マクロファージは体のさまざまな部分で独自の重要な役割を果たしますが、特定の領域におけるマクロファージの特定の機能と病気の発症への影響をよりよく研究するために、正確なマクロファージ除去が重要な研究ツールになっています。クロドロネート リポソームは、最も実績があり、費用対効果が高く、マクロファージ除去に理想的なツールの 1 つです。クロドロネート リポソームは、腹腔内、尾静脈、その他のさまざまな方法で投与して、さまざまな組織からマクロファージを除去できます。

以下では、さまざまな部位でのマクロファージ除去の方法と有効性を示す一連のトピックを共有し、研究者にとって有用な参考資料とリファレンスを提供することを望みます。

注入方法の紹介

尾静脈注射

尾静脈注射では 24 時間後に最大減少に達します。検出時点には注意が必要です。

1、マウスを逆さまにした弁当箱に入れ、開口部から尾を引き出します。マウスの尾には2本の動脈と3本の静脈があり、2本の動脈は尾の背側と腹側にあり、3本の静脈はジグザグに分布しています。一般的には左側と右側の静脈が使用されます。

2、ガーゼを約70℃のお湯に浸し(またはアルコールに浸し)、取り出して尾を包み、尾の血管拡張の目的を達成し、表皮の角質を柔らかくします。

3、尾静脈注射の場合、左手の親指と人差し指でネズミの尾を前後に押さえ、約2cmの部分を空けて、皮膚が緊張し、静脈がより充満するようにします。右手に1mLの注射針を持ち、針と静脈が平行になるように(角度30°未満)、尾の下1/4から針を入れます。薬剤の注入はゆっくりと始め、注意深く観察します。抵抗がなく、白い皮膚節が現れない場合は、血管が貫通されており、薬剤を正式に注入できることを意味します。

4、実験によっては数日間にわたって尾静脈注射を繰り返す必要がある場合、注射部位はできるだけ尾端から始めて、尾根まで順に移動して、注射する血管の位置を変えます。針を抜いた後、綿球で注射部位を1〜2分間押さえて出血を止めます。

腹腔内注射

腹腔内注射では、48 ~ 72 時間後に最大減少に達します。検出時点には注意が必要です。

1、まず、背側固定法を用いてマウスを捕獲し、マウスの頭を少し後ろに傾け、腹部を上向きにし、マウスの左後肢を小指で固定し、注射部位を75%アルコール綿球で消毒します。

2、マウスの腹腔内注射の位置は、下腹部の正中線(大腿部の付け根と面一)の両側0.5cmです。臓器の損傷を避けるために、マウスを持ち上げるときは、マウスの頭を後ろに傾けて、下腹部の臓器が上方に動くようにします。

3、注射針を皮膚に刺し、皮下に入り、皮下に沿って針を2〜3 mm押し進め、針と皮膚の間が45度の角度でマウスの腹腔に刺します。注:腹膜を貫通した後、針先の抵抗は消えます。

4、針栓を引き抜き、血液や液体の戻りがなければ薬剤を注入することができます。

5、注射後は針をゆっくり回転させ、液漏れを防ぐためにゆっくりと注射器を引き抜きます。

研究部位によって、皮下注射、気管内投与、頭蓋内注射など、注射方法も異なります。実験前に関連文献を参照し、Yeasen 技術チームに相談してください。

投与サイクルと投与量

短期投与: マクロファージの除去効率を検出するため、または下流の実験のために、特定の時間にクロロリン酸リポソーム 200 µL (重量 20 - 25 g) を単回注射します。

長期投与: マクロファージの除去には 1 週間以上が必要です。たとえば、WT マウスでは、通常、初回投与量として 200 µL (体重 20 - 25 g) を投与し、その後 2 - 3 日ごとに 200 µL を投与します。

参照テストプロトコル

臓器/マクロファージ

投与量(マウス1匹あたり20~25g)

脾臓/赤髄マクロファージ

単回投与量: 200 µL/マウス (IV または IP)。
長期枯渇:最初の投与量はマウス1匹あたり200 µL、その後2~3日間隔でマウス1匹あたり200 µL

肝臓/クッファー細胞

単回投与量: 200 µL/マウス (IV または IP)。
長期枯渇:最初の投与量はマウス1匹あたり200 µL、その後2~3日間隔でマウス1匹あたり200 µL

肺/肺胞マクロファージ

IV(150~200 µL)と気管内または鼻腔内(50 µL)を組み合わせると、最良の結果が得られます。

リンパ節

マウス1匹あたり100~200µLの注射。具体的な投与計画は文献に記載されています。

脳/ミクログリア

脳室内から脳脊髄液へ流入、マウス 10 µL、ラット 50 µL。

血液/単球

150~200µL/マウス(IV)、最大減少率は24時間以内に達成されますが、1~7日での最大減少率は系統によって異なります。

注: 上記は参考用です。実験前に関連文献を参照し、Yeasen 技術チームにご相談ください。

製品の推奨

製品名

商品番号

仕様

クロドロネートリポソーム(アムステルダム自由大学より)

40337ES08

5mL

40337ES10

10mL

コントロールリポソーム(PBS)

40338ES08

5mL

40338ES10

10mL

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