デキストラン硫酸ナトリウム（DSS、大腸炎グレード）を使用した潰瘍性大腸炎のショウジョウバエモデリングのプロトコル

デキストラン硫酸ナトリウム (DSS) は、デキストランをクロロスルホン酸でエステル化して生成されるデキストランのポリアニオン誘導体です。ショウジョウバエに与えると、腸上皮内の腸表皮細胞間の接続が破壊され、腸が損傷し、複数の経路が反応して幹細胞の自己複製と分化を調節し、損傷した細胞を補充し、腸の恒常性を維持します。

図1 ショウジョウバエ腸管幹細胞の分裂と分化の模式図

1 模型作り

1.1 動物モデル

ショウジョウバエ、メス、5～10日;

1.2 材質

DSS(イェーセン#60316ES、MW36000-50000)

1.3 プロトコル

1、栄養培地は5％ショ糖溶液で調製した。

2、対照群：5％ショ糖培地（SC）、実験群：3％DSS（培地調製物）

2、ハエは、5％ショ糖溶液で湿らせた2.5×3.75cmのクロマトグラフィー紙（Fisher）が入った空のバイアルで培養された。

3、ショウジョウバエを毎日培養瓶を交換しながら29℃で3日間培養した。

4、3日間培養した後、中腸を摘出し、GFP（緑）とPH3（赤）抗体およびDRAQ5（青）で免疫染色した。

2 件の結果

図2. DSSによって誘導されたショウジョウバエのISC前駆細胞の増殖[1]

免疫染色におけるさまざまな標識方法を使用することで、腸幹細胞 (ISC) と ISC 前駆細胞の増殖が定量化され、DSS がショウジョウバエモデルで腸の損傷を誘発したことが示されました。

このリソースへのリンク3 件

[1] Fangfang Ren 他、PNAS.2010.107 (49) 21064-21069

4 Yeasen DSSによるモデリングの成功事例

Yeasenは高品質のDSS（Cat#60316ES）を提供しています：純度（98％）、硫黄含有量17〜19％、遊離硫黄 多数の文献データによって裏付けられている0.2% 未満。

表1 DSSによる様々なタイプの腸炎モデルの構築

モデル

モデリングサンプル

モデリング計画

モデリング結果

使用評価

急性大腸炎

BALB/cマウス、メス、6～8週、25g

3%-5% DSSを7日間連続で自由に飲む

5日目に現れ、結腸の長さが短くなり、HE染色で炎症が明らかになった

成形速度が速く、時間が短い。急性大腸炎モデルの特性と一致している。

C57BL/6マウス、雄、8週、20g

経口投与による3%-5% DSS、継続投与

5日目に、結腸の短縮、体重減少、便中の血、下痢が起こります。

高いカビ率と短い持続期間。急性大腸炎モデルの特徴と一致している

慢性大腸炎

C57BL/6 マウス、オス、8 週、22 g

経口投与による1～2％DSS、持続投与

40日目、結腸短縮、体重減少、便に血が混じる、下痢

高い成形率。慢性大腸炎モデルの特性と一致している。

大腸がん

C57BL/6 マウス、オス、8 週、21 g

1%-2% DSSを3週間にわたり5日間自由に摂取

14週目、結腸の長さが短くなり、体重が減少し、HE染色が見られ、明らかな炎症がみられました。

高い成形率。大腸癌モデルの特性と一致している。

5製品の注文

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製品名​​

記事番号​​

仕様

デキストラン硫酸ナトリウム塩（DSS）、大腸炎グレードMW：36000〜50000

60316ES25/60/76/80

25g/100g/500g/1kg

アゾキシメタン (AOM)

