Parole chiave:
Basso residuo, premiscelato, universale multi-target, mono-provetta, qPCR, alta sensibilità.
Astratto:
La nuova miscela qPCR di terza generazione a bassissimo residuo, premiscelata per garantire un'elevata sensibilità, supporta un protocollo rapido da 30 minuti ed eccelle nell'amplificazione multiplex in diversi scenari.
Sfondo：
Gli enzimi molecolari commerciali, prodotti principalmente tramite espressione ricombinante in ceppi ingegnerizzati (ad esempio, E. coli), spesso contengono DNA genomico residuo dell'ospite. Fattori come l'ambiente di preparazione e la contaminazione umana aumentano ulteriormente la probabilità di DNA residuo in questi enzimi. Ciò può portare a una quantificazione imprecisa dei residui di acido nucleico dell'ospite nei prodotti di controllo qualità, ponendo rischi per la sicurezza della produzione biofarmaceutica. Durante il rilevamento del patogeno, gli acidi nucleici batterici di fondo contaminati potrebbero sopraffare gli acidi nucleici bersaglio a bassa abbondanza o essere co-rilevati con essi, compromettendo l'accuratezza del test.
Soluzione totale
Per contrastare l'interferenza dei batteri di fondo e dei residui di acido nucleico dell'ospite nel rilevamento dei patogeni, YEASEN Biotech ha sviluppato un'esclusiva tecnologia di controllo dei residui ultra-bassi. Abbiamo creato UCF.ME, una base di produzione di enzimi molecolari ultra-puliti che aderisce agli standard GMP, con rigorosa conformità al sistema di gestione della qualità ISO 13485 in tutte le fasi. Ciò include un rigoroso controllo su personale, macchinari, materiali (reagenti e materiali di consumo), processi, ambiente e standard. Integrando efficaci misure tecniche, un ambiente di produzione pulito e un rigoroso controllo di qualità, consentiamo la produzione su larga scala di vari UCF.METMenzimi a bassissimo residuo molecolare.
Hieff UniconTM Miscela di qPCR Pure Pro U+(Un tubo）（Gatto#16713ES）è un mix qPCR universale meticolosamente elaborato da SÌ ... Biotech, che presenta un basso residuo di DNA ospite. Questo prodotto si basa su una nuova generazione di mix qPCR premiscelato universale (Cat#16713ES) che controlla efficacemente il DNA genomico residuo dell'ospite (Escherichia coli), controllando anche i livelli residui di comuni batteri patogeni come Pseudomonas aeruginosa e contaminanti di origine umana. Poiché questa soluzione premiscelata (Cat#16713ES) non solo controlla efficacemente il livello di residui di patogeni, ma affronta anche i problemi di stabilità nel rilevamento multiplo e versatilità del target, migliora gli indicatori chiave delle prestazioni come la sensibilità e la specificità del reagente. Migliora significativamente l'efficienza di rilevamento e può essere ampiamente utilizzata in scenari applicativi come il rilevamento di microrganismi patogeni.
Vantaggi del prodotto
- Basso residuo di fondo – Nessun rilevamento di Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e residui di DNA genomico di origine umana in 48 pozzetti.
- Eccezionale stabilità premiscelata: Stabile a 37°C fino a 14 giorni, a 4°C fino a 28 giorni e dopo 50 cicli di congelamento-scongelamento.
- Eccellente versatilità dei reagenti – Compatibile con una varietà di set di primer-sonda multiplex (validati per oltre 40 diversi tipi di target), con eccellenti prestazioni di amplificazione.
- Elevata sensibilità e specificità – La sensibilità è in grado di rilevare 250 copie/mL, con specificità che garantisce l'assenza di picchi in 48 pozzetti negativi.
- Supporta protocolli rapidi – Compatibile con protocolli rapidi, i risultati possono essere ottenuti in soli 30 minuti.
- Sistema anticontaminazione dUTP/UDG – Incorpora un sistema anticontaminazione dUTP/UDG per prevenire efficacemente la contaminazione da aerosol.
- Compatibilità con più piattaforme e sistemi – Compatibile con piattaforme quali Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong e altre.
Punti salienti delle prestazioni
1、Residui batterici di fondo ultra-bassi
Sulla base della valutazione dei livelli di residui batterici di fondo del reagente, l'uso di SÌ ...'S residuo ultra basso universale pri-mescolato Miscela qPCR (Cat#16713ES) e reagenti convenzionali (senza controllo dei residui)) per NTC (nessun controllo del modello) amplificazione in un Escherichia coli (Escherichia coli), con 16713ES sottoposto anche ad amplificazione NTC in entrambi i sistemi di Pseudomonas aeruginosa e DNA genomico derivato dall'uomo. I risultati mostrano che Cat#16713ES non presenta alcuna amplificazione in 48 pozzi di NTC, indicando residui di DNA di fondo trascurabili (E. coli, P. aeruginosa e DNA umano) nel reagente.
