Apa itu antibodi sekunder?
Antibodi sekunder adalah antibodi yang dapat mengikat antibodi primer. Antibodi ini terutama digunakan untuk mendeteksi keberadaan antibodi primer. Antibodi primer secara spesifik mengikat antigen, dan antibodi sekunder secara spesifik mengikat antibodi primer. Dengan kata lain, daerah Fc atau fragmen Fab dari antibodi primer dapat bertindak sebagai antigen untuk merangsang tubuh memproduksi antibodi. Dengan kata lain, antibodi primer sebagian besar adalah imunoglobulin kelas IgG, sehingga antibodi sekunder adalah antibodi anti-IgG.
Peran antibodi sekunder
Antibodi primer mengikat secara spesifik ke protein target, dan antibodi primer perlu diberi label dengan zat berpendar atau gugus kromogenik. Tidak mungkin untuk melihat dengan mata telanjang apakah antibodi primer mengikat protein. Akan tetapi, antibodi primer relatif spesifik, dan masing-masing diberi label dengan biaya yang mahal. Umumnya, antibodi sekunder berlabel digunakan untuk mengikat antibodi primer dan memiliki label yang dapat dideteksi (seperti kelompok fluoresens, radioaktif, kemiluminesens, atau kromogenik). Jadi, desain saat ini umumnya memiliki antibodi sekunder dengan label yang dapat dideteksi untuk mendeteksi antibodi primer, sementara antibodi primer mengenali substrat. Dengan cara ini, ketika antibodi primer mengikat substrat, antibodi tersebut dapat dideteksi melalui antibodi sekunder.
Misalnya, prinsip pendaran ECL: Di substrat ECL, terdapat H2HAI2 dan luminol (dan turunannya), yang memancarkan fluoresensi di bawah aksi HRP (horseradish peroxidase).
Poin-poin penting dalam penggunaan antibodi sekunder
Antibodi sekunder adalah antibodi yang dihasilkan dengan mengimunisasi mamalia (biasanya mengimunisasi kambing, kuda, keledai, bagal, dan marmut, dll.) dengan imunoglobulin IgG dari subtipe tertentu dari spesies antibodi primer (seperti kelinci, tikus), sehingga antibodi sekunder hanya mengikat spesies dan subtipe tertentu dari antibodi primer. Misalnya, antibodi domba anti-tikus (antibodi sekunder) akan secara khusus mengikat antibodi monoklonal tikus (antibodi primer) dan tidak akan mengikat antibodi poliklonal kelinci atau antibodi monoklonal tikus.
Tanda-tanda kopling antibodi sekunder
Metode eksperimen yang berbeda akan menghasilkan kelompok penggandeng yang berbeda untuk antibodi sekunder, yang utamanya adalah enzim (horseradish peroxidase/HRP dan alkaline phosphatase/AP), kelompok fluoresen (FITC, Rhodamine, PE, Dylight, Alexa Fluor, cy3, dll.), biotin, partikel emas, dll. Umumnya, antibodi sekunder berlabel HRP direkomendasikan untuk eksperimen seperti WB, ELISA, IHC, dan antibodi sekunder berlabel biotin direkomendasikan untuk IHC, sedangkan label fluoresen seperti Alexa Fluor 488, FITC, PE digunakan untuk IF, FC, dll.
Cara memilih antibodi sekunder yang tepat
a. Imunoblotting (WB)
Pilih antibodi sekunder yang berlabel peroksidase lobak atau alkali fosfatase untuk Western blotting tradisional; pilih antibodi sekunder yang berlabel fluorofor yang sesuai untuk Western blotting fluoresen.
b. Imunohistokimia (IHC/ICC)
B.Untuk ICC (Imunositokimia), pilih antibodi sekunder yang diberi label Biotin.
C. Imunofluoresensi (IHF/ICF)
Imunopresipitasi sering kali memungkinkan pilihan penggunaan antibodi sekunder yang spesifik terhadap Fc atau Fab. Antibodi sekunder tersebut dapat menghindari gangguan dari rantai berat (berat molekul 55 kDa) atau rantai ringan (berat molekul 25 kDa).
