नि: शुल्क गाइड: प्रोटीन शुद्धि वर्कफ़्लो का अनुकूलन

प्रोटीन शुद्धिकरण जैव रसायन विज्ञान और आणविक जीव विज्ञान में एक मौलिक तकनीक है, जिसका व्यापक रूप से अनुसंधान, निदान और चिकित्सीय अनुप्रयोगों में उपयोग किया जाता है। किसी विशिष्ट प्रोटीन का अध्ययन करने के लिए, पहला कदम जैविक नमूनों से उसे अलग करना और शुद्ध करना है। हालाँकि, प्रोटीन की विविधता और जैविक प्रणालियों की जटिलता को देखते हुए, उच्च शुद्धता वाला प्रोटीन प्राप्त करना एक चुनौती हो सकती है। प्रोटीन शुद्धिकरण के मूल सिद्धांतों को समझना और अपने शोध के लिए सही तकनीकों का चयन करना आपके वर्कफ़्लो दक्षता और उपज को बहुत बढ़ा सकता है।

प्रोटीन शुद्धिकरण की मूल बातें

प्रोटीन शुद्धिकरण प्रोटीन के भौतिक और रासायनिक गुणों में अंतर पर निर्भर करता है, जैसे आकार, आवेश, हाइड्रोफोबिसिटी और विशिष्ट लिगैंड के लिए आत्मीयता। इन अंतरों का फायदा उठाकर, शोधकर्ता लक्ष्य प्रोटीन को अन्य जैविक घटकों से प्रभावी ढंग से अलग कर सकते हैं, जिससे संदूषण कम से कम हो सकता है।

यहां विशिष्ट पृथक्करण तंत्रों पर आधारित प्राथमिक प्रोटीन शुद्धिकरण तकनीकें दी गई हैं:

इनमें से प्रत्येक तकनीक को उपयुक्त सामग्रियों और स्तंभों का चयन करके अनुकूलित किया जा सकता है। आदर्श विधि प्रोटीन की विशेषताओं और डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के लिए आवश्यक शुद्धता स्तर पर निर्भर करती है।

Y के साथ अपने प्रोटीन शुद्धिकरण वर्कफ़्लो को अनुकूलित करनाआराम करना जीवविज्ञान उत्पाद

पर येसेन जीवविज्ञान, हम प्रोटीन शुद्धिकरण को सुव्यवस्थित करने के लिए डिज़ाइन किए गए उच्च-गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों और सामग्रियों की एक विस्तृत श्रृंखला प्रदान करते हैं। चाहे आप जटिल जैविक नमूनों को संभाल रहे हों या उच्च-उपज, उच्च-शुद्धता वाले प्रोटीन की आवश्यकता हो, हम आपकी शुद्धिकरण प्रक्रिया को बढ़ाने के लिए उपकरण प्रदान करते हैं। आपके शुद्धिकरण वर्कफ़्लो को अनुकूलित करने में आपकी सहायता करने के लिए हमारे कुछ प्रमुख उत्पादों का अवलोकन यहाँ दिया गया है:

उनका टैग प्रोटीन शुद्धि (कैट#20502ES):

पुनः संयोजक प्रोटीन अभिव्यक्ति में, उसका टैग (आमतौर पर 6×His) अपने छोटे आकार, कम प्रतिरक्षाजनकता और प्रोटीन कार्य पर न्यूनतम प्रभाव के कारण व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। उनके टैग प्रोटीन को निकेल आयनों, जैसे कि Ni-NTA रेजिन के साथ चिलेटेड एफिनिटी रेजिन द्वारा कुशलतापूर्वक शुद्ध किया जा सकता है। हिससेप नी-एनटीए एगरोज़ रेज़िन (कैट#20502ES) Y द्वारा प्रदान किया गयाआराम करना जीवविज्ञान मैट्रिक्स के रूप में अत्यधिक क्रॉसलिंक्ड एगरोस जेल का उपयोग करता है, जिसे क्वाड-कोऑर्डिनेटेड नाइट्रोजन-ट्राइएसिटिक एसिड (एनटीए) लिगैंड के साथ मिलाकर स्थिर निकल आयन चेलेट बनाया जाता है। संयुक्त संरचना कुशल प्रोटीन बाइंडिंग और एल्यूशन प्रदर्शन सुनिश्चित करती है।

टैग एंटीबॉडी आत्मीयता शुद्धि

टैग एंटीबॉडी की एफिनिटी शुद्धि, फ्यूजन प्रोटीन की शुद्धि प्राप्त करने के लिए एंटीबॉडी और उसके विशिष्ट टैग के बीच उच्च विशिष्ट बंधन का उपयोग करती है। आम टैग में शामिल हैं झंडा, HA, Myc, आदि। संबंधित एंटीबॉडी एफिनिटी मीडिया का उपयोग करके, रुचि के प्रोटीन को जटिल नमूनों से कुशलतापूर्वक अलग किया जा सकता है।

