Kloning molekuler digunakan di hampir setiap laboratorium. Enzim endonuklease restriksi merupakan komponen penting dalam percobaan kloning molekuler, tetapi orang-orang juga sering terganggu oleh berbagai masalah dengan percobaan enzim endonuklease restriksi. Masalah umum adalah sebagai berikut:

• Ada begitu banyak jenis endonuklease restriksi, sulit untuk memilih.
• Pembelahan yang salah, pembelahan acak, atau pembelahan enzimatik yang tidak lengkap.
• Kecepatan pencernaannya lambat; mungkin memerlukan waktu satu jam atau bahkan semalaman.
• Selain itu, percobaan pencernaan enzim ganda juga perlu memilih berbagai enzim pencernaan bTo

Untuk membuktikan kepada Anda pemahaman yang lebih mendalam tentang endonuklease restriksi, berikut ini akan menjelaskan secara singkat apa itu endonuklease restriksi dan bagaimana berbagai endonuklease diklasifikasikan sebagai jawaban atas pertanyaan pertama. Yeasen Seri FuniCut™ dari Fast Restriction Endonucleases dapat dengan mudah mengatasi masalah kedua hingga keempat melalui modulasi regangan dan prosedur yang lebih baik!

1. Apa itu Restriksi Endonuklease?
2. Pembatasan tata nama endonuklease
3. Pembatasan klasifikasi endonuklease
4. Yeasen Endonuklease Restriksi Cepat FuniCut™

1. Apa itu Restriksi Endonuklease?

Endonuklease restriksi merupakan golongan enzim yang dapat mengenali urutan nukleotida spesifik pada molekul DNA beruntai ganda dan memutus hubungan fosfodiester pada rantai DNA pada lokasi tertentu.

Endonuklease restriksi yang berbeda akan mengenali sekuens DNA yang berbeda. Mereka dapat memotong DNA di dalam sekuens pengenalan atau di tempat yang tidak jauh dari sekuens pengenalan, sehingga menghasilkan berbagai produk, seperti yang diilustrasikan dalam Gambar 1. BamHI membentuk ujung lengket, KpnI membentuk ujung lengket 3', dan EcoRV membentuk ujung tumpul.

Gambar 1. Diagram skema pencernaan BamHI, KpnI, EcoRV

2. Pembatasan tata nama endonuklease

Nama genus, nama spesies, strain bakteri atau serotipe, dan urutan penemuan merupakan faktor utama yang digunakan untuk memberi nama endonuklease restriksi. Pedoman pemberian nama ditampilkan dalam Tabel 1 di bawah ini dengan menggunakan BstEII sebagai contoh:

Tabel 1. Pembatasan nomenklatur endonuklease

3.Pembatasan klasifikasi endonuklease

Berdasarkan kompleksitas struktur, cara kerja, dan perbedaan antara kofaktor, enzim restriksi dapat dibagi menjadi empat kategori. Tabel 2 berikut merangkum karakteristik dan enzim khas dari setiap kategori.

Tabel 2. Variasi di antara beberapa endonuklease restriksi

Seperti yang ditunjukkan dalam Tabel 3 di bawah, ia juga dapat dibagi menjadi tiga kelompok berdasarkan persamaan dan perbedaan antara tempat pengenalan dan pencernaan.

Tabel 3.Analisis perbandingan Isoskizomer, Neoskizomer, dan Isokauderner

Mengingat beberapa endonuklease restriksi di pasaran masih memerlukan pencernaan semalam, dan produknya rentan terhadap pencernaan yang salah, Yeasen Nuklease Endoa Restriksi Cepat, penyangga universal, pencernaan lengkap dan akurat dalam 5 menit, sehingga eksperimen pencernaan Anda tidak mengalami masalah lagi！

4. Yeasen FuniCut™ Endonuklease Restriksi Cepat