Pengenalan Produk

Kolagenase adalah kelas endonuklease yang secara khusus dapat mengenali urutan Pro-X-Gly-Pro (yang sering terjadi pada kolagen dan jarang ditemukan pada protein lain), dan membelah ikatan peptida antara asam amino netral (X) dan glisin (Gly) dalam urutan ini, dan dapat menghidrolisis kolagen dalam jaringan ikat.

Banyak protease yang mampu menghidrolisis peptida kolagen untai tunggal dan terdenaturasi, tetapi kolagenase adalah satu-satunya protease yang dapat mendegradasi serat kolagen alami dengan struktur superkoil tiga untai, dan banyak ditemukan dalam jaringan ikat, yang paling ampuh adalah kolagenase "kasar" yang disekresikan oleh bakteri anaerob Clostridium histolyticum.

Yeasen Kolagenase berasal dari Clostridium histolyticum, yang merupakan enzim ekstrak "kasar", yang tidak hanya mengandung kolagenase yang dapat mendegradasi kolagen alami dan serat retikuler, tetapi juga mengandung beberapa protease lain seperti polisakarida, lipase, dll., yang secara efektif dapat menghidrolisis protein lain, polisakarida dan lipid dalam matriks ekstraseluler jaringan ikat dan jaringan epitel, sehingga lebih cocok untuk pencernaan jaringan.

Saat ini, kolagenase bakteri di pasaran terutama dibagi menjadi lima jenis menurut perbedaan aktivitas kolagenase: kolagenase tipe I, tipe II, tipe III, tipe IV dan tipe V.

Pemilihan kolagenase

Nama Produk	Penampilan	Aktivitas enzim	Ruang lingkup aplikasi
Tipe I Kolagenase）	Bubuk kristal berwarna coklat atau coklat kekuningan	≥250 U/mg padat	Mengandung aktivitas (kolagenase, kaseinase, klostridia, dan tripsin) untuk isolasi sel jaringan epitel, paru-paru, lemak, dan adrenal.
Tipe II Kolagenase）	Bubuk kristal berwarna coklat atau coklat kekuningan	≥125 U/mg padat	Mengandung aktivitas clostridase yang lebih tinggi dan cocok untuk isolasi sel jaringan hati, tulang, tiroid, jantung dan kelenjar ludah.
Tipe III Kolagenase）	Bubuk kristal berwarna coklat atau coklat kekuningan	≥100 U/mg padat	Mengandung aktivitas proteolitik rendah, efektif untuk bagian sambungan jaringan pencernaan, dan sering digunakan untuk disosiasi sel jaringan mamalia.
Tipe IV Kolagenase）	Bubuk kristal berwarna coklat atau coklat kekuningan	≥125 CDU/mg padat*	Mengandung aktivitas tripsin rendah dan umumnya digunakan dalam persiapan sel untuk integritas pulau dan reseptor
Tipe V Kolagenase）	Bubuk kristal berwarna coklat atau coklat kekuningan	≥125 CDU/mg padat*	Mengandung setidaknya 7 komponen protease, yang dapat digunakan untuk isolasi jaringan pulau pankreas dan pemisahan jaringan ikat menjadi sel tunggal

*CDU = unit pencernaan kolagen

Fitur Produk

1. Efisiensi pencernaan tinggi: ekstrak enzim kasar Clostridium histolyticum memiliki efisiensi pencernaan tinggi untuk jaringan.
2. Tergantung pada aktivator: kolagenase perlu bergantung pada aktivitas enzim pengaktif seperti kation divalen seperti Ca²⁺dan Zn²⁺.
3. Dipengaruhi oleh inhibitor: inhibitor kolagenase antara lain EDTA, EGTA, dll; yang kedua adalah ion logam berat (Hg²⁺, Timbal²⁺, CD²⁺); Ada juga beberapa agen kimia seperti Sistein, histidin, DTT, 2-merkaptoetanol, o-fenantrolin, dll., yang juga memiliki efek penghambatan pada kolagenase.
4. Ketahanan terhadap interferensi yang kuat: kolagen tidak akan terpengaruh oleh serum yang digunakan untuk membudidayakan sel.

Tindakan pencegahan untuk penggunaan

1. Cara penggunaan: Larutkan dalam larutan garam Hank, Earle atau larutan garam seimbang lainnya, konsentrasi kerja yang disarankan adalah 0,05% ~ 0,5% (b / v)
2. Suhu penyimpanan: 2-8°C
3. Saran penggunaan:

(1) Untuk mempelajari struktur dan biosintesis kolagen, preparat kolagenase dengan kemurnian lebih tinggi sering digunakan, dan tidak ada aktivitas proteolitik lain yang digunakan.

(2) Untuk disosiasi jaringan, preparat kolagenase kasar, seperti elastase, tripsin atau papain, sering digunakan.

Tanya Jawab Umum

1. Pencernaan yang buruk selama percobaan

(1) Jika disebabkan oleh aktivitas enzim yang lemah atau ion kalsium yang tidak mencukupi, kolagenase harus disimpan dalam suhu rendah dan kondisi kering, dan larutan kolagenase harus dibekukan setelah dialiquote.

(2) Jika disebabkan oleh kekurangan ion kalsium, konsentrasi ion kalsium dalam larutan kolagenase harus 5mM

2. Kematian sel terjadi selama penggunaan

(1) Jika terdapat kelebihan protease, waktu kontak protease harus dikurangi atau ditambahkan albumin atau serum inaktif.

(2) Jika pH berubah, buffer (misalnya HBSS) harus digunakan; Periksa dan sesuaikan kembali pH Anda secara berkala

(3) Jika oksigen terlalu sedikit, larutan pencernaan harus diberi ventilasi dengan udara steril

3. Sel-sel rusak selama percobaan

Jika disebabkan oleh terlalu banyak protease, jumlah protease harus dikurangi atau ditambahkan albumin atau serum yang diinaktif.

Pemesanan

Nomor katalog	Nama Produk	Ukuran
40507ES60	Kolagenase I	100 mg, 1 gram
40508ES60	Kolagenase II	100 mg, 1 gram
40509ES60	Kolagenase III	100 mg
40510ES60	Kolagenase IV	100 mg, 1 gram
40511ES60	Kolagenase V	100 mg

Rekomendasi produk terkait

Nomor katalog	Nama Produk	Ukuran
40123ES60	PerfCel™l Tripsin-EDTA (0,25%), Fenol merah	100 ml air
40124ES60	PerfCell™ Trypsin-tanpa EDTA (0.25%), tanpa fenol merah	100 ml air
40126ES60	PerfCell™ Tripsin (0,25%), fenol merah	100 ml air
40127ES60	PerfCell™ Trypsin-EDTA (0,25%), Fenol merah	100 ml air
40101ES25	Tripsin 1:250 (bubuk)	25 gram
40512ES10/60	PerfCell™ Tripsin Rekombinan (serbuk)	10mg/100mg dosis tunggal
nomor 20416ES60	Tripsin Rekombinan (MS-SAFE)	100 µg
40134ES60	PerfCell Tryzyme™Ekspres	100 ml air
40135ES60	PerfCell Tryzyme™Ekspres	100 ml air
40506ES60	MENUNTUT	100 ml air
40104ES60/80	Buang II	100mg/1 gram