核酸は、すべての分子生物学研究の基礎となります。さらに、抽出された核酸の品質も、下流の実験の成否を決定する重要な要素の 1 つです。核酸抽出試薬を開発する際には、従来の化学成分に加えて、いくつかの小分子核酸や酵素を加えることで、抽出効率を大幅に向上させたり、非標的物質の干渉を取り除いたりすることができ、核酸抽出における重要な成分となります。
核酸沈殿のための補助物質について
キャリアRNA
- キャリアRNAの概念と機能
キャリアRNAは、中国語では核酸沈殿補助剤としても知られています。核酸抽出プロセスでは、抽出に使用される遠心管は主にポリプロピレン製です。管壁には静電気があり、核酸を吸着します。抽出および精製プロセスでキャリアRNAを使用すると、核酸の静電気効果を除去し、核酸が精製カラムによく吸着されるようにし、溶出効率を向上させ、サンプル中の核酸を最大限に回収することができます。
- キャリアRNAの一般的な種類
核酸沈殿の補助物質として、キャリアRNAには、ポリAカリウム塩、大腸菌全RNA、酵母全RNA、tRNAなど複数の種類があります。
- キャリアRNAの使用における一般的な問題
キャリア RNA は、一定期間室温に置いた後でも使用できますか? キャリア RNA の劣化は使用に影響しますか? キャリア RNA は下流の実験に影響しますか?
キャリア RNA は RNA 保護剤に溶解されています。液体キャリア RNA は、37°C または室温に短期間 (7 日以内) 置いてもほとんど影響はありません。基本的に、キャリア RNA は 500 nt から 1000 nt の範囲の断片です。わずかな劣化は通常の使用には影響しません。蛍光定量 PCR などのダウンストリーム アプリケーションでは、キャリア RNA は Ct 値に影響を与えません。NGS などのダウンストリーム アプリケーションでは、実際のニーズに応じて追加できます。
- キャリアRNAの製品紹介
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
キャリアRNA、6μg/μL |
19701ES |
1mL / 5mL / 100mL |
-25~-15℃で保存してください。保存期間は2年です。 |
キャリアRNAパウダー、216μg/チューブ |
19703ES |
1本 / 100本 / 1000本 |
常温保存。賞味期限は2年です。 |
19704ES |
1本 / 100本 / 1000本 |
常温保存。賞味期限は2年です。 |
直鎖アクリルアミド溶液
- 直鎖アクリルアミド溶液の概念と機能
直鎖アクリルアミドは、英語名 Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide、略称 LPA) で、核酸精製プロセス中に核酸を沈殿させるのに役立つ共沈剤です。
- 直鎖アクリルアミド溶液の特性
中性キャリアであり、非生物由来であるため、核酸やヌクレアーゼによる汚染の可能性はありません。
A260/A280 の読み取りを妨げず、ポリメラーゼおよび制限エンドヌクレアーゼの活性を阻害しません。
PCR や酵素消化などの他の分子生物学アプリケーションと互換性があります。
ピコグラムレベル以上のDNAおよびRNA(オリゴを含む)の沈殿を補助できます。回収可能な断片長は20ヌクレオチド以上で、一本鎖および二本鎖核酸の両方が対象です。
- 製品紹介
製品名 |
製品番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
直鎖アクリルアミド溶液(5 mg/mL) |
10408ES |
1mL |
4℃で保存してください。保存期間は3年です。 |
核酸抽出補助酵素
RNaseA
- RNase Aの概念と機能
リボヌクレアーゼ A (RNase A) はエンドリボヌクレアーゼとして、一本鎖 RNA 上のシトシン (C) またはウラシル (U) 残基を特異的に分解します。リボヌクレアーゼ A (RNase A) の最も一般的な用途は、プラスミド DNA またはゲノム DNA の調製中に RNA を除去することです。さらに、この製品は RNase 保護アッセイや RNA 配列分析などの分子生物学実験にも使用できます。
- RNase Aの特徴
RNase A は牛の膵臓由来です。エンドヌクレアーゼおよびエキソヌクレアーゼのデオキシリボヌクレアーゼの混入はありません。予熱せずにそのまま使用でき、高温環境にも耐性があります。
- 製品紹介
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
RNase A(100 mg/mL) |
10406ES |
1mL |
-20°Cで保存。保存期間は2年です。 |
RNase A(10 mg/mL) |
10405ES |
1mL |
常温保存。賞味期限は1年です。 |
10407ES |
100mg/1g |
常温保存。賞味期限は2年です。 |
デオキシリボヌクレアーゼ I (DNase I)
