प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन एक प्रोटीन विश्लेषण तकनीक है। प्रोटीन बफर में नकारात्मक या सकारात्मक रूप से चार्ज होते हैं और इलेक्ट्रोफोरेसिस नामक विद्युत क्षेत्र में एनोड में चले जाते हैं। विभिन्न प्रोटीन अणुओं में अलग-अलग इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता होती है। प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन का एक बहुत ही महत्वपूर्ण हिस्सा जेल तैयार करना है। पारंपरिक जेल तैयार करने में अक्सर कई घंटे लगते हैं, और तरल रिसाव, असमान जेल और हवा के बुलबुले जैसी समस्याएं भी होती हैं। तैयारी की परेशानी के अलावा, कच्चे माल के अभिकर्मकों में भी कुछ विषाक्तता होगी, जो गोंद डिस्पेंसर के शरीर को नुकसान पहुंचाएगी, और प्रीफैब्रिकेटेड गोंद की उपस्थिति इन परेशानियों को हल कर सकती है। तो प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन का मूल सिद्धांत क्या है, और प्रीकास्ट जेल का कार्य और सिद्धांत क्या है?

1. प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन का मूल सिद्धांत क्या है?
2. पूर्वनिर्मित गोंद का कार्य और सिद्धांत क्या है?
3. येसेन द्वारा प्रदान किए गए पूर्वनिर्मित गोंद का परिचय
4. अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
5. उत्पाद विवरण

1. प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन का मूल सिद्धांत क्या है?

अधिकांश जैविक मैक्रोमोलेक्यूल्स, जैसे प्रोटीन और न्यूक्लिक एसिड, में धनायनिक और ऋणायनिक समूह होते हैं, जिन्हें ज़्विटेरियन कहा जाता है। ज़ोन इलेक्ट्रोफोरेसिस विधि जिसमें कणों को घोल में फैलाया जाता है और स्टार्च जेल, अगर या एगरोज़ जेल, पॉलीएक्रिलामाइड जेल आदि को सहायक माध्यम के रूप में इस्तेमाल किया जाता है, उसे जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस कहा जाता है। पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस एक इलेक्ट्रोफोरेसिस विधि है जिसमें समर्थन एक पॉलीएक्रिलामाइड जेल होता है। ऐसा माना जाता है कि पॉलीएक्रिलामाइड जेल के छिद्र के आकार को पॉलीमराइज़ करने के लिए नियंत्रित किया जाता है, और प्रोटीन को एक समान आणविक छलनी की क्रिया द्वारा अलग किया जाता है।

प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन में दो रूप शामिल हैं, मूल पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (नेटिव-पीएजीई) और सोडियम डोडेसिल सल्फेट-पॉलीएक्रिलामाइड जेल वैद्युतकणसंचलन (एसडीएस-पीएजीई)। मूल-पीएजीई वैद्युतकणसंचलन के दौरान प्रोटीन को बरकरार रखता है और उन्हें उनके आणविक भार, आकार और साथ के आवेश के आधार पर एक ढाल में अलग करता है। दूसरी ओर, एसडीएस-पीएजीई प्रोटीन को उनके उप-इकाइयों के आणविक भार के अनुसार अलग करता है। एसडीएस एक आयनिक डिटर्जेंट है। एक विकृतीकरण और एक घुलनशील एजेंट के रूप में, यह इंट्रामोलिकुलर और इंटरमोलिकुलर हाइड्रोजन बॉन्ड को तोड़ सकता है, अणुओं को मोड़ सकता है और प्रोटीन अणुओं की द्वितीयक और तृतीयक संरचनाओं को नष्ट कर सकता है। एक मजबूत कम करने वाले एजेंट के रूप में, मर्कैप्टोएथेनॉल, डिथियोथ्रेइटोल, सिस्टीन अवशेषों के बीच डाइसल्फ़ाइड बॉन्ड को तोड़ सकता है। सैंपल और जेल में रिड्यूसिंग एजेंट और एसडीएस मिलाने के बाद, अणुओं को पॉलीपेप्टाइड चेन में डीपॉलीमराइज़ किया जाता है, और डीपॉलीमराइज़्ड एमिनो एसिड साइड चेन और एसडीएस को प्रोटीन-एसडीएस मिसेल में संयोजित किया जाता है। प्रोटीन-एसडीएस मिसेल का ऋणात्मक आवेश प्रोटीन के मूल आवेश से अधिक होता है, जिससे विभिन्न अणुओं के बीच आवेश अंतर और संरचनात्मक अंतर समाप्त हो जाता है। प्रोटीन की गतिशीलता केवल प्रोटीन के आणविक द्रव्यमान पर निर्भर करती है, और प्रोटीन के आणविक द्रव्यमान को ज्ञात आणविक द्रव्यमान के मानक के साथ तुलना करके निर्धारित किया जा सकता है।

2. पूर्वनिर्मित गोंद का कार्य और सिद्धांत क्या है?

