1. Introduzione di base

La streptavidina è una proteina legante la biotina derivata da Streptomyces avidinii. Il suo legame non specifico è molto più basso di quello dell'avidina e, rispetto all'avidina dell'albume d'uovo, che ha una carica netta positiva a pH neutro e contiene circa il 7% di carboidrati, la streptavidina ha proprietà chimiche più favorevoli, come quasi nessuna carica netta a pH neutro e nessun carboidrato. Pertanto, è ampiamente utilizzata come alternativa all'avidina.

2. Caratteristiche del prodotto

Struttura del tetramero: La streptavidina esiste come omotetramero con una dimensione di 66 KDa;

Alta affinità:Ogni molecola di streptavidina può legarsi in modo altamente specifico a quattro molecole di biotina, con un'affinità estremamente forte tra loro;

Ampie applicazioni: La costante di dissociazione del complesso streptavidina-biotina è nell'ordine dei nanomolari, una proprietà comunemente utilizzata nelle applicazioni di biologia molecolare; nella maggior parte delle applicazioni, può essere utilizzata in modo intercambiabile con le proteine degli anticorpi;

Estrazione di alta qualità: Ottenuto per purificazione da Streptomyces avidinii;

Figura 1. Streptavidina

Prodotto Applicazione

Applicazione 1: Resina purificata con streptavidina

1)Principio di applicazione

Sulla base dell'interazione tra streptavidina e biotina, la streptavidina è altamente reticolata al 6% di agarosio e l'esclusivo processo di preparazione le conferisce proprietà fisico-chimiche più elevate, consentendole di resistere a pressioni più elevate. Può ottenere la purificazione della proteina target a velocità di flusso relativamente elevate, rendendola più adatta per la purificazione proteica industriale su larga scala.

Figura 2. Principio di purificazione della resina di streptavidina

2) Yeasen si impegna a fornirti prodotti ad alta efficienza per purificare proteine più perfette per te.

Figura 3. Proteina purificata dalla resina di streptavidina

3) Domande frequenti

Domanda	Possibile motivo	Soluzione consigliata
La contropressione della colonna è troppo alta	L'imballaggio è bloccato	Pulisci la resina.
	L'imballaggio è bloccato	Il tampone di lisi contiene piccole particelle solide, si consiglia di filtrarlo con una membrana filtrante da 0,22 μm o 0,45 μm prima del caricamento, oppure di centrifugarlo per rimuoverlo.
	Il campione è troppo viscoso.	Il campione contiene un'elevata concentrazione di acidi nucleici, prolungare il tempo di lisi fino a ridurre la viscosità o aggiungere DNasi I (concentrazione finale di 5 μg/ml), Mg²⁺ (concentrazione finale di 1 mM), incubare su ghiaccio per 10-15 minuti
	Il tampone è troppo viscoso	I reagenti organici o i reagenti stabilizzanti delle proteine (come glicerolo, ecc.) possono causare un aumento della contropressione e ridurre la portata operativa.
Proteina senza scopo nel componente di eluizione	Una scissione eccessiva denatura la proteina di interesse	Utilizzare condizioni di lisi blande. Le condizioni sperimentali si basano sull'esperienza.
Proteina senza scopo nel componente di eluizione	La proteina bersaglio si aggrega per produrre precipitazione	Aggiungere DTT alla soluzione di lisi pre-cellulare a una concentrazione finale di 1-10 mM.
La proteina bersaglio non è completamente eluita	Il volume di eluizione è troppo piccolo	Aumentare il volume dell'eluente e diminuire la portata di eluizione.
	Il pH del tampone di eluizione cambia	Utilizzare eluente appena preparato
	Il tempo di incubazione dell'eluente non è sufficiente	Aumentare il tempo di incubazione del tampone di eluizione con il gel.

Applicazione 2: Streptavidina marcata con coniugato enzimatico e gruppo fluorescente.

