多重断片または超長断片の相同組換えの効率が低く、コロニーの数が少ないことにまだ悩まされていませんか?
それでも、キャリアやフラグメントは貴重で、収量が低いため、原材料を節約するために、小さなシステムで低濃度のライゲーションを使用していますが、ライゲーション効率が低くて困っていますか?
YEASEN 製品:大幅に改善された、低濃度、小型システム、超長断片の連結効率、高い陽性クローニング率により、連結を簡単に完了できます。
ワンステップクローニングと従来の酵素制限クローニング法の比較
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方法 |
挿入断片の準備 |
制限部位の制限 |
普遍的な財産 |
接続時間 |
陽性率 |
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ワンステップの迅速な組み換えクローニング技術 |
ステップ1 精製 |
なし |
★★★★★ |
最速タイムは5分 |
最大95% |
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制限消化およびライゲーションクローニング技術 |
ステップ2 精製 |
はい |
★★ |
夜を過ごす |
遺伝子はそれぞれ大きく異なる |
製品の利点
オリエンテーション: 1〜7 個の DNA 断片のワンステップクローニング。
シンプル: 複数の断片を 1 つのチューブに連結できます。
高速: 5 分で最速のライゲーション。
高効率：高い陽性クローニング率。
小型システム: ライゲーションシステム全体の容量は 6 μL まで小さくなります。
長さ超過: ライゲーションの場合、25 kb 以上 (キャリア + フラグメントの長さ)。
パフォーマンス表示
- 単一フラグメントの効率的な組み換え 6 μL 小型システム
図1 6 μLの小型システムで、非蘇生受容細胞状態で10 ngの低入力単一断片をライゲーションしました。結果は、10923ESが競合製品よりも優れた性能を示し、ライゲーション効率が高く、コロニーが多く、陽性率が100%であることを示しました。AB：再構成された変換プレート。キャリア（10 kb）と挿入断片（1 kb）のモル比は1：2でした。C：挿入断片のPCR同定。M：YEASEN 10505ES。キャリア量：40 ng/6 μL反応システム、反応条件：50℃、15分。
- 複数フラグメントの効率的な組み換え
図2 6つの断片（7.6 kb）を連結。結果は、10923ESが競合製品よりも優れた性能を示し、コロニーが多く、陽性率が100％であることを示しました。AB：再構成された変換プレート。キャリア（11.6 kb）と挿入断片（7.6 kb）のモル比は1：2でした。C：挿入断片のPCR同定。M：YEASEN 10505ES、PCR長2.6 kb。キャリア量：200 ng/20 μL反応システム、反応条件：50℃、50分。
- 低濃度マルチフラグメント効率的組み換え
図 3低濃度の 5 断片と 6 断片を別々に連結します。結果は、10923ES が低濃度で安定した接続性を示し、細菌数が多く、陽性率が 100% であることを示しました。AB: 組み換え変換プレート。CD: 挿入断片 PCR 識別電気泳動画像、M: YEASEN 10505ES、PCR 長 2.6 kb。
- 試薬の安定性
図4 37℃で7日間放置した後、10923ESは5つと6つの断片を低濃度で連結した状態で安定していることがわかりました。AF ：組換え変換プレート。GH：挿入断片PCR同定電気泳動画像、M：YEASEN 10505ES、PCR長2.6 kb。
顧客事例
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小規模システムの効率的な再編成
図5 10923ESは10μLの小さな反応システムで単一の断片に連結され、陽性率は100%でした。A：再構成された変換プレート。B：挿入断片のPCR同定。キャリアサイズ：5,631 bp、ターゲット断片サイズ：1,384 bp。
図 6 10 μL スモール システム シングル フラグメント ジャンクションおよびポイント ミューテーション クローン、100% 陽性率。Aおよび C: 組み換え形質転換プレート。B: 挿入フラグメントの PCR 識別、レーン 1 ～ 5 はコロニー 1、コロニー 2、ネガティブ コントロール、ポジティブ コントロール (テンプレートとしてゲノム)、ポジティブ コントロール (テンプレートとして PCR 精製フラグメント)。D: 挿入フラグメントの PCR 識別の電気泳動図。
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低濃度の短い断片の効率的な組み換え
図7低濃度断片を連結した10923ES。競合製品と比較してコロニー数が多く、陽性率（10/11）は90.9%以上でした。AB：再構成された変換プレート。C：挿入断片のPCR同定。キャリアサイズ：3,000 bp、ターゲット断片サイズ：441 bp。
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効率的かつ高速なマルチセグメントライゲーション
図8 10923ES 4セグメントライゲーション、高GCおよび短セグメントの組み合わせ接続は、Sブランドと比較して、10923ESの細菌数が多く、陽性率は100％です。D：組み換え変換タブレット。E：挿入断片配列識別マップ。F：サンガー配列決定により、ベクターと断片間の接続が成功したことを確認し、接続部位の配列決定は正確でした。
ストレングススター製品推奨
10923ES 注文チャネル
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製品オリエンテーション |
名前 |
品番 |
仕様 |
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1～7個の断片が1ステップで結合され、組み換え反応は最短5分で完了しました。 |
Hieff Clone TMユニバーサル II ワンステップクローニングキット |
20T/50T |
関連製品
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製品指向 |
名前 |
品番 |
仕様 |
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高忠実度PCR |
2× Hieff Canace TM AdvanceFast PCR マスターミックス（染料付き） |
1mL/5×1mL |
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迅速なPCRアップグレード、コロニーPCRが可能で、複雑なテンプレート増幅に適しています |
2×Hieff TM Ultra-Rapid II HotStart PCR マスターミックス |
1mL/5×1mL |