पारंपरिक हैंडकास्ट जैल की तुलना में, प्रीकास्ट प्रोटीन जैल बड़ी संख्या में विषाक्त अभिकर्मकों के संपर्क से बच सकते हैं, बहुत समय बचा सकते हैं, और हैंडकास्ट जैल में बड़े अंतर की समस्या को प्रभावी ढंग से हल कर सकते हैं।

जेल में दो अलग-अलग जेल परतें होती हैं, ऊपरी परत स्टैकिंग जेल होती है और निचली परत अलग करने वाली जेल होती है। स्टैकिंग जेल को स्टैकिंग जेल के नाम से भी जाना जाता है।जेल की सांद्रता अपेक्षाकृत छोटी होती है और छिद्र का आकार अपेक्षाकृत बड़ा होता है। नमूने को स्टैकिंग जेल में जोड़ा जाता है और बड़े छिद्र आकार वाले जेल के प्रवास के माध्यम से एक संकीर्ण क्षेत्र में केंद्रित किया जाता है। अलग करने वाले जेल, जिसे इलेक्ट्रोफोरेसिस जेल के रूप में भी जाना जाता है, में आमतौर पर एक छोटा छिद्र आकार होता है, और उचित जेल सांद्रता का चयन करके नमूना घटकों को अच्छी तरह से अलग किया जा सकता है।

अलग करने वाले जैल को निश्चित जैल और ग्रेडिएंट जैल में विभाजित किया जा सकता है। पॉलीएक्रिलामाइड की सांद्रता 8%, 10%, 12%, 15%, 4% से 12% और 4% से 20% है। पहले चार निश्चित सांद्रता वाले प्रीकास्ट जैल हैं, और अंतिम दो ग्रेडिएंट जैल हैं। सांद्रता पृथक प्रोटीन आणविक भार की सीमा का प्रतिनिधित्व करती है। जेल ग्रेडिएंट ग्रेडिएंट मिक्सर द्वारा बनाए जाते हैं। एक उच्च सांद्रता वाले एक्रिलामाइड घोल को कांच की प्लेट में डाला जाता है, और फिर घोल की सांद्रता एक ढाल में कम हो जाती है, और जेल का छिद्र आकार शीर्ष पर बड़ा और नीचे छोटा होता है। फिक्सेटिव जेल केवल अपनी पृथक्करण सीमा के भीतर प्रोटीन को अलग कर सकता है, न तो बहुत बड़ा और न ही बहुत छोटा। ग्रेडिएंट जैल में यह सीमा नहीं होती है, जहां बड़े अणु शीर्ष पर अलग होते हैं और छोटे अणु नीचे अलग होते हैं। चूँकि ग्रेडिएंट जेल का छिद्र आकार धीरे-धीरे छोटा होता जाता है, इसलिए छिद्र आकार के पास प्रोटीन पर इसका एक संकेन्द्रण प्रभाव होता है, जिससे प्रोटीन भेद नहीं पाता है, इसलिए इलेक्ट्रोफोरेसिस के बाद एक बहुत ही संकीर्ण क्षेत्र बन जाएगा। आणविक भार में छोटे अंतर वाले प्रोटीन को अक्सर स्थिर जेल पर अलग नहीं किया जा सकता है, लेकिन ग्रेडिएंट जेल पर उन्हें अलग किया जा सकता है।

3. येसेन द्वारा प्रदान किए गए पूर्वनिर्मित गोंद का परिचय

येसेन प्रीकास्ट प्रोटीन प्लस जेल रोकना ग्रेडिएंट सांद्रता और निश्चित सांद्रता, विभिन्न सांद्रता की एक किस्म विभिन्न प्रोटीन वैद्युतकणसंचलन की जरूरतों को पूरा कर सकती है। यह एक अद्वितीय जेल तैयारी प्रक्रिया द्वारा तैयार किया जाता है और इसका एक उत्कृष्ट इलेक्ट्रोफोरेटिक प्रभाव होता है। यह बाजार पर सभी प्रकार के वैद्युतकणसंचलन टैंकों (बायो-आरएडी, टैनॉन, लाइफ, आदि) के साथ संगत है और इसमें व्यापक अनुकूलनशीलता, उच्च रिज़ॉल्यूशन, उच्च स्थिरता, स्पष्ट और समान बैंड आदि के फायदे हैं।

3.1 येसेन प्रीकास्ट प्रोटीन प्लस जेल प्लास्टिक बोर्ड में अपग्रेड करें, बेहतर गुणवत्ता!