60751ES03/08/10

1mg/5mg/10mg

MolPure ®便DNAキット

18820ES08/50/70

5T/50T/200T

MolPure ® Mag48 土壌/便 DNA キット FA

18528ES48

48 トン

MolPure ® Mag 土壌/便 DNA キット

18526ES20/50/70

20T/50T/200T

ヘマトキシリン・エオシン染色キット

60524ES60

2×100mL

尿便潜血検査キット

60403ES60

100T

アルシアンブルー過ヨウ素酸シッフ（AB-PAS）染色液

60534ES50/60

6×50mL/6×100mL/

6弊社の試薬を使用した論文

  1. Zhong D、Jin K、Wang R、他「炎症性腸疾患とそれに伴う不安とうつ病に対する微細藻類ベースのハイドロゲル」Adv Mater. 2024年1月26日:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
  2. Zhang Y、Tu S、Ji X、Wu J、Meng J、Gao J、Shao X、Shi S、Wang G、Qiu J、Zhang Z、Hua C、Zhang Z、Chen S、Zhang L、Zhu SJ。Dubosiella newyorkensisは、L-リジン活性化AhR-IDO1-Kyn経路を介して大腸炎の免疫寛容を調節します。Nat Commun。2024年2月13日;15(1):1333。doi：10.1038/s41467-024-45636-x。 IF=16.6
  3. Li Zhao、Fei Wang、Zhengwei Cai、et al.潰瘍性大腸炎の治療のための注射可能な粘膜付着性ハイドロゲルによる薬物利用プラットフォームの改善[J].化学工学ジャーナル.424(2021)130464. IF=16.744
  4. Lingjun Tong、Haining Hao、Zhe Zhang、et al.ミルク由来の細胞外小胞は腸管免疫を調節し、腸内細菌叢を再形成することで潰瘍性大腸炎を緩和する[J]。Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 IF=11.556
  5. Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. 腸内常在菌由来の吉草酸は放射線障害から保護する。腸内微生物、2020 .1–18。IF =10.245
  6. Jingjing Gan、Yuxiao Liu、Lingyu Sun、et al.炎症性腸疾患治療のためのマイクロ流体からの経口投与ヌクレオチド送達粒子[J]。Applied Materials Today.2021年12月;25:101231 IF=10.041
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  9. Hao H、Zhang X、Tong L、Liu Q、et al.Lactobacillus plantarumQ7由来の細胞外小胞のマウスの腸内細菌叢および潰瘍性大腸炎への影響[J]。Frontiers in Immunology.2021.777147 . IF=7.561
  10. Yaohua Fan、Yanqun Fan、Kunfeng Liu、et al.食用ツバメの巣は、Th17/Treg細胞バランスを回復させることにより、C57BL/6Jマウスのデキストラン硫酸ナトリウム誘発性潰瘍性大腸炎を軽減する[J]。Frontiers in Pharmacology.2021.632602. IF=7.561
  11. Jia-Rong Huang、Sheng-Te Wang、Meng-Ning Wei、et al.Piperlongumineはマウス大腸炎および大腸炎関連大腸がんを軽減する[J]。Frontiers in Pharmacology.2020.586885. IF=7.561
  12. Gao X、Fan W、Tan L、et al。大豆イソフラボンはERα/NLRP3インフラマソーム経路を標的にして実験的大腸炎を改善する[J]。栄養生化学ジャーナル、2020年、83.IF = 6.048
  13. Lujuan Xing、Lijuan Fu、Songmin Cao、et al.LPS誘導RAW264.7マクロファージ細胞およびデキストラン硫酸ナトリウム誘導C57BL/6マウスにおけるウシ骨ゼラチン由来ペプチドの抗炎症効果[J]。Nutrients 2022、14、1479。IF=5.717
  14. Wang S、Huang J、Tan KS、et al。イソステビオールナトリウムは、代謝プロファイリング、マクロファージ分極、およびNF-B経路の調節を介してデキストラン硫酸ナトリウム誘発性慢性大腸炎を軽減する[J]。酸化医学と細胞長寿命。2022、4636618。 IF=5.076

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