2、Eccezionale stabilità del premiscelato completamente premiscelato
Sulla base dell'indagine sulla stabilità del premiscelato reagente, Cat#16713ES è stato trattato in tre modi (4°C, 37°C e congelamento-scongelamento). I gruppi sperimentali sono stati trattati a 4°C e 37°C per 7 giorni, rispettivamente, e sottoposti a 50 cicli di congelamento-scongelamento. La stabilità è stata valutata rispetto al gruppo di controllo (conservato a -20°C) sotto quattro sistemi di amplificazione multiplex (i gruppi 1, 2 e 4 sono sistemi di amplificazione 4-plex e il gruppo 3 è un sistema di amplificazione 3-plex), con alcuni gruppi di amplificazione ulteriormente valutati per la stabilità dopo 14 giorni di accelerazione a 37°C. I risultati hanno dimostrato che il Deviazione del valore Ct (valore ΔCt) tra i reagenti sperimentali e di controllo era entro ±0,5 e la deviazione del valore di fluorescenza era entro il 15%, indicando che il reagente premiscelato di YEASEN ha un'eccellente stabilità in amplificazione multiplex.
3、Eccellente versatilità dei reagenti
Sulla base dell'indagine sugli scenari applicativi versatili del reagente, SÌ ... (Cat#16713ES) è stato utilizzato insieme a diversi reagenti convenzionali per convalidare le prestazioni di amplificazione in diversi scenari target. I risultati hanno dimostrato che il prodotto presenta buone prestazioni di amplificazione su una varietà di target tra cui agenti patogeni, fonti umane e piante, indicando un elevato livello di versatilità dei reagenti.
4、Sensibilità di amplificazione eccezionale
Sulla base di una valutazione della sensibilità del reagente, è stata condotta una valutazione del tasso di rilevamento di Cat#16713ES in un sistema di amplificazione multiplex (4-plex) utilizzando campioni a concentrazioni ultra basse (250 copie/mL). I risultati indicano che il Cat#16713ES di YEASEN presenta eccellenti sensibilità di amplificazione, con un limite di rilevamento di almeno 250 copie/mL.
5. Compatibilità con più protocolli rapidi
Sulla base dell'indagine sulle prestazioni di amplificazione del protocollo rapido del reagente, sette campioni di gradiente (1~10^6 copie/μL) sono stati convalidati utilizzando sia protocolli convenzionali (1 ora e 6 minuti) che rapidi (30 minuti) sullo stesso strumento PCR quantitativo (ABI Q5). I risultati hanno dimostrato che l'efficienza di amplificazione del protocollo rapido è rimasta oltre il 99%e la deviazione del valore Ct (valore ΔCt) tra i protocolli convenzionali e rapidi è stata entro ±0,5, con una deviazione del valore di fluorescenza entro ±10%e le curve di amplificazione mostrava una forma a “S”.
Condivisione del reagente di rilevamento IVD
In qualità di fornitore di strumenti per le scienze della vita, SÌ ... Biotech fornisce da molto tempo materie prime di alta qualità e convenienti alle aziende IVD. Oltre a quelle universali, completamente premiscelato mix master qPCR/RT-qPCR, offriamo una varietà di altri reagenti di rilevamento qPCR/RT-qPCR, aiutando Diagnosi differenziale i clienti aziendali affrontano congiuntamente il problema del rilevamento efficiente di agenti patogeni umani e malattie animali.
| Tipo di prodotto | Funzione del prodotto | Nome del prodotto | Numero articolo |
| Miscela qPCR | Nuovo di zecca, universale di terza generazione, completamente premiscelato, ad alta sensibilità, supporta test rapidi | Miscela di TaqMan Pro U+ qPCR universale Hieff UniconTM(Un tubo） | 16710ES |
| Universale ad alta sensibilità (concentrazione 5×) | Hieff UniconTM Master Mix universale TaqMan Multiplex qPCR(UDG più） | 13891ES | |
| 2a generazione rapida completamente premiscelata | Hieff UniconTM Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG più） | 11827ES | |
| Residuo ultra-basso senza ospite | Hieff UniconTM Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG più） | 11853ES | |
| Liofilizzato universale ad alta sensibilità | Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG più） | 11893ES | |
| Miscela RT-qPCR | Rapido universale ad alta sensibilità | Kit sonda RT-qPCR multiplex in un unico passaggio HifairTM C203P1(UDG più） | 16630ES |
| universale completamente premiscelato | HifairTM Kit sonda RT-qPCR Multiplex One Step V(UDG più） | 11899ES | |
| Liofilizzatore rapido universale | 11831ES |