マクロファージは免疫系における重要な細胞であり、病原体の除去、組織の修復、免疫調節など、組織内でさまざまな役割を果たしています。慢性炎症、自己免疫疾患、腫瘍の発達など、特定の病態におけるマクロファージの異常な活性化または機能不全は、生物に悪影響を及ぼす可能性があります。クロドロネートリポソームは、マクロファージを特異的に減少または除去する薬剤または化合物のクラスです。クロドロネートリポソームは、現在入手可能な最も成熟した、便利で費用対効果の高いマクロファージ除去ツールであり、肝臓、脾臓、肺、血液など、動物のさまざまな組織や部位からマクロファージを効果的に除去できるため、現在最も広く使用されているマクロファージ除去方法です。

さまざまな組織のアプローチ(情報のみ)

臓器/マクロファージ

投与量(マウス1匹あたり20~25g)

脾臓/赤髄マクロファージ

単回投与量: 200 µl/マウス (IV または IP)。
長期枯渇:最初の投与量はマウス1匹あたり200µl、その後2~3日間隔でマウス1匹あたり200µl

肝臓/クッファー細胞

単回投与量: 200 µl/マウス (IV または IP)。
長期枯渇:最初の投与量はマウス1匹あたり200µl、その後2~3日間隔でマウス1匹あたり200µl

肺/肺胞マクロファージ

IV(150~200µl)と気管内または鼻腔内(50µl)を組み合わせると、最良の結果が得られます。

リンパ節

マウス1匹あたり100~200µlの注射。具体的な投与計画は文献に記載されています。

脳/ミクログリア

脳室内から脳脊髄液へ流入、マウス 10 µl/匹、ラット 50 µl/匹。

血液/単球

150~200µl/マウス(IV)、最大減少率は24時間以内に達成されますが、1~7日目での最大減少率は系統によって異なります。

よくある質問

Q1: クロドロネートリポソームを投与された後はどうすればいいですか?

A: クロドロネートリポソームを受け取った後、すぐに使用できない場合は、4℃の冷蔵庫に保管する必要があります。凍結は禁止です。原液として使用し、希釈は許可されていません。リポソームは沈殿しやすいため、使用前に軽く混ぜることをお勧めします。また、4℃クロロリン酸リポソームはすぐに使用できず、注射する前に室温に戻す必要があります。

Q2: バイアルからリポソームを移すにはどうすればよいですか?

A: バイアルからリポソームを移す最良の方法は、滅菌針付き注射器を使用することです。この方法により、バイアルに残っているリポソーム懸濁液は密封され、清潔な状態が保たれます。移し替えには滅菌チップ付きのピペットを使用することもできますが、BSC フードなどの清潔な環境で行うのが最適です。

Q3: クロドロネートリポソームはin vitroマクロファージ除去に使用できますか?

A: この製品は in vitro マクロファージ除去に使用できますが、この方法は in vivo 実験により適しています。主な理由は、in vitro 培養中、死んだ細胞から放出されたクロロリン酸またはリポソームから「漏れた」クロロリン酸が培養液に残りますが、in vivo ではクロロリン酸の半減期が非常に短く、腎臓によってすぐに除去されるためです。遊離クロロリン酸は細胞やリポソームに入りませんが、培養液に蓄積するとゆっくりと細胞に入ります。

Q4: クロドロネートリポソームを静脈注射した動物がすぐに死亡する理由は何ですか?

A: 一方で、動物に不均質なリポソーム懸濁液が注入された可能性があります。使用前に軽く振って混ぜることをお勧めします。リポソームは、in vitro で一定期間後に沈殿します。長期間にわたって一度に複数の動物に注入する必要がある場合、リポソームはシリンジ内で沈殿して不均質な懸濁液を形成し、最初の注入の測定値が最後の注入の測定値と大幅に変化します。他方、リポソームが冷蔵庫から取り出されたばかりで、室温に戻っていない可能性もあります。

Q5: クロドロネートリポソームを注射してから何日後に動物は死亡しましたか?

A: 細菌汚染が原因の可能性があります。マクロファージが体内から除去されると、ウイルス粒子、細菌、酵母などによる感染の可能性が高まります。

Q6: クロドロネートリポソームは期待した効果が得られないのでしょうか?

A: クロドロネート リポソームは大量生産されており、各バッチはクロドロネートの濃度と、顧客に販売される前に混入する可能性のある物質の数について検査され、正しいことが確認されています。また、リポソームは極端な温度の影響を受けやすいため、輸送と保管は 4 ~ 8°C で行うのが適切です。懸濁液は凍結したり、30°C 以上に加熱したりしないでください。出荷品を受け取ってから 3 か月以内に使い切る必要があります。さもないと、使用効果が損なわれる可能性があります。

Q7: 静脈注射する場合、注射量を増やすことはできますか?

A: 静脈注射は動物の体重に基づいて、0.1 mL/10 mg を超えてはなりませんが、腹腔内注射の場合は、注射量を適宜増やすことができます。皮下注射は、注射部位の容積に応じて決定する必要があります。

Q8: リポソームを使用する際に注意すべきことは何ですか?

A: 飽和炭化水素鎖を持つ脂質から調製されたリポソームは実際には非常に強力ですが、以下の注意事項に注意する必要があります。

①クロロホルム、メタノール、エタノール、DMSO、エーテル等の有機溶剤と混合しないでください。

② リポソームを切断する必要がある場合以外は、界面活性剤を添加しないでください。

③ 相転移温度以上でのインキュベーションを必要とする薬剤充填を行わない限り、脂質の主な相転移温度付近またはそれ以上の温度で加熱しないでください。

製品の推奨

製品名

商品番号

仕様

クロドロネートリポソーム(アムステルダム自由大学より)

40337ES08

5mL

40337ES10

10mL

コントロールリポソーム(PBS)

40338ES08

5mL

40338ES10

10mL

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