पृष्ठभूमि
ट्रांसफ़रिन, जिसे ट्रांसफ़रिन (TRF, Tf) के नाम से भी जाना जाता है, पाचन तंत्र द्वारा अवशोषित आयरन और लाल रक्त कोशिका के विघटन से निकलने वाले आयरन को ले जाने के लिए जिम्मेदार है। यह परिपक्व लाल रक्त कोशिकाओं के उत्पादन के लिए ट्राइवेलेंट आयरन कॉम्प्लेक्स (Tf-Fe3+) के रूप में अस्थि मज्जा में प्रवेश करता है। ट्रांसफ़रिन मुख्य रूप से प्लाज्मा में मौजूद होता है। प्लाज्मा में मौजूद ट्रांसफ़रिन शरीर के अधिकांश ऊतकों को आयरन की आपूर्ति करता है, जबकि जिन क्षेत्रों तक यह नहीं पहुँच सकता, वहाँ इन ऊतकों द्वारा संश्लेषित ट्रांसफ़रिन स्थानीय क्षेत्र में आयरन का स्थानांतरण करता है।
चित्र 1. ट्रांसफ़रिन की संरचना
मानव ट्रांसफ़रिन मुख्य रूप से यकृत में संश्लेषित होता है। यह एक एकल-श्रृंखला ग्लाइकोप्रोटीन है जो समजातीय N-टर्मिनस और C-टर्मिनस पर स्थित दो लोबों से बना होता है। मानव ट्रांसफ़रिन में 678 अमीनो एसिड अवशेष, 5.9 का आइसोइलेक्ट्रिक बिंदु और 76kD का आणविक भार होता है। ट्रांसफ़रिन का प्रत्येक अणु 2 त्रिसंयोजक लौह आयन (Fe) ले जा सकता है3+) ट्रांसफ़रिन और Fe के बीच परस्पर क्रिया3+ pH पर निर्भर करता है। pH 7.4 पर, ट्रांसफ़रिन और Fe3+ कुशलतापूर्वक बंधते हैं, और अम्लीय pH पर दोनों अलग हो जाते हैं।
अस्तित्व
होलो-ट्रांसफरिन 、आंशिक रूप से संतृप्त ट्रांसफरिन、एपो-ट्रांसफरिन
कार्यात्मक तंत्र
ट्रांसफ़रिन (Tf) अपने रिसेप्टर, ट्रांसफ़रिन रिसेप्टर 1 (TfR1) के साथ बातचीत करके आयरन को बांधता है। TfR1 एक ग्लाइकोप्रोटीन है जो कोशिका की सतह पर व्यक्त होता है, जो डाइसल्फ़ाइड बॉन्ड द्वारा जुड़े दो होमोडिमेरिक सबयूनिट्स से बना होता है। कोशिका की सतह पर, Tf Fe3+ के साथ बातचीत करके होलो-Tf बनाता है, और TfR1 रिसेप्टर से बंधता है, एंडोसाइटोसिस के तहत एंडोसोम में प्रवेश करता है। अम्लीय एंडोसोम वातावरण में, Fe3+ Tf से अलग हो जाता है, और STEAP3 Fe3+ को Fe2+ में कम कर देता है, जिसे द्विसंयोजक धातु आयन ट्रांसपोर्टर 1 (DMT1) द्वारा कोशिका द्रव्य में ले जाया जाता है। फिर, Fe3+ को छोड़ने वाला Tf, TfR1 के साथ एक Tf/TfR1 कॉम्प्लेक्स बनाता है और एक्सोसाइटोसिस के माध्यम से कोशिका की सतह पर वापस चला जाता है। कोशिका की सतह पर, ट्रांसफ़रिन (Tf) रिसेप्टर TfR1 से अलग होकर एपो-Tf बन जाता है, और फिर आयरन चक्र में भाग लेने के लिए Fe3+ के साथ फिर से जुड़ जाता है। पूरी प्रक्रिया पूरी होने के बाद, Tf और TfR1 को रीसाइकिल किया जाता है और सेलुलर आयरन अपटेक के अगले चक्र में प्रवेश किया जाता है।
चित्र 2. ट्रांसफ़रिन चक्र का तंत्र आरेख[1]
ट्रांसफ़रिन का मुख्य कार्य
- मुक्त कणों की उत्पत्ति से बचें और कोशिका वृद्धि की रक्षा करें।
- जीवाणुरोधी, जीवाणुनाशक, विषहरण
- कोशिका प्रसार और वृद्धि को बनाए रखें
- बाह्यकोशिकीय लौह भंडारण और परिवहन को बढ़ावा देता है
ट्रांसफ़रिन के स्रोत
| स्रोत | सुरक्षा | बैच अंतर | |
| प्राकृतिक रूप से निकाला गया ट्रांसफ़रिन | मानव और गोजातीय प्लाज्मा से निकाला गया अर्क | खराब सुरक्षा, अंतिम उत्पाद में रोगाणु हो सकते हैं | ट्रांसफ़रिन को मानव सीरम या गोजातीय सीरम के विभिन्न बैचों से निकाला जाता है, और इसका प्रदर्शन बहुत भिन्न होता है |
