Teknologi amplifikasi asam nukleat isotermal dapat dibagi menjadi beberapa kategori menurut prinsip amplifikasi yang berbeda. Saat ini, yang paling umum dan banyak digunakan adalah teknologi amplifikasi isotermal loop-mediated (LAMP) yang dikembangkan oleh sarjana Jepang Notomi dkk. pada tahun 2000. DNA polimerase Bst merupakan enzim inti dari teknologi amplifikasi isotermal. Apa fungsi dan kinerja DNA polimerase Bst dalam LAMP?

1. Bagaimana peran DNA polimerase Bst dalam LAMP?
2. Apa itu Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase?
3. Apa saja fitur produknya? Dikeringkan secara beku Terbaik Plus DNA Polimerase (14405ES)....
4. Apa kinerja produk Lyophilized Terbaik Plus DNA Polimerase(14405ES)?
5. Produk terkait
6. Mengenai membaca

1. Bagaimana peran DNA polimerase Bst dalam LAMP?

Fitur teknis LAMP adalah merancang empat primer untuk enam wilayah gen target dan melakukan reaksi amplifikasi menggunakan DNA polimerase BST dalam kondisi suhu konstan 60~65 ℃, mencapai 109-1010 kali amplifikasi dalam waktu 15-60 menit. DNA polimerase Bst memiliki stabilitas termal yang kuat, aktivitas perpindahan untai, dan aktivitas polimerase. Ini dapat menjadi templat amplifikasi yang cepat, efisien, dan spesifik dalam kondisi suhu konstan tanpa siklus amplifikasi denaturasi termal PCR, dan menyelesaikan seluruh eksperimen LAMP dalam waktu 1 jam.

2. Apa itu Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase?

DNA Polimerase Bst Plus yang diliofilisasi digunakan untuk membekukan DNA Polimerase Bst Plus yang bebas gliserol, yang memecahkan masalah ketidakstabilan enzim Bst yang bebas gliserol. Pada saat yang sama, produk ini memiliki aktivitas DNA polimerase 5'-3' yang kuat, aktivitas perpindahan untai, dan toleransi dUTP, yang lebih cocok untuk reaksi amplifikasi isotermal anti-polusi. Produk ini mudah digunakan oleh pelanggan dalam produksi produk kering beku.

Gambar 1: 14405ES-Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (60 U/μL, Bebas Gliserol)

3. Apa saja fitur produk Lyophilized? Terbaik Plus DNA Polimerase(14405ES)?

• Enzim bebas gliserol, cocok untuk liofilisasi
• Transportasi pada suhu normal untuk mengurangi biaya
• Aktivitas perpindahan untai yang kuat, sensitif dan stabil
• Pembubaran ulang yang cepat dan pengoperasian yang mudah

4. Apa kinerja produk Lyophilized Terbaik Plus DNA Polimerase(14405ES)?

4.1 Bentuk bubuk kering beku: dibandingkan dengan momen T0, bentuk bubuk tetap tidak berubah setelah pengeringan beku 45 ℃ - 15 HARI.

Gambar 2. Bentuk bubuk kering beku

4.2 stabilitas

Kinerja bubuk kering beku setelah percepatan termal masih dapat konsisten dengan reagen cair, dan bubuk kering beku (14405ES) adalah
universal dan dapat digunakan untuk metode pewarna fluoresensi dan metode indikator pH.

4.2.1 Metode pewarna fluoresensi——stabilitas

Dalam sistem amplifikasi pewarna fluoresensi RT-LAMP, kinerja bubuk beku-kering Bst bebas gliserol setelah T0, 45℃-7 hari dan 45℃-15 hari percepatan termal konsisten dengan versi cair enzim Bst bebas gliserol, dan NTC tidak mencapai puncaknya.

Kondisi percobaan:

Catatan: Kelompok kontrol adalah versi cair tanpa enzim Bst gliserol dengan konsentrasi yang sama.

Gambar 3. Hasil stabilitas

4.2.2 Metode pewarna fluoresensi——Kinerja enzim Bst setelah pengeringan beku sistem RT-LAMP

Dalam sistem amplifikasi pewarna fluoresen RT-LAMP, kinerja produk bubuk Bst bebas gliserol yang dikeringkan beku dalam sistem RT-LAMP setelah 45 ℃ - 15 hari konsisten dengan versi cair enzim Bst bebas gliserol. Tingkat deteksi produk dalam kelompok kontrol dan sistem RT-LAMP setelah dikeringkan beku masing-masing adalah 100% (16/16) dan 94% (15/16).

Kondisi percobaan:

Catatan: Kelompok kontrol adalah versi cair tanpa enzim Bst gliserol dengan konsentrasi yang sama.

Gambar 4. Kinerja enzim Bst setelah pengeringan beku sistem RT-LAMP

4.2.3 Metode indikator PH ——Stabilitas

Dalam sistem amplifikasi indikator pH RT-LAMP, dibandingkan dengan waktu T0, tingkat deteksi bubuk beku-kering Bst adalah 88% (7/8) setelah akselerasi termal 45 ℃ - 15 hari.

Kondisi percobaan:

Catatan: Kelompok kontrol adalah versi cair tanpa enzim Bst gliserol dengan konsentrasi yang sama.

Gambar 5. Hasil stabilitas

4.2.4 Metode indikator PH——Stabilitas pembekuan ulang

Dalam sistem amplifikasi indikator pH RT-LAMP, setelah pembekuan ulang pada suhu 45 ℃ - 7 hari, kinerjanya stabil. Kelompok kontrolnya adalah enzim Bst cair. Dibandingkan dengan kelompok kontrol, tingkat deteksi 14405ES setelah percepatan termal adalah 94% (30/32).

Kondisi percobaan:

Catatan: Kelompok kontrol adalah versi cair tanpa enzim Bst gliserol dengan konsentrasi yang sama.

Gambar 6. Hasil stabilitas pembekuan ulang

4.3 Spesifisitas

Dalam sistem amplifikasi pewarna fluoresensi RT-LAMP, NTC 48 sumur tidak mencapai puncak, dan spesifisitas 14405ES adalah 100%.

Kondisi percobaan:

Catatan: Kelompok kontrol adalah versi cair tanpa enzim Bst gliserol dengan konsentrasi yang sama.

Gambar 7. Hasil spesifik

5. Produk terkait

Produk terkait yang Yeasen dapat disediakan ditunjukkan pada Tabel 1.

Tabel 1.Produk Terkait

6. Mengenai membaca

Memilih bahan baku enzim kunci yang tepat untuk membuat LAMP/RT-LAMP lebih sensitif dan cepat!

Pedoman Seleksi Transkriptase Terbalik

Yeasen UDG: “Ahlinya anti-fouling” dalam reaksi PCR