HiAkti™ Sitokinin yang Divalidasi dalam Organoid yang Dikultur

Pada tahun 2021, organoid akan dicantumkan sebagai proyek utama dari rencana penelitian dan pengembangan nasional utama "Rencana Lima Tahun ke-14". Organoid sangat diminati, dan cara untuk mendapatkannya juga menjadi fokus perhatian. Organoid yang berbeda memerlukan sitokin yang berbeda selama kultur. Dengan menambahkan sitokin yang mendorong atau menghambat jalur pensinyalan tertentu, sel punca dapat dibuat untuk berdiferensiasi menjadi organoid yang diinginkan. Protokol kultur sitokin paling klasik dalam kultur organoid adalah WNER (masing-masing: Wnt-3a, Noggin, EGF, dan R-Spondin), dan peningkatan atau penurunan kombinasi dari 4 faktor ini dapat diterapkan pada hampir semua eksperimen kultur organoid.

Sitokinin yang umum digunakan dalam kultur organoid

R-Spodin 1

Fungsi: R-Spodin 1 termasuk dalam keluarga regulator Wnt Rspo, yang mencakup 4 anggota, yaitu Rspo1-4. Keluarga ini merupakan faktor lingkungan mikro yang memelihara sel punca dewasa di berbagai organ. RSPO1 merupakan protein aktivator yang disekresikan. Rspo-1 diekspresikan di beberapa daerah sistem saraf pusat yang sedang berkembang dan juga ditemukan di kelenjar adrenal, ovarium, testis, tiroid, dan trakea.

Sebagai aktivator jalur pensinyalan Wnt, Rspo1 berperan dalam banyak aspek dengan meningkatkan pensinyalan Wnt. Ini adalah media pertumbuhan yang umum digunakan untuk organoid epitel lambung, organoid usus halus dan kolon, organoid hati, organoid prostat, organoid pankreas, dan organoid payudara.

Wnt-3a

Fungsi: Wnt-3a termasuk dalam keluarga protein pensinyalan Wnt dan memainkan peran penting dalam menjaga integritas jaringan embrionik dan dewasa. Keluarga Wnt sangat terkonservasi dan kaya akan sistein. Wnt memediasi jalur pensinyalan Wnt dengan mengikat reseptor membran sel dan/atau dengan mengikat reseptor membran sel yang berdekatan. Jalur pensinyalan Wnt dapat dibagi menjadi jalur kanonik dan jalur non-kanonik, yang satu terlibat dalam jalur pensinyalan kanonik yang dimediasi oleh β-catenin, termasuk Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b dan Wnt10a; yang lainnya tidak Jalur pensinyalan nonkanonik yang bergantung pada β-catenin, termasuk Wnt4, Wnt5a, Wnt6 dan Wnt11. Sebagai protein pensinyalan yang paling representatif dari keluarga Wnt, Wnt3a didistribusikan secara luas dan memainkan peran penting dalam mengatur fungsi seluler pleiotropik, termasuk pembaruan diri, proliferasi, diferensiasi, dan motilitas.

EGF

Fungsi: EGF merupakan faktor pertumbuhan poten yang merangsang perkembangan banyak epitel, angiogenesis, penghambatan sekresi asam lambung, proliferasi fibroblas, dan pembentukan koloni sel epidermis dalam kultur. EGF merupakan anggota pendiri keluarga EGF, yang juga mencakup TGF-α, dua protein pengatur (AR), protein sel β (BTC), protein epidermal (EPR), faktor pertumbuhan mirip EGF pengikat heparin (HB-EGF), Epiprotein, dan neuregulin (NRG1-6). Secara fisiologis, EGF terdapat dalam berbagai cairan tubuh, termasuk darah, susu, urin, air liur, air mani, cairan pankreas, cairan serebrospinal, dan cairan ketuban. EGF merupakan ligan afinitas tinggi untuk reseptor EGF (ErbB). EGF mengikat dan menginduksi dimerisasi reseptor EGF, yang mengarah pada aktivasi jalur pensinyalan protein tirosin kinase, sehingga mentransduksi sinyal keluarga EGF.