येसेन बायोलॉजी विभिन्न प्रकार के लेबल एंटीबॉडी एफिनिटी शुद्धिकरण उत्पाद प्रदान करता है:

• एंटी-फ्लैग एफिनिटी जेल (कैट#20584ES):
  उच्च गुणवत्ता वाले म्यूरिन IgG2b मोनोक्लोनल एंटीबॉडी से 4% अत्यधिक क्रॉसलिंक्ड एगरोज जेल के माध्यम से तैयार किया गयाउफ़ आपूर्ति युग्मन, इसमें उच्च फ्लैग-टैग संलयन प्रोटीन लोडिंग क्षमता है, सुफ्लैग-टैग प्रोटीन के इम्यूनोप्रीसिपिटेशन और शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त। yeasen.com

• एंटी-एचए एफिनिटी जेल(बिल्ली#20586तों):
  आपूर्ति युग्मन के माध्यम से उच्च गुणवत्ता वाले म्यूरिन आईजीजी 1 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और सेफरोस 4 बी जेल से तैयार, इसमें एचए-टैग संलयन प्रोटीन की उच्च लोडिंग क्षमता है, जो एचए-टैग प्रोटीन के इम्यूनोप्रीसिपिटेशन और शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त है।कॉम

• एंटी-माइक एफिनिटी जेल（बिल्ली#20587तों）:
  उच्च गुणवत्ता वाले म्यूरिन आईजीजी1 मोनोक्लोनल एंटीबॉडी को सेफरोज़ 4बी जेल के साथ जोड़ा गया है, जिसे उच्च विशिष्टता और उच्च बंधन क्षमता के साथ माइक-टैग्ड प्रोटीन के शुद्धिकरण के लिए डिज़ाइन किया गया है।

• एंटी-फ्लैग इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स（कैट#20565ES）:
  इस इम्यूनोमैग्नेटिक बीड को उच्च गुणवत्ता वाले माउस-व्युत्पन्न IgG2b मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करके चुंबकीय एगरोज़ माइक्रोस्फेयर के साथ जोड़ा गया है, जो चुंबकीय क्षेत्रों की क्रिया के तहत फ्लैग-टैग किए गए प्रोटीन को जल्दी से शुद्ध कर सकता है, और छोटे नमूना आकारों के शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त है।

एंटीबॉडी आत्मीयता शुद्धिकरण(कैट#36401ES):

एंटीबॉडी आत्मीयता शुद्धिकरण प्रोटीन शुद्धिकरण के लिए एंटीबॉडी के प्रतिजन के साथ विशिष्ट बंधन का उपयोग करने की एक विधि है। क्षार-प्रतिरोधी पुनः संयोजक प्रोटीन ए एगरोस शुद्धिकरण राल (कैट # 36401ES) का उपयोग आमतौर पर एंटीबॉडी आत्मीयता शुद्धिकरण माध्यम के रूप में किया जाता है और एंटीबॉडी शुद्धिकरण और संवर्धन के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

प्रोटीनेज़

प्रोटीन अध्ययनों में, प्रोटीज़ का उपयोग फ़्यूज़न टैग को तोड़ने के लिए किया जाता है, जिससे लक्ष्य प्रोटीन की प्राकृतिक अवस्था बहाल हो जाती है। इन प्रोटीज़ को अपने प्रोटीन शुद्धिकरण कार्यप्रवाह में शामिल करने से आपके लक्ष्य प्रोटीन की गुणवत्ता और कार्यक्षमता में वृद्धि हो सकती है, जिससे उन्नत शोध और विकास परियोजनाओं में सुविधा होगी।

• रिकॉम्बिनेंट एंटरोकाइनेज (कैट#20401ES):

एंटरोकिनेज, जिसे एंटरोपेप्टिडेज़ के नाम से भी जाना जाता है, एक सेरीन प्रोटीज़ है जो विशेष रूप से एमिनो एसिड अनुक्रम DDDDK के बाद विभाजित होता है। येसेन का पुनः संयोजक एंटरोकिनेज किसमें व्यक्त किया जाता है इशरीकिया कोली और टैग से मुक्त है, यह सुनिश्चित करता है कि यह डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों में हस्तक्षेप नहीं करता है। यह एंजाइम पुनः संयोजक प्रोटीन से फ़्यूज़न टैग हटाने के लिए आदर्श है, संरचनात्मक और कार्यात्मक अध्ययनों के लिए मूल प्रोटीन के उत्पादन की सुविधा प्रदान करता है।

• एलपीएनजीएएसई एफ (कैट#20407ईएस):

