概要
セレンテラジンは、自然界に豊富に存在する天然のフルオレセインであり、ほとんどの海洋発光生物（75% 以上）の光エネルギー貯蔵分子です。セレンテラジンは、海腎ルシフェラーゼ（Rluc）、ガウシア分泌ルシフェラーゼ（Gluc）、エクオリンやオベリアなどの発光タンパク質など、多くのルシフェラーゼ酵素の基質として使用できます。ホタルルシフェリン/ルシフェラーゼシステムとは異なり、セレンテラジン/ルシフェラーゼシステムはアデノシン三リン酸（ATP）を必要としないため、生体内での生物蛍光の研究が容易になります。そのため、セレンテラジンは、蛍光アッセイに基づくレポーター遺伝子アッセイや生きた動物アッセイの発光基質として一般的に使用されています。
現在使用されている主な市販セレンテラジンはセレンテラジンネイティブです。セレンテラジンh、セレンテラジン400a、セレンテラジンcp、セレンテラジンf、セレンテラジンhcp、セレンテラジンnイコールなどのセレンテリン誘導体も多数合成されています。理論的には、これらのセレンテラジンは同じ実験に使用できますが、発光波長、細胞膜透過性、光量子効率の違いにより、同じ用途でも異なる実験効果を示します。
セレンテラジンの種
セレンテラジン遊離酸としても知られています。これは、Renilla ルシフェラーゼ (Rluc) や Gaussia ルシフェラーゼ (Gluc) などの多くのルシフェラーゼ酵素の基質であり、クラゲの発光タンパク質の補因子でもあります。
応用シナリオ:生細胞内のカルシウムイオン濃度の検出、遺伝子レポート分析、BRET (生物発光共鳴エネルギー移動) 研究、ELISA、HTS、組織または細胞内の ROS レベルの化学発光検出など。
これは、Renilla ルシフェラーゼ (Rluc) や Gaussia ルシフェラーゼ (Gluc) などの多くのルシフェラーゼ酵素の基質であり、クラゲの発光タンパク質の補因子でもあります。
応用シナリオ:発光強度はセレンテラジンネイティブの 10 倍以上であり、レポーター遺伝子分析や生細胞内のカルシウムイオン濃度検出に適しています。
セレンテラジン hcp
これはセレンテラジンネイティブの誘導体の 1 つです。セレンテラジン hcp-エクオリン複合体の蛍光強度はセレンテラジンネイティブ複合体の 190 倍で、量子収率が高く、Ca 2+反応速度が速いため、カルシウムイオン濃度の検出に非常に適しています。
適用シナリオ:カルシウムイオンレベルの検出に適しています。
DeepBlue CTM とも呼ばれ、セレンテラジンネイティブの誘導体の 1 つです。Renilla ルシフェラーゼ (Rluc) の優れた基質であり、発光波長は約 400nm で、GFP 受容体タンパク質の信号にほとんど干渉せず、Gaussia 分泌ルシフェラーゼ (Gluc) によって酸化されません。
応用シナリオ: BRET (生物発光共鳴エネルギー移動) 研究に適したセレンテラジン基質です。
これはエクオリンの好ましい基質であり、セレンテラジンネイティブとの唯一の構造的違いは、R-1フェノール基のヒドロキシル基がフッ素（F）に置き換えられていることです。セレンテラジンネイティブ-アポエクオリン複合体によって生成される光子の総数と比較すると、この複合体は光子エネルギーの80％しか生成しません。利点は、エクオリン複合体の生成に非常に時間がかからないことです。Ca 2+と接触すると、セレンテラジンネイティブの20倍の生成強度で、迅速かつ高収量で光を発します。さらに、細胞透過性も良好です。
応用シナリオ:クラゲのタンパク質再生実験を研究するために極めて高い Ca 2+検出感度が必要な場合は、基質の使用が推奨されます。
セレンテラジン cp
セレンテラジンネイティブの誘導体です。アポエクオリンタンパク質と形成される発光タンパク質複合体はセレンテラジンネイティブより15倍明るく、Ca 2+反応速度が速いです。
応用シナリオ: G タンパク質共役受容体 (GPCR) 薬剤のハイスループットスクリーニングに使用できます。
セレンテラジンn
全てのセレンテラジン誘導体の中で蛍光強度は弱く、Ca 2+に対する反応速度はセレンテラジンネイティブよりも大幅に低くなります。
セレンテラジンe
セレンテラジンネイティブの誘導体で、構造上セレンテラジンネイティブよりエチル基が 1 つ多い。レニラルシフェラーゼの基質として、その蛍光強度はセレンテラジンネイティブの 137% である。セレンテラジン e はクラゲ発光タンパク質の in vitro 反応性が高く、2 つの発光ピーク (405 と 465) を持つため、2 つの波長の比で pCa5-7 範囲の Ca 2+濃度を測定できる。この方法はセレンテラジン濃度に依存しないため、検出精度が向上する。この誘導体の細胞透過性は低いため、細胞内関連実験ではこの利点はない。
応用シナリオ: Ca 2+の低感度検出に非常に有用な基質。
セレンテラジン2-メチル
これは強力な細胞抗酸化物質であり、一重項酸素やスーパーオキシドアニオンなどの細胞内活性酸素種に効果的に作用し、酸化ストレスはアポトーシスのプロセスにおける中間リンクです。また、この化合物は非毒性と膜透過性の特性を備えているため、アポトーシスの研究に使用できます。
製品の用途:
1) アポトーシスを研究するための重要なツールとして;