| पुनः संयोजक ट्रांसफ़रिन | प्रोकैरियोटिक और यूकेरियोटिक कोशिकाओं से व्यक्त | अच्छी सुरक्षा, अंतिम उत्पाद में रोगाणु नहीं होते | प्रत्येक बैच को स्थिर प्रदर्शन के साथ एक ही सेल लाइन का उपयोग करके व्यक्त किया जाता है |
उत्पाद की विशेषताएँ
अच्छी सुरक्षा: उत्पाद ने गुणवत्ता निरीक्षण और परीक्षण की कई परतों को पार कर लिया है, जिससे रोगजनकों द्वारा संदूषण से बचा जा सके;
कम विषाक्तता: साइटोटॉक्सिसिटी बहुत कम है और इसका बाद के प्रयोगों पर कोई प्रभाव नहीं पड़ता है;
स्थिर प्रदर्शन: प्रत्येक बैच को एक ही सेल लाइन से व्यक्त किया जाता है, जिसमें न्यूनतम प्रदर्शन अंतर और उच्च प्रोटीन शुद्धता होती है
संचालित करने में आसान: बस उत्पाद को आधार में जोड़ें;
व्यापक रूप से लागू: इसका उपयोग विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं के विकास के लिए किया जा सकता है।
सामान्य प्रश्न
प्रश्न 1: क्या सीरम-मुक्त संवर्धन माध्यम में निकाले गए ट्रांसफ़रिन या पुनः संयोजक ट्रांसफ़रिन को मिलाया जाना चाहिए?
उत्तर: निकाले गए ट्रांसफ़रिन में खराब सुरक्षा और बैच-दर-बैच बड़े अंतर जैसे दोष हैं। विशेष रूप से, जब निकाले गए ट्रांसफ़रिन को सेल कल्चर के लिए सीरम-मुक्त कल्चर माध्यम में जोड़ा जाता है, तो यह मानव या पशु रोगजनकों (जैसे पागल गाय रोग वायरस, क्रेउत्ज़फ़ेल्ट-जैकब वायरस और अन्य अज्ञात रोगजनकों) को कोशिकाओं में ला सकता है और कोशिकाओं को दूषित कर सकता है। पुनः संयोजक ट्रांसफ़रिन रोगजनक संदूषण की संभावना को पूरी तरह से टालता है, इसलिए पुनः संयोजक ट्रांसफ़रिन को सीरम-मुक्त कल्चर माध्यम में जोड़ा जाना चाहिए।
प्रश्न 2: क्या संवर्धन माध्यम में लौह-संतृप्त (होलो) ट्रांसफ़रिन या एपो (एपो) ट्रांसफ़रिन मिलाया जाना चाहिए?
उत्तर: जब संवर्धन माध्यम में लौह नहीं होता है या लौह तत्व कम होता है, तो लौह-संतृप्त (होलो) ट्रांसफ़रिन मिलाएं; जब संवर्धन माध्यम में लौह तत्व प्रचुर मात्रा में होता है, तो एपो ट्रांसफ़रिन मिलाएं।
प्रश्न 3: कौन सा बेहतर है, लौह-संतृप्त (होलो) ट्रांसफ़रिन या एपो (एपो) ट्रांसफ़रिन?
उत्तर: सैद्धांतिक रूप से दोनों के प्रभाव का अनुमान लगाना असंभव है, तथा प्रायोगिक परीक्षण की आवश्यकता है।
प्रश्न 4: सीरम मुक्त संवर्धन माध्यम में ट्रांसफ़रिन की सांद्रता कितनी है?
उत्तर: ट्रांसफ़रिन की सांद्रता कोशिका के प्रकार से संबंधित है। विशिष्ट सांद्रता कोशिका की स्थिति, कोशिका की सांद्रता और प्रयोगात्मक उद्देश्य से संबंधित है।सामान्य प्राथमिक कोशिकाएं: 5-100 mg/L; चीनी हैम्स्टर अंडाशय कोशिकाएं: 10-50 mg/L; हाइब्रिडोमा और वेरो कोशिकाएं: 5-20 mg/L
आदेश की जानकारी
| प्रोडक्ट का नाम | उत्पाद संख्या | विनिर्देश |
| 40102ईएस60/80 | 100 एमजी | |
| बोवाइन ट्रांसफ़रिन (HOLO) | 40103ईएस60/80 | 100 मिलीग्राम/1 ग्राम |
| मानव ट्रांसफ़रिन (मानव प्लाज्मा से व्युत्पन्न) | 40133ईएस60/76/80 | 100 मिलीग्राम/500 मिलीग्राम/1 ग्राम |
| 92288ES60/76/80 | 100 मिलीग्राम/500 मिलीग्राम/1 ग्राम | |
| 92289ES60/76/80 | 100 मिलीग्राम/5 |