図 1: 末端デオキシヌクレオチド転移酵素によるニック末端標識 (TUNEL) の模式図

製品の特徴

• 幅広い用途

パラフィン包埋組織切片、凍結組織切片、培養細胞、組織から分離した細胞に使用できます。

• 高い検出感度

非常に微量のアポトーシス細胞が検出されます。

• バックグラウンド干渉が低い

高い信号対雑音比。

• 観察の多様性

蛍光顕微鏡観察、フロースルー検出。

データのプレゼンテーション

1、マウス前脂肪細胞（3T3-L）Tunelアッセイ

図 2: マウス前脂肪細胞 3T3-L アポトーシス検出。最初の行はネガティブコントロール、2 番目の行はポジティブコントロールを表します。検出試薬: カタログ番号 40306 TUNEL アポトーシス検出キット (FITC)

2、パラフィン切片サンプルのトンネル検出

図 3: LY3009120 単独またはベムラフェニブおよびオバトクラックスとの併用により、皮下移植腫瘍モデルで甲状腺癌の進行が効果的に遅延しました。IF=8.8。サンプルの種類: パラフィン包埋腫瘍組織 (ヌードマウスから採取)。検出試薬: カタログ番号 40307 TUNEL アポトーシス検出キット (Alexa Fluor 488)。

3、セルクロールのトンネル検出

図 4: 異なるサブグループにおける内皮細胞のアポトーシスに対する硫酸亜鉛の効果。サンプルの種類: HUVEC (ヒト臍帯静脈内皮細胞)。検出試薬: カタログ番号 40308 TUNEL アポトーシス検出キット (Alexa Fluor 640)

4、アポトーシスを検出するフローサイトメトリー

図 5: PA 処理は、再プログラミング中のアポトーシスの発生を効果的に減らすことができます。IF=3.7。サンプルの種類: iPS 細胞。検出試薬: カタログ番号 40307 TUNEL アポトーシス検出キット (Alexa Fluor 488)。

文献引用

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よくある質問

Q: 非特異的な蛍光標識が現れますか?

1) 組織/細胞自体にはヌクレアーゼまたはポリメラーゼの活性が高く、平滑筋細胞などの非特異的な蛍光標識が出現しやすくなります。解決策は、細胞または組織を採取後すぐに固定し、これらの酵素が偽陽性を起こさないように十分に固定することです。

2) 酸性固定液などの不適切な固定液を使用すると、偽陽性が発生します。新しく調製した 4% 中性パラホルムアルデヒド固定液の使用が推奨されます。

3) TUNEL アッセイの反応時間が長すぎて細胞または組織の表面を湿潤状態に保てない場合にも、非特異的蛍光が発生することがあります。反応時間を制御して、TUNEL アッセイ反応溶液がサンプルを十分に覆うようにしてください。

Q: 蛍光バックグラウンドが非常に高いのですか?

1) 転写レベルが高く、分裂と増殖が速い細胞では、核内で DNA 切断が見られる場合もあります。

2) 励起光に長時間さらされると偽陽性が発生します。

Q: ラベリング効率が低いですか?

1) エタノールまたはメタノールで固定すると、標識効率が低下します。

2) 固定時間が長すぎるため、架橋度が高くなりすぎます。固定時間を短くすることをお勧めします。

3) 組織切片が厚すぎると固定効果が不十分になるため、10μm以内に制御することが望ましい。

（4）蛍光消光：通常の光では10分で蛍光が著しく消光します。解決策としては、光操作を避けることです。

製品詳細

製品名	商品番号	仕様
アネキシン V-FITC/7-AAD アポトーシス検出キット	40311ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-FITC/PI アポトーシス検出キット	40302ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-PE/7-AAD アポトーシス検出キット	40310ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-EGFP/PI アポトーシス検出キット	40303ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-YSFluor™ 488/7-AAD アポトーシス検出キット	40313ES60	100T
アネキシン V-YSFluor™ 488/PI アポトーシス検出キット	40305ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-YSFluor™ 647/PI アポトーシス検出キット	40304ES20/50/60	20T/50T/100T
アネキシン V-YSFluor™ 647/7-AAD アポトーシス検出キット	40312ES20/50/60	20T/50T/100T
TUNEL アポトーシス検出キット (FITC)	40306ES20/50/60	20T/50T/100T
TUNEL アポトーシス検出キット (YSFluor™ 488)	40307ES20/50/60	20T/50T/100T
TUNEL アポトーシス検出キット (YSFluor™ 640)	40308ES20/50/60	20T/50T/100T