---Eliminazione dell'interferenza batterica di fondo e della contaminazione da RNasi
nel rilevamento dei patogeni in un colpo solo!
L'inibitore RNasi (RNase inibitor, abbreviato come RNasin) è in grado di legarsi specificamente alla RNasi tramite interazioni non covalenti per formare un complesso, inattivando così la RNasi e preservando l'integrità dell'RNA. È ampiamente utilizzato nei metodi di rilevamento dei patogeni come RT-qPCR, mNGS e tNGS. Durante il rilevamento dei patogeni, è fondamentale controllare rigorosamente la contaminazione batterica di fondo degli enzimi molecolari; se gli enzimi molecolari vengono interferiti dai batteri di fondo, potrebbero oscurare gli acidi nucleici bersaglio a bassa abbondanza o essere rilevati insieme a loro, influenzando così l'interpretazione dei risultati.
Inibitore RNasi Yeasen a bassissimo residuo
Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (Cat#14672ES/14673ES/14674ES) è un inibitore ricombinante della RNasi derivato dal topo espresso e purificato in una forma solubile da E. coli. Ha la capacità di inibire ampiamente vari tipi di RNasi, tra cui RNasi A, B e C. Questo prodotto è stato testato con RT-PCR e RT-qPCR e si è rivelato compatibile con le trascrittasi inverse convenzionali e una varietà di DNA polimerasi. Rispetto agli inibitori della RNasi derivati dall'uomo, Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor non ha i due residui di cisteina che sono altamente sensibili all'ossidazione nelle proteine umane, offrendo quindi una maggiore attività antiossidante. È particolarmente adatto per esperimenti sensibili ad alte concentrazioni di DTT, come qPCR.
Inoltre, rispetto agli inibitori convenzionali della RNasi (Cat#10603ES/10610ES/14671ES), l'inibitore murino della RNasi Yeasen UCF.ME® presenta livelli residui inferiori di DNA genomico dell'ospite, il che aiuta ad affrontare l'interferenza batterica di fondo nel rilevamento del patogeno e migliora l'accuratezza del rilevamento.
Caratteristiche del prodotto
- Residuo ultra basso: livello di residui di DNA di E. coli < 0,1 copie/100 U, adatto per applicazioni con requisiti batterici di base più rigorosi.
- Attività inibitoria ad ampio spettro delle RNasi: in grado di inibire le RNasi tra cui RNasi A, RNasi B, RNasi C e altre.
- Compatibile con un'ampia gamma di condizioni di reazione: attivo in condizioni di pH da 5,0 a 9,0 e temperature da 25°C a 60°C, adatto per trascrittasi inverse termofile.
- Compatibile con un ampio spettro di esperimenti a valle: nessun impatto sull'attività enzimatica delle RNA polimerasi SP6, T7 o T3, delle trascrittasi inverse AMV e M-MLV e delle DNA polimerasi Taq.
- Stabilità da lotto a lotto: la piattaforma di produzione di enzimi molecolari ultra-puliti UCF.ME®, con rigorosi controlli di qualità, garantisce l'uniformità, la stabilità e la fornitura tempestiva del prodotto.
Prestazioni del prodotto
1）Nessuna esonucleasi, enzima di incisione e RNasi residui
Figura 1. Rilevamento di residui di nucleasi, enzima di nicking e RNasi nell'inibitore murino della RNasi UCF.ME®.
Nota: N rappresenta il controllo negativo; 1, 2, 3 rappresentano tre serie di esperimenti paralleli.
2) Il residuo di DNA genomico di coli è inferiore a 0,1 copie/100 U, significativamente inferiore rispetto alla versione convenzionale.
Eseguendo il rilevamento dei residui di DNA genomico dell'ospite (E. coli) su diversi lotti di UCF.ME® Murine RNase Inhibitor e confrontandolo con i livelli di residui dell'ospite degli inibitori convenzionali della RNasi murina, i risultati mostrano che il residuo di DNA genomico dell'ospite di UCF.ME® Murine RNase Inhibitor è inferiore a 0,1 copie/100 U, significativamente inferiore a quello della versione convenzionale.
Figura 2: Confronto dei risultati del rilevamento dei residui genomici di E. coli tra UCF.Risonanza magnetica ME® e risonanza magnetica convenzionale.
3) La capacità inibitoria della RNasi è significativamente superiore a quella dei marchi importati.
Utilizzando Total RNA come modello, la reazione RT-qPCR è stata condotta utilizzando il kit di sonde Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) (Cat#13650ES) per verificare la capacità di digestione di RNaseA di UCF.ME® Murine RNase Inhibitor. I risultati hanno indicato che l'effetto inibitorio di Yeasen UCF.ME® MRI su RNaseA è significativamente superiore a quello di prodotti concorrenti internazionali simili.
Figura 3: Validazione della capacità di inibizione della RNasi di UCF.ME® MRI
Nota: Yeasen UCF MRI: 8 U UCF.ME® MRI + 80 ng RNaseA; Yeasen MRI: 8 U MRI + 80 ng RNaseA; Concorrente N*: 8 U di un prodotto concorrente simile + 80 ng RNaseA; Controllo: nessuna MRI e RNaseA.
Raccomandazione del prodotto
| Tipo | Nome | Gatto |
| Serie di singoli enzimi PCR ultra-puliti con residui ospiti ultra-bassi | Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq DNA Polimerasi (5 U/μL) | 14314ES |
| Trascrittasi inversa Hifair UCF.ME® V (200 U/μL) | 14608ES | |
| UCF.ME® Uracil DNA glicosilasi (UDG/UNG), termolabile, 1 U/μL | 14466ES | |
| Inibitore della RNasi murina UCF.ME® (40 U/µL) | 14672ES | |
| Serie monoenzimatica PCR ad alte prestazioni | Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA polimerasi, 5 U/μL | 10726ES |
| Trascrittasi inversa Hifair® V (200 U/μL) | 11300ES | |
| Uracile DNA glicosilasi (UDG/UNG), labile al calore, 1 U/μL | 10303ES | |
| Inibitore RNasi murino (40 U/µL) | 10603ES | |
| Miscela dNTP (25 mM ciascuno) | 10125ES | |
| Pronto per Lyo Serie monoenzimatica PCR | Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA polimerasi, senza glicerolo (5U/μL) | 14316ES |
| Trascrittasi inversa Hifair® V, senza glicerolo (600 U/μL) | 11301ES | |
| Uracil DNA glicosilasi (UDG), labile al calore (1 U/μL, senza glicerolo) | 10707ES | |
| Inibitore RNasi murino (200 U/µL, senza glicerolo) | 10703ES |