Inti dari kuantifikasi pustaka NGS adalah kuantifikasi asam nukleat (DNA atau RNA). Analisis akurat kuantifikasi pustaka NGS sangat penting untuk mendapatkan data sekuensing berkualitas tinggi. Jika konsentrasi kuantitatif pustaka NGS tinggi, hasil data sekuensing mungkin rendah karena pengelompokan yang tidak memadai. Namun, konsentrasi kuantitatif yang rendah dapat menyebabkan interferensi sinyal antara kluster untuk menghasilkan data berkualitas rendah, dan bahkan menyebabkan kegagalan sekuensing. Selain itu, dengan peningkatan fluks sekuensing sequencer, beberapa pustaka NGS sering digabungkan untuk sekuensing. Menurut persyaratan ukuran data sekuensing, pustaka NGS dengan kuantitas molar yang sesuai dicampur berdasarkan hasil kuantitatif untuk menstabilkan keluaran ukuran setiap data sampel. Oleh karena itu, kuantifikasi pustaka NGS yang akurat sangat penting.

Saat ini, terdapat dua metode utama kuantifikasi pustaka NGS, yaitu metode penyerapan ultraviolet dan metode pewarna fluoresen. NanoDrop merupakan instrumen kuantifikasi DNA yang dirancang berdasarkan prinsip penyerapan ultraviolet; Qubit merupakan instrumen kuantifikasi DNA yang dikembangkan berdasarkan prinsip pewarna fluoresen. Akurasi kuantitatif dan biaya kedua metode ini berbeda. Metode qubit terutama direkomendasikan di sini. Jadi, mengapa kami merekomendasikan qubit kepada Anda? Apa saja karakteristik produk Qubit yang dipasok oleh YeasenSilakan terus membaca...

1. Mengapa kami merekomendasikan Qubit kepada Anda?

2. Apa saja karakteristik produk Qubit yang disediakan oleh Yeasen....

• Bagaimana cara kerja Qubit?
• Produk populer yang disediakan oleh Yeasen
• Fitur Produk

3. Bagaimana cara memilih Qubit untuk sampel yang berbeda?

1. Mengapa kami merekomendasikan Qubit kepada Anda?

Tidak diragukan lagi bahwa Qubit lebih baik daripada Nanodrop. Jadi mengapa qubit lebih baik daripada nanodrop? Apa perbedaan antara qubit dan nanodrop? Pertama, seperti yang disebutkan sebelumnya, keduanya berbeda dalam prinsip kuantifikasi DNA, NanoDrop dirancang berdasarkan penyerapan ultraviolet. Prinsip metode penyerapan ultraviolet adalah bahwa terdapat basa purin dan pirimidin dalam komponen asam nukleat, dan basa-basa ini memiliki ikatan rangkap konjugat. Terdapat penyerapan cahaya yang kuat pada 250-280nm di wilayah UV, dan nilai penyerapan maksimum sekitar 260nm. Oleh karena itu, penyerapan UV asam nukleat dapat digunakan untuk kuantifikasi konsentrasi. NanoDrop sederhana dan cepat dioperasikan, tetapi tidak dapat membedakan antara DNA, RNA, asam nukleat terdegradasi, nukleotida bebas, dan pengotor lainnya. Tidak cocok untuk memperoleh data kuantitatif perpustakaan yang akurat. Namun, kuantisasi Qubit adalah pilihan terbaik untuk kuantifikasi perpustakaan NGS yang akurat, terutama untuk kuantisasi DNA. Jadi apa saja fitur kuantifikasi DNA qubit? Silakan lihat tabel berikut:

2. Apa saja karakteristik produk Qubit yang disediakan oleh Yeasen....

Sebelum memperkenalkan karakteristik produk Qubit yang disediakan oleh Yeasen, mari kita pahami cara kerjanya.

2.1 Bagaimana cara kerja Qubit?

Prinsip Qubit adalah menggunakan pewarna fluoresensi untuk mengikat molekul DNA guna memancarkan fluoresensi, lalu mengukur intensitas fluoresensi untuk memperoleh konsentrasi asam nukleat. Pewarna fluoresensi berpendar hanya setelah mengikat untai ganda DNA, dan fluoresensi yang dihasilkan sebanding dengan konsentrasi DNA.

2.2 Produk populer yang disediakan oleh Yeasen

Itu Kit Uji HS 1×dsDNA untuk Qubit® (Cat#: 12642ES), dikembangkan berdasarkan Kit Uji dsDNA HS untuk kit Qubit® (Cat#: 12640ES), adalah larutan campuran Qubit siap pakai untuk mengencerkan terlebih dahulu pewarna pekat dalam kit asli menjadi larutan kerja. Saat mengoperasikan, Anda hanya perlu mencampur cairan kerja dengan sampel yang akan diuji untuk menentukan konsentrasi sampel dengan fluorometer Qubit®, yang lebih mudah digunakan.

2.3 Fitur Produk

Sederhana dan mudah dioperasikan: cairan campuran siap pakai, tidak perlu menyiapkan cairan kerja, pengoperasian sederhana, kuantitatif lebih menghemat waktu;

Gambar 1. Proses dsDNA HS Assay Kit untuk Qubit

Sensitivitas sangat tinggi: pengenceran gradien 64x kuantifikasi tepat, 0,2-100 ng dsDNA memiliki hubungan linier yang baik;

Spesifisitas super: Deteksi spesifik dsDNA, memiliki toleransi yang sangat baik terhadap beberapa polutan konvensional;

Kecepatan pengikatan pewarna yang cepat: saturasi dapat dicapai dalam waktu 2 menit, jadi tidak perlu menunggu pembacaan cepat hasil kuantitatif yang akurat;

Stabilitas tinggi: Sinyal fluoresensi bertahan selama 3 jam, dan akurasi kuantitatif tidak terpengaruh setelah 20 hari pada suhu ruangan.

Gambar 1. Uji stabilitas produk. Hasil menunjukkan bahwa produk tetap stabil. stabil setelah disimpan pada suhu ruangan selama 2 minggu (deviasi antara nilai terukur dan nilai teoritis <10%)

Catatan: Dua konsentrasi dsDNA dipilih, dan Thermo#Q33230 disimpan pada suhu 4℃, Yeasen#12642 disimpan pada suhu 4℃, dan Yeasen#12642 yang disimpan pada suhu ruangan (sekitar 25℃) digunakan untuk menentukan nilai konsentrasi pada waktu yang berbeda, dan tingkat deviasi antara setiap pengukuran dan yang pertama (dilambangkan sebagai 0d) dihitung.

Gambar 2. Uji stabilitas produk. Stabilitas super, relevansi hasil uji yang tinggi dalam masa berlaku

3. Bagaimana cara memilih Qubit untuk sampel yang berbeda?

Qubit, kuantifikasi cepat! Penggunaan Qubit untuk kuantifikasi pustaka memiliki banyak keuntungan. Proses deteksinya cepat dan efektif.Hasil sekuensing dapat diperoleh dalam beberapa detik untuk satu sampel dan konsentrasi dapat langsung dikeluarkan, yang sangat intuitif. Pada saat yang sama, alat ini juga dapat kompatibel dengan sebagian besar instrumen label enzim untuk kuantifikasi sampel batch, yang merupakan pilihan pertama untuk kuantifikasi perpustakaan konvensional dan kuantifikasi dsDNA.