उपयोग में आसान: उपयोग के लिए तैयार; प्लास्टिक बोर्ड के नीचे से चिपकने वाला टेप फाड़ दें

अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखला: विकृत प्रोटीन और प्राकृतिक प्रोटीन के साथ संगत

स्पष्ट बैंड: प्लास्टिक प्लेटों का विशेष उपचार प्रोटीन अवशोषण को बहुत कम कर देता है

समय की बचत: यह प्रयोग अधिकतम 18 मिनट में पूरा किया जा सकता है

गुणवत्ता आश्वासन: सख्त अंतर-बैच स्थिरता आश्वासन

लंबी शेल्फ लाइफ: 4℃ पर संग्रहीत किया जा सकता है 12 महीने के लिए

3.2 निम्नलिखित पैरामीटर आपको उपयुक्त जेल श्रृंखला चुनने में मदद कर सकते हैं

वैद्युतकणसंचलन बफर प्रणाली: विकृत प्रोटीन रनिंग बफर या प्राकृतिक प्रोटीन रनिंग बफर

कुओं की संख्या और नमूना लोडिंग: 10 या 15 कुएँ, अधिकतम नमूना आकार क्रमशः 70 μL और 40 μL था

जेल सांद्रता: 8%, 10%, 12%, 15%, 4%-12%, 4%-20%

तालिका नंबर एक।जेल सांद्रता और रैखिक पृथक्करण की सीमा

3.3 डेटा शो

चित्र 1. डेटा शो

चित्र 2. डेटा शो

4. अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न

प्रश्न 1: क्या प्रीकास्ट को जेल 4 डिग्री सेल्सियस पर रखा जा सकता है? क्या इससे कोई फर्क पड़ता है अगर आप इसे थोड़ी देर के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ देते हैं?

ए: अनुशंसित 4℃, 12 महीनों के लिए संग्रहीत किया जा सकता है। 0℃ से नीचे स्टोर न करें, कमरे के तापमान (25℃) पर 30 दिनों के लिए संग्रहीत किया जा सकता है।

प्रश्न 2: ग्रेडिएंट सांद्रता और निश्चित सांद्रता के बीच कैसे चयन करें? प्रीकास्ट द्वारा अलग किए गए प्रोटीन का न्यूनतम आणविक भार क्या है जेल?

A: प्रीकास्ट द्वारा प्रोटीन पृथक्करण का आकार जेल इसकी सांद्रता से संबंधित है, और संबंधित पृथक्करण सीमा ऊपर दिए गए चित्र में दिखाई गई है।

निश्चित सांद्रता प्रीकास्ट जेल बेहतर रिज़ॉल्यूशन है। ग्रेडिएंट कंसंट्रेशन प्रीकास्ट जेल एक व्यापक पृथक्करण रेंज और अनुप्रयोगों की एक व्यापक रेंज है; ग्राहक उन्हें अपनी आवश्यकताओं के अनुसार उपयुक्त सांद्रता का चयन करना चाहिए।

हमारा 4%-20% ग्रेडिएंट प्रीकास्ट जेल (कैट#36250, कैट#36256) में 3.5kDa जितनी कम मात्रा वाले प्रोटीन के लिए एक विस्तृत पृथक्करण रेंज है।

चित्र तीन। ग्रेडिएंट प्रीकास्ट जेल डेटा

प्रश्न 3: क्या प्रीकास्ट जेल क्या आपको अपना विशेष बफर तैयार करना होगा? क्या आप अपना बफर बना सकते हैं?

उत्तर: YEASEN विशेष बफर (कैट#36236, कैट#36237) और प्रीकास्ट जेल प्रयोज्यता बेहतर है। अन्य बफ़र्स के साथ मिश्रण न करें। बफर अभिकर्मकों को खरीदकर तैयार किया जा सकता है, लेकिन ग्राहक हमारे सूत्र का उपयोग करने की आवश्यकता है, जो प्रासंगिक प्रीकास्ट में पाया जा सकता है जेल निर्देश.

प्रश्न 4: अलग करने वाले जेल के बीच अंतर कैसे करें और सांद्रित जेल? क्या यह अनुभागीय वोल्टेज वैद्युतकणसंचलन के लिए आवश्यक है?

ए: दो घटक समान हैं, लेकिन एकाग्रता समान नहीं है, नग्न आंख भेद नहीं कर सकती है; केंद्रित गोंद की ऊंचाई 1.5 सेमी है।

नहीं, 150 V पर वैद्युतकणसंचालन की सिफारिश की जाती है, तथा प्रयोग पूरा करने में 30-40 मिनट का समय लगता है।

प्रश्न 5: क्या आपका प्रीकास्ट बाजार में सभी प्रकार के वैद्युतकणसंचलन टैंकों के लिए उपयुक्त जेल?

उत्तर: हां, हमारा प्रीकास्ट जेल बाजार में सभी प्रकार के वैद्युतकणसंचलन टैंकों के लिए उपयुक्त है,

बायो-रेड मिनी-प्रोटियन (II/3 / टेट्रा सिस्टम) और टैनॉन VE180 (सीलिंग स्ट्रिप की रिवर्स असेंबली पर ध्यान दें);

लाइफ टेक्नोलॉजी नोवेक्स मिनी-सेल (विशेष बैफल के साथ प्रयुक्त);

10 सेमी वैद्युतकणसंचलन टैंक में अन्य जेल प्लेट की चौड़ाई।

5. उत्पाद विवरण

येसेन द्वारा उपलब्ध कराए गए उत्पाद इस प्रकार हैं:

तालिका 2.उत्पाद विवरण