सेकेंडरी लाइओफिलाइजेशन के बाद त्वरण का समर्थन करती है।
02 पीएच कलरमेट्रिक विधि अनुप्रयोग
1、उच्च संवेदनशीलता और अच्छी विशिष्टता
आरटी-लैम्प पीएच वर्णमिति प्रवर्धन प्रणाली में, लियोफिलाइज्ड पाउडर केक 14405ईएस की प्रवर्धन संवेदनशीलता 50 प्रतियां/टी (100% पता लगाने की दर) तक पहुंच सकती है, और विशिष्टता अच्छी है, एनटीसी (नकारात्मक टेम्पलेट नियंत्रण) के 24 कुओं में कोई पता नहीं चलता है।
2、अच्छा थर्मल त्वरित स्थिरता
RT-LAMP pH वर्णमिति प्रवर्धन प्रणाली में, 15 दिनों के लिए 45°C पर लाइओफिलाइज़्ड पाउडर 14405ES की थर्मल त्वरित स्थिरता, त्वरण के बाद द्वितीयक लाइओफिलाइज़ेशन के बाद स्थिरता (7 दिनों के लिए 45°C पर त्वरण के बाद पुनर्जलीकरण), और पुनर्जलीकरण के बाद भंडारण स्थिरता (पुनर्जलीकरण के बाद 7 दिनों के लिए -20°C पर संग्रहीत) की जाँच की गई। प्रयोगों से संकेत मिलता है कि 14405ES उत्पाद में अच्छी स्थिरता है, थर्मल त्वरण के बाद उत्पाद के प्रदर्शन पर कोई प्रभाव नहीं पड़ता है, और त्वरण के बाद द्वितीयक लाइओफिलाइज़ेशन का समर्थन करता है।
विशेष उत्पाद अनुशंसाएँ
| उत्पाद का प्रकार | उत्पाद फ़ंक्शन | प्रोडक्ट का नाम | आइटम नंबर |
| आरटी-लैंप मिक्स | प्रतिदीप्त रंग करना | आरटी-लैंप रंग परख किट（UDG प्लस） | 13762ईएस |
| पीएच संकेतक | आरटी-लैंप पीएच संवेदनशील रंग बनानेवाला पदार्थ किट | 13906ईएस | |
| लियोफिलाइज़ेबल पीएच संकेतक | आरटी-लैंप पीएच संवेदनशील रंग वर्णजनक संस्करण फ्रीज-ड्रायबल किट | 13920ईएस | |
| बीएसटी एंजाइम | ग्लिसरॉल | हाईएफ़® बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमर्स (40 यू/μएल) | 14402ईएस |
| ग्लिसरॉल-मुक्त | लियोफिलाइज़्ड बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमर्स (60 यू/μL，ग्लिसरोल-मुक्त) | 14405ईएस | |
| बफर | बेसिक बफर (रंग आदि से मुक्त) | 10× हाईएफ़® बीएसटी प्लस डीएनए पोलीमर्स बफर | 15441ईएस |