Informasi Produk yang Direkomendasikan
| Grup Label | Nomor Produk | Nama Produk |
| Tidak bertanda | 34850ES | Kambing Anti-Kelinci lgG(H+L) |
| 34851ES | Kambing Anti-Mosue lgG(H+L) | |
| 34847ES | Keledai Anti-Manusia IgG(H+L) | |
| SDM | 33101ES | Peroksidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) |
| 33201ES | Peroksidase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33301ES | Peroksidase AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) | |
| 33401ES | Peroksidase AffiniPure Kambing Anti-Marmut IgG(H+L) | |
| 33501ES | Horseradish Peroxidase Goat Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33701ES | Peroksidase AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) | |
| 33801ES | Peroksidase AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) | |
| 34201ES | Peroksidase AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) | |
| 34101ES | Peroksidase AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 34301ES | Peroksidase AffiniPure Keledai Anti-Kambing IgG (H+L) | |
| 33101ES | Peroksidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | |
| Fluoresensi Hijau | 33106ES | YSFluor™ 488 Kambing Anti-Kelinci IgG (H+L) |
| 33126ES | YSFluor™ 488 Kambing Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33206ES | YSFluor™488 Kambing Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 33306ES | YSFluor™ 488 Antibodi IgG Sapi (H+L) | |
| 33406ES | YSFluor™ 488 IgG Anti-Kebab Guinea Kambing (H+L) | |
| 33706ES | YSFluor™488 Anti-Kambing IgG Kelinci (H+L) | |
| 33906ES | YSFluor™ 488 Anti-Tikus IgG Kelinci (H+L) | |
| 34906ES | YSFluor™488 Keledai Anti-Domba IgG (H+L) | |
| 34106ES | YSFluor™488 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34206ES | YSFluor™488 Keledai Anti-Kelinci IgG (H+L) | |
| 34306ES | YSFluor™ 488 Keledai Anti-Kambing IgG (H+L) | |
| 34406ES | YSFluor™ 488 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34506ES | YSFluor™488 Keledai Anti-Marmut IgG (H+L) | |
| 34606ES | YSFluor™488 Keledai Anti-Ayam IgG (H+L) | |
| 34706ES | YSFluor™488 Kelinci Anti-Ayam IgY(H+L) | |
| 34806ES | YSFluor™488 Keledai Anti-IgG Manusia (H+L) | |
| 34856ES | FITC AffiniPure Goat Anti-Human IgG(H+L) | |
| 33107ES | FITC-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) | |
| 33207ES | FITC-AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33307ES | FITC-AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) | |
| 33707ES | FITC-AffiniPure Anti-Kambing IgG Kelinci (H+L) | |
| 33807ES | FITC-AffiniPure Anti-Domba IgG Kelinci (H+L) | |
| Rhodamin | 33109ES | Rhodamin (TRITC) Kambing Anti-Kelinci IgG (H+L) |
| 33209ES | Rhodamin (TRITC) Kambing Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 33709ES | Rhodamin (TRITC) AffiniPure Anti-Kambing IgG Kelinci (H+L) | |
| 33210ES | Rhodamin Merah-X (RRX) Kambing Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| Fluoresensi Jingga | 33112ES | YSFluor™594 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) |
| 33212ES | YSFluor™ 594 Kambing Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 33222ES | YSFluor™ 594 Kambing Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33412ES | YSFluor™594 IgG Anti-Guinea Pig Kambing (H+L) | |
| 33312ES | YSFluor™ 594 Antibodi IgG Kambing dan Sapi (H+L) | |
| 33712ES | YSFluor™594 Anti-Kambing IgG Kelinci (H+L) | |
| 33812ES | YSFluor™ 594 Anti-Domba IgG Kelinci (H+L) | |
| 33912ES | YSFluor™594 Anti-Tikus IgG Kelinci (H+L) | |
| 34712ES | YSFluor™594 Kelinci Anti-Ayam IgY (H+L) | |
| 34112ES | YSFluor™ 594 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34212ES | YSFluor™594 Keledai Anti-Kelinci IgG (H+L) | |