PNGase F एक एमिडेज़ है जो विशेष रूप से N-लिंक्ड ग्लाइकोप्रोटीन के सबसे भीतरी GlcNAc और Asn अवशेषों के बीच विभाजित होता है। येसेन का PNGase F 100,000 U/mL की सांद्रता पर प्रदान किया जाता है, जो डीग्लाइकोसिलेशन प्रतिक्रियाओं के लिए उच्च गतिविधि प्रदान करता है। यह एंजाइम ग्लाइकोप्रोटीन संरचनाओं और कार्यों का अध्ययन करने के लिए महत्वपूर्ण है, क्योंकि यह पेप्टाइड रीढ़ को प्रभावित किए बिना N-लिंक्ड ग्लाइकेन को हटा देता है।

• रिकॉम्बिनेंट ट्रिप्सिन (MS-SAFE) (कैट#20416ES):

ट्रिप्सिन एक सेरीन प्रोटीज है जो लाइसिन और आर्जिनिन अवशेषों के कार्बोक्सिल पक्ष पर पेप्टाइड बॉन्ड को तोड़ता है। येसेन का पुनः संयोजक ट्रिप्सिन MS-SAFE है, जिसका अर्थ है कि यह अपनी उच्च शुद्धता और न्यूनतम ऑटोलिटिक गतिविधि के कारण मास स्पेक्ट्रोमेट्री अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त है। यह एंजाइम प्रोटिओमिक अध्ययनों के लिए आदर्श है, जिसमें मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण के लिए प्रोटीन पाचन शामिल है।