デオキシリボヌクレアーゼ I (DNase I) は、さまざまな細胞や組織に存在するエンドヌクレアーゼで、ピリミジンに隣接するホスホジエステル結合を標的として切断し、5' 末端にリン酸基、3' 末端にヒドロキシル基を持つポリヌクレオチドを生成します。平均最小消化産物はテトラヌクレオチドポリマーです。DNase は、一本鎖 DNA、二本鎖 DNA、さらにはクロマチン (切断速度はヒストンの影響を受ける) など、さまざまな形態の DNA を触媒できます。分子生物学の実験では、タンパク質から DNA を除去したり、DNA に切れ目を入れて標識塩基を DNA に挿入したりするためによく使用されます。
2.DNase Iの特徴
DNase I の最適作用範囲は pH 7~8 で、その活性は Ca 2+に依存し、Co 2+ 、Mn 2+ 、Zn 2+などの二価金属イオンによって活性化されます。5 mM Ca 2+ は酵素の加水分解を防ぎます。Mg 2+が存在する場合、この酵素は DNA のいずれかの鎖の任意の部位をランダムに認識して切断できます。一方、Mn 2+が存在する場合、この酵素は DNA の両方の鎖を同時に認識してほぼ同じ部位を切断できます。
3.製品紹介
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
牛膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I) |
10607ES |
15 KU/10×15KU |
-20°Cで保存。保存期間は2年です。 |
牛膵臓由来デオキシリボヌクレアーゼI(DNase I) |
10608ES |
25mg/100mg/1g |
-20°Cで保存。保存期間は2年です。 |
プロテイナーゼK
1.プロテイナーゼKの概念と機能
プロテイナーゼ K (プロテアーゼ K) は、広範囲の切断活性を持つセリンプロテアーゼです。相対分子量は約 29.3 kDa で、脂肪族アミノ酸および芳香族アミノ酸のカルボキシル末端ペプチド結合を切断できます。プロテイナーゼ K は幅広い用途があり、パルスフィールドゲル電気泳動用の染色体 DNA の調製、ウェスタンブロッティング、DNA および RNA 調製物中のヌクレアーゼの除去などの実験に使用できます。SDS (1%) などの変性剤は、その活性を高めることができます。
2.プロテイナーゼKの特徴
遺伝子組み換え酵母株から得られます。
RNase および DNase は含まれていません。
尿素およびSDS中で活性かつ安定です。
広いpH範囲(pH4.0~12.0)で活性があり、最適pH範囲はpH7.5~9.0です。
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
10401ES |
100mg/1g/5g/100g |
4℃で保存してください。賞味期限は3年です。 |
|
プロテイナーゼK溶液(20 mg/mL) |
10412ES |
1mL/10mL/25mL/500mL |
4℃で保存してください。賞味期限は2年です。 |
プロテイナーゼK溶液(20 mg/mL) |
10410ES |
1mL/10mL/25mL/500mL |
4℃で保存してください。賞味期限は2年です。 |
RNA安定剤
動物および植物組織用RNA安定剤溶液
1.動物および植物組織に対するRNA安定化溶液の機能
RNase は環境中に広く存在し、動物や植物の組織、血液、体液などの新鮮に採取されたサンプル内の RNA を分解する可能性が非常に高いです。動物や植物の組織用の RNAsafe 組織安定剤 (RNAsafe 組織安定剤) は、採取されたサンプル内の RNA を安定化および保護するために特別に開発されました。無毒の溶液であるため、組織に素早く浸透し、内因性 RNase を不活性化できます。
2.動物および植物組織用RNA安定化溶液の特性
操作は非常に簡単: 新鮮な組織を適切なサイズ (≤0.5 cm) の組織ブロックに切り、RNAsafe の 5 ~ 10 倍の量に浸すだけです。
長い安定化期間: RNAsafe を浸透させた組織/細胞は、37°C で 1 日、室温で 1 週間、4°C で 4 週間、-20°C/-80°C で長期保存できます。
幅広い下流互換性: HieffTM Total RNA 抽出試薬 (カタログ番号: 10606ES60) などのほぼすべての RNA 分離方法、および遠心カラム抽出法や磁気ビーズ精製法を含むほぼすべての市販の RNA 抽出キットと互換性があります。
幅広い材料の応用:さまざまな動物や植物の組織(脳、心臓、肝臓、膵臓、腎臓、脾臓、精巣、筋肉、植物の茎や葉など)の保存に使用できます。また、酵母、組織培養細胞などにも使用できます。
3.製品紹介
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
RNAsafe 組織安定剤 RNAsafe |
10604ES60 |
100mL |
常温保存。賞味期限は5年です。 |
関連製品
製品名 |
製品 番号 |
仕様 |
保管条件と賞味期限 |
リゾチーム |
10402ES |
5/50グラム |
-20°Cで保存。保存期間は3年です。 |
リチカーゼ(10 U/μL) |
10403ES |
1500/3000/10000 ユニット |
-20°Cで保管してください。 |
スネイルズ |
10404ES |
5/10グラム |
2~8℃で保存してください。賞味期限は2年です。 |
RNAsafe-ICE |
10605ES |
100mL |
常温保存。賞味期限は2年です。 |