Piala kecil

Fungsi: Noggin dapat menghambat ligan keluarga TGF-β dan mencegahnya mengikat reseptor yang sesuai.Noggin awalnya ditemukan sebagai antagonis BMP-4 dan kemudian terbukti memodulasi aktivitas BMP lainnya (BMP-2, 7, 13, dan 14). Noggin sangat terkonservasi di antara vertebrata. Protein Noggin yang disekresikan mengatur aktivitas protein morfogenetik tulang selama perkembangan. Peran antagonis sinyal BMP Noggin dalam perkembangan metastasis tulang osteolitik dari kanker prostat.

bFGF/FGF-2

Fungsi: bFGF, anggota superfamili FGF dari protein mitogenik. Ini adalah faktor kemotaktik dan mitogenik yang sangat spesifik untuk banyak jenis sel dan tampaknya terlibat dalam remodeling jaringan yang rusak seperti penyembuhan ulkus, perbaikan vaskular, cedera otak traumatis. bFGF adalah komponen penting dari media kultur sel punca embrionik manusia. Lebih jauh lagi, protein bFGF adalah protein kationik pengikat heparin yang terlibat dalam berbagai kondisi patologis, termasuk angiogenesis dan pertumbuhan tumor padat. Oleh karena itu, bFGF dianggap sebagai target untuk kemoprevensi kanker dan strategi terapeutik. bFGF sering digunakan sebagai komponen penting dari media kultur sel, seperti media kultur sel punca embrionik manusia, sistem kultur bebas serum.

FGF-10

Fungsi: Fibroblast growth factor 10 (FGF-10) merupakan faktor pertumbuhan pengikat heparin yang termasuk dalam famili FGF. Protein dari famili ini memainkan peran utama dalam perkembangan prenatal, pertumbuhan postnatal, dan regenerasi berbagai jaringan dengan mendorong proliferasi dan diferensiasi sel. FGF-10 disekresikan oleh sel mesenkimal dan mengikat FGF-BP ekstraseluler, FGF-10 lebih suka mengikat dan mengaktifkan epitel FGF R2 (IIIb), dan berinteraksi lemah dengan FGF R1 (IIIb).

Qsistem manajemen kualitas dari HiAkti™ sitokin

Sistem Manajemen Mutu

• Tersertifikasi oleh ISO 13485:2016, sitokin diproduksi melalui proses produksi ultra-bersih yang sepenuhnya tertutup untuk memastikan kebersihan dan stabilitas protein.
• Mematuhi sistem “Cara Pembuatan Obat yang Baik”
• Memiliki Sertifikat Persetujuan Kualitas (COA)
• Teknologi aseptik dan filtrasi sterilisasi sekunder
• Basis produksi bahan baku produk farmasi

Manajemen Penjaminan Mutu

• Orang khusus yang bertanggung jawab atas sistem pelatihan personel manajemen
• Menetapkan prosedur pemeliharaan dan kalibrasi peralatan
• Sistem manajemen bahan baku dan pemasok
• Catatan produksi batch lengkap, catatan pemeriksaan batch, catatan pengemasan, dll.
• Catatan dokumen mutu telah diaudit dan diperiksa oleh QA
• Catatan produksi dan inspeksi batch lengkap
• Validasi metode analisis

Sistem Kontrol Kualitas

• Mematuhi aturan umum ketiga Farmakope Republik Rakyat Tiongkok edisi 2020: kontrol kualitas bahan baku dan eksipien untuk produksi produk biologis

Validasi Kultur Organoid

Yeasen sitokin telah diverifikasi pada organoid tumor manusia seperti kanker paru-paru, kanker serviks, kanker ovarium, kanker pankreas dan kanker usus, dan organoid normal seperti organoid usus halus manusia dan tikus.

Informasi produk terkait