शुद्धिकरण तरीका	अभिकर्मक प्रकार	उत्पाद का प्रकार	अनुशंसित उत्पाद
जेल निस्पंदन	डेक्सट्रान जेल क्रोमैटोग्राफी	डिसल्टिंग फिलर्स प्रीपैक्ड कॉलम का विलवणीकरण डिसल्टिंग ग्रेविटी कॉलम स्पिन कॉलम	डिसल्टिंग कॉलम G25 M（कैट#20590ES） स्पिन डिसाल्टिंग कॉलम, 0.5 एमएल （कैट#20599ES） गुरुत्वाकर्षण विलवणीकरण स्तंभ, 8.3 एमएल (कैट#20741ES）
	अगारोज़ जेल क्रोमैटोग्राफी	भरनेवाला प्रीपैक्ड कॉलम	गेल्डेक्स 200 पीजी उच्च रिज़ॉल्यूशन एगरोज़ जेल क्रोमैटोग्राफी पैकिंग (10-600 केडीए) (कैट#20598ईएस) गेल्डेक्स 200 पीजी क्रोमैटोग्राफी कॉलम （कैट#20593ES）
आयन एक्सचेंज	ऋणायनिक विनिमय क्रोमैटोग्राफी	भरनेवाला प्रीपैक्ड कॉलम	क्यू एगरोज़ एचपी (क्यू स्ट्रॉन्ग एनियन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी पैकिंग एचपी) (कैट#20460ईएस) क्यू एचपी स्ट्रॉन्ग एनियन एक्सचेंज प्रीपैक्ड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20462ईएस)
	कैटायनिक एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी		एसपी एगरोज़ एचपी (एसपी स्ट्रांग कैटियन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी पैकिंग एचपी) (कैट#20463ईएस) एसपी एचपी स्ट्रांग कैटियन एक्सचेंज प्रीपैक्ड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20465ईएस)
हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन क्रोमैटोग्राफी	कमज़ोर हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी	भरनेवाला प्रीपैक्ड कॉलम	उच्च रिज़ॉल्यूशन ब्यूटाइल कमजोर हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी माध्यम (कैट#20484ES) ब्यूटाइल एचपी कमजोर हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20485ईएस)
	मजबूत हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी		उच्च रिज़ॉल्यूशन फेनिल दृढ़ता से हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी माध्यम (कैट#20486ES) फिनाइल एचपी स्ट्रोंगली हाइड्रोफोबिक क्रोमैटोग्राफी प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20487ES)
आत्मीयता शुद्धिकरण	उनकी टैग प्रोटीन शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम शुद्धिकरण चुंबकीय मोती	हिस-टैग प्रोटीन एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट#20502ES) हिस-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20504ES) हिस-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण चुंबकीय मोती (कैट#20561ES)
	जीएसटी-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम शुद्धिकरण चुंबकीय मोती	ग्लूटाथिऑन एगरोज़ रेज़िन (जीएसटी-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण के लिए) (कैट#20507ES) जीएसटी टैग प्रोटीन शुद्धिकरण प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20510ES) जीएसटी टैग प्रोटीन शुद्धिकरण चुंबकीय मोती (कैट#20562ES)
	एमबीपी-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम	एमबीपी-टैग्ड प्रोटीन अत्यधिक क्रॉसलिंक्ड शुद्धिकरण रेजिन (कैट#20515ES) एमबीपी टैग प्रोटीन शुद्धिकरण प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20517ES)
	स्ट्रेप(Ⅱ) टैग प्रोटीन शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम	स्ट्रेप (II) टैग प्रोटीन एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट # 20495ES)
	बायोटी-टैग प्रोटीन शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स	स्ट्रेप्टाविडिन एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट#20512ES) बायोटिन आणविक शुद्धिकरण प्रीलोडेड कॉलम, 5 एमएल (कैट#20514ES) स्ट्रेप्टाविडिन (SAV) इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स (कैट#47503ES)
	टैग एंटीबॉडी एफिनिटी शुद्धिकरण	जेल इम्यूनोमैग्नेटिक मोती	एंटी-फ्लैग एफिनिटी शुद्धिकरण जेल (कैट#20584ES) एंटी-एचए एफिनिटी शुद्धिकरण जेल (कैट#20586ES) एंटी-माइक एफिनिटी शुद्धिकरण जेल (कैट#20587ES) एंटी-फ्लैग इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स (कैट#20565ES)
	एंटीबॉडी एफिनिटी शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स	पुनः संयोजक प्रोटीन ए एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट#36401ES) प्रोटीन जी एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट#36405ES) प्रोटीन ए/जी एगरोज़ शुद्धिकरण राल (कैट#36403ES) प्रोटीन ए/जी इम्यूनोमैग्नेटिक बीड्स (कैट#36417ES)
	अन्य एंटीबॉडी एफिनिटी शुद्धिकरण	राल प्रीपैक्ड कॉलम	एंडोटॉक्सिन उच्च दक्षता हटाने शुद्धिकरण राल (कैट#20518ES) हेपरिन एफिनिटी शुद्धिकरण माध्यम (कैट#20493ES)
其他产品	प्रोटिएजों	टैग क्लीविंग एंजाइम्स ग्लाइकोसिडेस मास स्पेक्ट्रोमेट्री ग्रेड एंजाइम	इ.कोली एक्सप्रेस्ड रिकॉम्बिनेंट एंटरोकिनेस (लेबल के बिना) (कैट#20401ES) बोवाइन थ्रोम्बिन (उच्च व्यवहार्यता, >2000 IU/mg) (कैट#20402ES) आरटीईवी प्रोटीज रिकॉम्बिनेंट टोबैको एच वायरस प्रोटीज (कैट#20403ईएस) पीएनजीएएस एफ, एन-ग्लाइकोसिडेस एफ (100000 यू/एमएल) (कैट#20407ES) रिकॉम्बिनेंट ट्रिप्सिन (MS-SAFE) रिकॉम्बिनेंट ट्रिप्सिन (मास स्पेक्ट्रोमेट्री ग्रेड) (कैट#20416ES)
	क्रोमैटोग्राफी उपभोग्य वस्तुएं	गुरुत्वाकर्षण प्रवाह खाली कॉलम खाली कॉलम टाइप करें YXK कॉलम डायलिसिस बैग	12 एमएल ग्रेविटी क्रोमैटोग्राफी खाली कॉलम (कैट#20523ES) 5 एमएल टाइप सी खाली कॉलम (अकाटा, सिरिंज या पेरिस्टाल्टिक पंप से जुड़ा हुआ) (कैट#20526ES) YXK16/70 क्रोमैटोग्राफी खाली कॉलम (कैट#20443ES) 27 मिमी डायलिसिस बैग (MWCO 50 kDa) (कैट#20534ES)

निष्कर्ष: अपने वर्कफ़्लो को अपनी ज़रूरतों के हिसाब से ढालें

अपने शोध या अनुप्रयोग के लिए उच्च शुद्धता, उच्च उपज वाले प्रोटीन प्राप्त करने के लिए अपने प्रोटीन शुद्धिकरण कार्यप्रवाह को अनुकूलित करना महत्वपूर्ण है। शुद्धिकरण सिद्धांतों को समझकर और सही उपकरण चुनकर, आप अपनी प्रक्रिया को सुव्यवस्थित कर सकते हैं और आम नुकसानों से बच सकते हैं। येसेन बायोलॉजी प्रोटीन शुद्धिकरण के सभी चरणों के लिए उच्चतम गुणवत्ता वाले अभिकर्मक और उपभोग्य वस्तुएं प्रदान करता है, जिससे यह सुनिश्चित होता है कि आपके प्रोटीन शुद्ध, कार्यात्मक और विश्लेषण के लिए तैयार हैं।

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