| 34312ES | YSFluor™ 594 Keledai Anti-Kambing IgG (H+L) | |
| 34412ES | YSFluor™ 594 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34512ES | YSFluor™594 Keledai Anti-Marmut IgG (H+L) | |
| 34612ES | YSFluor™594 Keledai Anti-Ayam IgG (H+L) | |
| 34812ES | YSFluor™594 Keledai Anti-IgG Manusia (H+L) | |
| 34912ES | YSFluor™594 Keledai Anti-Domba IgG (H+L) | |
| 33208ES | Cy3-AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) | |
| 33308ES | Cy3-AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) | |
| 33708ES | Cy3-AffiniPure Anti-IgG Kelinci Kambing (H+L) | |
| 33808ES | Cy3-AffiniPure Anti-Domba IgG Kelinci (H+L) | |
| 34855ES | Cy3-AffiniPure Keledai Anti-Kambing IgG(H+L) | |
| Fluoresensi Merah | 33113ES | YSFluor™647 Kambing Anti-Kelinci IgG (H+L) |
| 33213ES | YSFluor™ 647 Kambing Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 33223ES | YSFluor™647 Kambing Anti-Human IgG (H+L) | |
| 33313ES | YSFluor™ 647 Kambing Anti-Sapi IgG (H+L) | |
| 33413ES | YSFluor™ 647 IgG Anti-Kebab Guinea Kambing (H+L) | |
| 33713ES | YSFluor™ 647 Anti-Kambing IgG Kelinci (H+L) | |
| 33813ES | YSFluor™647 Anti-Domba IgG Kelinci (H+L) | |
| 33913ES | YSFluor™ 647 Anti-Tikus IgG Kelinci (H+L) | |
| 34713ES | YSFluor™647 Kelinci Anti-Ayam IgY (H+L) | |
| 34113ES | YSFluor™ 647 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34213ES | YSFluor™ 647 Donkey Anti-Kelinci IgG (H+L) | |
| 34413ES | YSFluor™ 647 Keledai Anti-Tikus IgG (H+L) | |
| 34813ES | YSFluor™647 Keledai Anti-IgG Manusia (H+L) | |
| 34913ES | YSFluor™647 Keledai Anti-Domba IgG (H+L) |
Referensi
[1]Zhang B, Wang H, Liao Z, dkk.Nanopartikel terkonjugasi EGFP–EGF1 untuk menargetkan sel neovaskular dan glioma dalam terapi glioma otak[J]. Biomaterials, 2014, 35(13): 4133-4145. IF: 8.387[2]Yu X, Wang J, Liu J, dkk. Nanoagen berbasis peptida Pepstatin A multimodal untuk pencitraan molekuler glikoprotein P di otak tikus epilepsi[J]. Biomaterial, 2016, 76: 173-186. JIKA:8.402
[3]Liu J, He Y, Zhang J, dkk. Nanocarrier fungsional menggabungkan vektor spesifik kejang dengan properti modulasi glikoprotein P untuk pengiriman obat antiepilepsi[J]. Biomaterial, 2016, 74: 64-76. IF:8.402
[4]Ma Y, Ji Y, You M, dkk. Pelabelan dan pelacakan jangka panjang sel punca mesenkimal sumsum tulang secara in vitro menggunakan nanopartikel konversi NaYF 4: Yb 3+, Er 3+[J]. Acta biomaterialia, 2016, 42: 199-208. IF: 6.638
[5]Wang Y, Lin YX, Qiao SL, dkk. Nanopartikel polimer memungkinkan pembalikan makrofag dalam lingkungan mikro tumor untuk imunoterapi[J]. Biomaterial, 2017, 112(15): 3e163. IF:8.806
[6] Liu C, He X, Liu W, et al. Mutasi Bi-allelic pada TTC29 Menyebabkan Subfertilitas Pria dengan Asthenoteratospermia pada Manusia dan Tikus[J]. Jurnal Genetika Manusia Amerika, 2019, 105(6): 1168-1181.34106ES60 JIKA:9.924
[7]Xu T, Ding W, Ao X, dkk. ARC mengatur nekrosis terprogram dan cedera iskemia/reperfusi miokard melalui penghambatan pembukaan mPTP[J]. Biologi redoks, 2019, 20: 414-426.IF（7.126）（Alexa Fluor 488）
[8] Tan T, Wang Y, Wang J, dkk. Penargetan lipoprotein biomimetik yang dihiasi peptida meningkatkan penetrasi dalam dan aksesibilitas sel kanker pada tumor padat. Acta Pharm Sin B. 2020;10(3):529-545. Alexa Fluor 488 berlabel IgG (H+L)IF: 7.097
[9] Photoclick Hydrogel untuk Peningkatan Imunoblotting Sel Tunggal[J]. Bahan Fungsional Lanjutan, 2020, 30.33112ES60 JIKA: 16.836
[10] Bingcheng Yi a,b,1, Lei Yuc,1, Han Tanga, dkk. Lapisan polidopamin yang didoping lisin ditingkatkan antitrombogenisitas dan endotelisasi pembuluh darah fifibrosa yang disejajarkan secara elektrospun cangkok.. Applied Materials Today,2021. 33207ES60 JIKA:10.041