2) 化学発光を利用してスーパーオキシドアニオンやペルオキシナイトライトのアニオンレベルを検出することもできます。
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製品名 |
分子量 |
分子式 |
エム（nm） |
RLC* |
相対強度 |
半上昇時間 (ms)** |
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423.46 |
|
466 |
1.00 |
1 |
6-30 |
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|
407.48 |
|
466 |
0.75 |
16 |
6-30 |
|
|
セレンテラジン hcp |
399.48 |
|
445 |
0.65 |
500 |
2-5 |
|
セレンテラジン cp |
415.48 |
|
442 |
0.63 |
28 |
2-5 |
|
425.46 |
|
472 |
0.80 |
20 |
6-30 |
|
|
セレンテラジンn |
457.52 |
|
468 |
0.25 |
0.15 |
6-30 |
|
セレンテラジンe |
449.5 |
|
405と465 |
0.5 |
4 |
0.15-0.3 |
|
2-メチルセレンテラジン |
331.37 |
|
/ |
/ |
/ |
/ |
|
391.48 |
|
400 |
/ |
/ |
/ |
製品情報
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製品名 |
カタログ番号 |
仕様 |
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40901ES01/02/03/08 |
100mg/500mg/1g/5g |
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40902ES01/02/03/09 |
100mg/500mg/1g/5g |
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40903ES01/02/03 |
100mg/500mg/1g |
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40904ES02/03/08 |
1×500μg/2×500μg/5mg |
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|
40905ES02/03 |
1×500μg/2×500μg |
|
|
40906ES02/03/08 |
1×500μg/2×500μg/5mg |
|
|
40908ES02/03 |
1×500μg/2×500μg |
ユーザーからの公開文献（不完全な統計）
- Xie J、Zheng H、Chen S、Shi X、Mao W、Wang F. 生体内でのRNA異常スプライシングの定量的イメージングのための活性化可能なレポーターの合理的設計。Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911。2020年4月18日発行。
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- Haifeng Zheng、Si Chen、Xinan Wang、Jinrong Xie、Jie Tian、Fu Wang。生体におけるプレmRNAスプライシングのリアルタイムイメージングのためのイントロン保持型生物発光レポーター。CAnal. Chem. 2019、91、12392−12398
- Peiyu Xu、Sijie Huang、Chunyou Mao、...、Xi Cheng、Yan Zhang、H. Eric Xu。ヒトドーパミン D3 受容体 - Gi 複合体の構造.2021、Molecular Cell 81、1147–1159
- Moxuan Ji、Xinan Wang、Haifeng Zheng、Wenjie Mao、Xiaorui Shi、Si Chen、Chu Tang、Fu Wang Ci。パイロトーシス細胞死の血液モニタリングのための分泌レポーター。アナル。化学。
- F Hu、Y Zhang、Q Liu、Z Wang。PurA は Edwardsiella piscicida が NF-κB シグナル伝達活性化から逃れることを促進する。Fish & Shellfish Immunology、2022 - Elsevier
- Haifeng Zheng、Xinan Wang、Si Chen、Xiaorui Shi、Jinrong Xie、Wenjie Mao、Jie Tian、Fu Wang。デュアルルシフェラーゼレポーターを使用した、ニューロン分化中のニューロン特異的マイクロRNAダイナミクスのリアルタイム機能バイオイメージング。 ACS Chem. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614