Il cancro associato alla colite (CAC) è il terzo tumore maligno più comune al mondo, con morbilità e mortalità seconde solo al cancro gastrico e al fegato[1], La malattia infiammatoria intestinale (IBD) può aumentare la probabilità di sviluppare un cancro colorettale. La combinazione di AOM e DSS ha guadagnato popolarità grazie alla sua riproducibilità, potenza, basso costo e facilità d'uso. Questo articolo evidenzia un protocollo per la creazione del modello DSS-AOM per studiare l'oncogenesi dei CAC.

Modello animale

Topi BALB/c (7 settimane, maschi)

Materiale

DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)、AOM(Yeasen#60751ES)

Preparazione della soluzione

Acqua potabile addizionata di DSS: utilizzare acqua sterile per preparare una soluzione di DSS all'1-3%. Conservare a 4 °C fino al momento dell'uso.

Soluzione AOM: sciogliere AOM in WFI per ottenere una soluzione madre da 10 mg/mL. Aliquotare e congelare a -20 °C. Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento. Il giorno dell'uso, scongelare un'aliquota e diluirla 1/10 con soluzione salina sterile.

Protocollo

  • Il 1° giorno, pesare e contrassegnare i topi. Iniettare per via intraperitoneale nei topi 10 mg/kg di soluzione di AOM.
  • Riempire la riserva d'acqua delle gabbie dei topi con acqua. Calcolare 7-10 ml di acqua per topo al giorno. Alimentazione per una settimana.
  • Sostituire l'acqua potabile con il 2,5% di DSS per una settimana;
  • Somministrare regolarmente acqua potabile per due settimane;
  • Ripetere i passaggi 3-4 per 3 volte.

Fig1. Protocollo di modellazione del cancro colorettale AOM/DSS

Risultati di un modello CAC di successo

Perdita di peso con trattamento DSS

Fig 2. Il cambiamento del peso corporeo dei topi

2、Punteggio diarrea e punteggio di sanguinamento

Fig 3. Diarrea punto e punteggio di sanguinamento

3、Formazione di tumori nel colon dei topi

Figura 4. Il numero totale di colon rappresentativi e il numero di cancro al colon

Figura 5. Espressioni proteiche di COX-2, IL-6, β-catenina e chiocciola in modelli murini di colite acuta e cancro colorettale indotto da azossimetano (AOM)/DSS (A) Le sezioni del colon sono state colorate con H&E e gli anticorpi indicati (B) L'espressione proteica è stata esaminata mediante Western blot con gli anticorpi indicati dopo la lisi dei tessuti del colon di due topi di ciascun gruppo e la β-tubulina è stata utilizzata come controllo di caricamento[2].

Link a questa risorsa

[1]Qun Wang, et al. Il polisaccaride di cartamo inibisce il cancro colorettale nei topi indotto da AOM/DSS attraverso la regolazione della polarizzazione dei macrofagi[J]. Frontiers in Pharmacology.2021.761641

[2]Jia-Rong Huang, et al.Piperlongumine allevia i topi Colite e colite associata Colorettale Cancro[J].Frontiere in farmacologia.2020.586885

Caso di successo per la modellazione con Yeasen DSS

Yeasen fornisce alta qualità DSS (Cat#60316ES): purezza (98%), contenuto di zolfo 17-19%, zolfo libero <0,2%, supportato da un gran numero di dati bibliografici.

Tabella 1 Costruzione di diversi tipi di modelli di enterite con DSS

Modello

Modelli di campioni

Piano di modellazione

Risultati della modellazione

Valutazione dell'uso

colite acuta

Topi BALB/c, femmina, 6-8 settimane, 25 g

Bere liberamente 3%-5% DSS per 7 giorni consecutivi

Il giorno 5 è apparso, la lunghezza del colon era accorciata, la colorazione HE e l'infiammazione era evidente

La velocità di stampaggio è rapida e il tempo è breve. In linea con le caratteristiche del modello di colite acuta

Topi C57BL/6, maschi, 8 settimane, 20 g

3%-5% DSS tramite sondino, somministrazione continua

Giorno 5: accorciamento del colon, perdita di peso, sangue nelle feci, diarrea

Elevato tasso di muffa e breve durata. In linea con le caratteristiche del modello di colite acuta

colite cronica

Topo C57BL/6, maschio, 8 settimane, 22 g

1-2% DSS tramite sondino, somministrazione continua

Appare il giorno 40, accorciamento del colon, perdita di peso, sangue nelle feci, diarrea

Elevato tasso di modellamento. In linea con le caratteristiche del modello di colite cronica

cancro al colon

Topo C57BL/6, maschio, 8 settimane, 21 g

1%-2% DSS ad libitum per 5 giorni per 3 settimane

14 settimane con lunghezza del colon accorciata, perdita di peso, colorazione HE e infiammazione evidente

Elevato tasso di stampaggio. In linea con le caratteristiche del modello del cancro del colon

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Specificazione

ColitCare™ Destrano solfato sale sodico (DSS), grado colite PM: 36000~50000

60316ES25/60/76/80

25 g/100 g/500 g/1 kg

Azossimetano (Oggetto in magazzino)

60751ES03/08/10

1 mg/5 mg/10 mg

MolPure® Kit DNA fecale

18820ES08/50/70

5 tonnellate/50 T/200 T

MolPure® Kit DNA per terreno/feci Mag48 FA

18528ES48

48 mesi

MolPure®Kit DNA Mag Soil/Stool

18526ES20/50/70

20 T/50 T/200 T

Kit di colorazione con ematossilina ed eosina

60524ES60

2×100 ml

Kit per il test del sangue occulto nelle urine e nelle feci

60403ES60

100T

Soluzione colorante Alcian Blue Periodic Acid-Schiff (AB-PAS)

60534ES50/60

6×50 mL/6×100 mL/

Particoli pubblicati con i nostri reagenti

[1] Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Idrogel a base di microalghe per la malattia infiammatoria intestinale e la sua ansia e depressione associate. Adv Mater. 26 gennaio 2024: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. SE=29,4

[2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis modula la tolleranza immunitaria nella colite tramite il percorso AhR-IDO1-Kyn attivato dalla L-lisina. Nat Commun. 2024 13 febbraio;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.SE= 16.6

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[10] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Il nido d'uccello commestibile migliora la colite ulcerosa indotta dal destrano solfato sodico nei topi C57BL/6J ripristinando l'equilibrio delle cellule Th17/Treg [J]. Frontiers in Pharmacology. 2021.632602.SE=7,561

[11] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. La piperlongumina allevia la colite nei topi e il cancro colorettale associato alla colite [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.SE=7,561

[12]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Gli isoflavoni di soia migliorano la colite sperimentale prendendo di mira i percorsi dell'inflammasoma ERα/NLRP3[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.SE=6.048

[13] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. L'effetto antinfiammatorio dei peptidi derivati ​​dalla gelatina ossea bovina nell'AR indotta da LPSW264.7 Cellule macrofagiche e topi C57BL/6 indotti da destrano solfato sodico[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. SE=5.717

[14] Wang S.,  di Huang J,  Tan KS, et al. L'isosteviolo sodico migliora la colite cronica indotta da solfato di sodio destrano attraverso la regolazione del profilo metabolico, della polarizzazione dei macrofagi e del percorso NF-B [J]. Medicina ossidativa e longevità cellulare. 2022,4636618. SE=5.076

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