Figura 4. Diverse streptavidine coniugate

1）Streptavidine coniugate con enzimi

Streptavidina coniugata con perossidasi di rafano (HRP)

Ⅰ. Prodotto da streptavidina ad alta purezza e perossidasi di rafano attraverso una speciale tecnica di coniugazione;

Ⅱ. Mantiene l'elevata attività specifica della perossidasi. Applicazioni: Immunoistochimica (IHC), Immunocitochimica (ICC), Ibridazione in situ (ISH), ecc.

Concentrazione consigliata: 0,01-0,1 µg/mL per WB (metodo di chemiluminescenza); 1-2 µg/mL per ELISA, HC/ICC, WB (sviluppo del colore del substrato)

Streptavidina coniugata con fosfatasi alcalina (AP)

Ⅰ. Adatto per analisi in fase solida, sistemi di colorazione di tessuti/cellule e applicazioni di blot, con legame covalente specifico;

Ⅱ.Il coniugato è stabile e altamente attivo.

Applicazioni: immunoistochimica (IHC), immunocitochimica (ICC), saggio immunoenzimatico (ELISPOT), saggio immunoenzimatico (ELISA), ibridazione in situ (ISH) e applicazioni blot.

Concentrazione consigliata: 1-2 µg/mL per ELISA, IHC/ICC; 0,1-1 µg/mL per WB

2）Streptavidine coniugate con fluorofori

Streptavidina coniugata con fluoresceina Fluor®

Ⅰ.Consigliato per l'immunofluorescenza di routine;

Ⅱ.Altamente purificato con caratteristiche di legame non specifiche molto basse;

Ⅲ. Elevata affinità per la biotina;

Applicazioni: immunofluorescenza (IF), ibridazione in situ (ISH), citometria a flusso (Flow Cyt).

Concentrazione consigliata: 0,5-2 µg/mL (IF)

Streptavidina coniugata con colorante DyLight™

Ⅰ. Può essere utilizzato per rilevare secondi anticorpi biotinilati e altre grandi molecole in applicazioni di immunofluorescenza, ibridazione in situ o citometria a flusso;

Ⅱ.Altamente purificato con caratteristiche di legame non specifiche molto basse;

Ⅲ.Affinità estremamente elevata per la biotina;

Ⅳ. Elevata fotostabilità, insensibilità al pH e fluorescenza più brillante;

Applicazioni: immunofluorescenza (IF), ibridazione in situ (ISH), citometria a flusso (Flow Cyt).

Concentrazione consigliata: 0.5-2 µg/mL (SE)

Informazioni sul prodotto

Serie di prodotti	Numero di prodotto	Nome del prodotto	Specificazione
Streptavidina	35099ES	Streptavidina (polvere)	100 mg/1 g
Streptavidina	35101ES	Streptavidina (5 mg/ml)	1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1 g
Streptavidine coniugate con enzimi	35105ES	HRP Streptavidina	100 microlitri
Streptavidine coniugate con enzimi	35106ES	Streptavidina AP	100 microlitri
Streptavidina marcata fluorescente	35102ES	Streptavidina DyLight 405™	100 microlitri
	35103ES	YSFluore^TMStreptavidina coniugata 488	100 microlitri
	35104ES	YSFluore^TMStreptavidina coniugata 647	100 microlitri
	35107ES	YSFluore^TMStreptavidina coniugata 584	100 microlitri
	35108ES	Streptavidina coniugata con Cy3	1mg
Serie di purificazione della streptavidina	20512ES	Streptavidina Resina di Agarosio 6FF	5 mL/5 mL×5/100 mL
	20513ES	Colonna cromatografica BiotSep Streptavidina 6FF, 1ML	1 mL/1 mL×5
	20514ES	Colonna cromatografica BiotSep Streptavidina 6FF, 5ML	5 ml/5 ml×5

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Streptavidina - alternativa alla biotina