ハイアクティ™ 培養オルガノイドで検証されたサイトカイン

2021年、オルガノイドは「第14次5カ年計画」国家重点研究開発計画の重点プロジェクトに挙げられます。オルガノイドは非常に人気があり、その入手方法も注目の的となっています。異なるオルガノイドは、培養中に異なるサイトカインを必要とします。特定のシグナル伝達経路を促進または阻害するサイトカインを添加することで、幹細胞を目的のオルガノイドに分化させることができます。オルガノイド培養における最も古典的なサイトカイン培養プロトコルはWNER（それぞれ：Wnt-3a、Noggin、EGF、R-Spondins）であり、これら4つの因子の増減の組み合わせは、ほぼすべてのオルガノイド培養実験に適用できます。

オルガノイド培養でよく使用されるサイトカイン

R-スポディン1

機能: R-スポディン 1 は、Wnt 調節因子の Rspo ファミリーに属し、Rspo1-4 の 4 つのメンバーが含まれます。このファミリーは、複数の臓器で成体幹細胞を維持する微小環境因子です。RSPO1 は分泌型活性化タンパク質です。Rspo-1 は、発達中の中枢神経系の特定の領域で発現し、副腎、卵巣、精巣、甲状腺、気管にも見られます。

Rspo1 は、Wnt シグナル伝達経路の活性化因子として、Wnt シグナル伝達を強化することで多くの面で役割を果たします。胃上皮オルガノイド、小腸および結腸オルガノイド、肝臓オルガノイド、前立腺オルガノイド、膵臓オルガノイド、および乳房オルガノイドの増殖培地として一般的に使用されています。因子。

Wnt-3a

機能: Wnt-3a は Wnt シグナル伝達タンパク質ファミリーに属し、胚および成体組織の完全性を維持する上で重要な役割を果たします。Wnt ファミリーは高度に保存されており、システインが豊富です。Wnt は、細胞膜受容体に結合したり、隣接する細胞膜受容体に結合したりすることで、Wnt シグナル伝達経路を媒介します。Wnt シグナル伝達経路は、標準経路と非標準経路に分けられ、1 つは Wnt1、Wnt2、Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt7a、Wnt8、Wnt8b、Wnt10a など、β-カテニンが媒介する標準シグナル伝達経路に関与し、もう 1 つは Wnt4、Wnt5a、Wnt6、Wnt11 など、β-カテニンに依存する非標準シグナル伝達経路です。 Wnt ファミリーの最も代表的なシグナル伝達タンパク質である Wnt3a は広く分布しており、自己複製、増殖、分化、運動性などの多面的な細胞機能の調節に重要な役割を果たしています。

EGF

機能: EGF は、培養中の複数の上皮細胞発達、血管新生、胃酸分泌の抑制、線維芽細胞の増殖、および表皮細胞のコロニー形成を刺激する強力な成長因子です。EGF は EGF ファミリーの創設メンバーであり、このファミリーには TGF-α、2 つの調節タンパク質 (AR)、β 細胞タンパク質 (BTC)、表皮タンパク質 (EPR)、ヘパリン結合 EGF 様成長因子 (HB-EGF)、エピタンパク質、およびニューレグリン (NRG1-6) も含まれます。生理学的には、EGF は血液、乳汁、尿、唾液、精液、膵液、脳脊髄液、羊水など、さまざまな体液に存在します。EGF は、EGF 受容体 (ErbB) の高親和性リガンドです。 EGF は EGF 受容体に結合してその二量体化を誘導し、タンパク質チロシンキナーゼシグナル伝達経路を活性化して、EGF ファミリーシグナルを伝達します。

ノギン

機能:ノギンは TGF-β ファミリーのリガンドを阻害し、対応する受容体への結合を阻止します。ノギンはもともと BMP-4 の拮抗薬として発見され、その後他の BMP (BMP-2、7、13、14) の活性を調節することが示されました。ノギンは脊椎動物の間で高度に保存されています。分泌されたノギンタンパク質は、発達中の骨形成タンパク質の活性を制御します。前立腺がんによる骨溶解性骨転移の発達における BMP シグナル伝達拮抗薬ノギンの役割。

bFGF /FGF-2

機能： bFGFは、分裂促進タンパク質のFGFスーパーファミリーのメンバーです。これは、多くの細胞タイプに対する非常に特異的な走化性および分裂促進因子であり、潰瘍の治癒、血管の修復、外傷性脳損傷などの損傷組織のリモデリングに関与しているようです。bFGFは、ヒト胚性幹細胞培養培地の重要な成分です。さらに、bFGFタンパク質は、血管新生や固形腫瘍の成長など、さまざまな病理学的状態に関与するヘパリン結合性カチオンタンパク質です。したがって、bFGFは、癌の化学予防および治療戦略のターゲットと見なされています。bFGFは、ヒト胚性幹細胞培養培地、無血清培養システムなどの細胞培養培地の重要な成分としてよく使用されます。

FGF-10

機能:線維芽細胞増殖因子 10 (FGF-10) は、FGF ファミリーに属するヘパリン結合増殖因子です。このファミリーのタンパク質は、細胞の増殖と分化を促進することにより、出生前発育、出生後成長、およびさまざまな組織の再生において中心的な役割を果たします。FGF-10 は間葉系細胞から分泌され、細胞外 FGF-BP に結合します。FGF-10 は上皮 FGF R2 (IIIb) に優先的に結合して活性化し、FGF R1 (IIIb) と弱く相互作用します。

HiActi ™サイトカインの品質管理システム

品質管理システム

• ISO 13485:2016 認証を受けたサイトカインは、タンパク質の清浄性と安定性を確保するために、完全に密閉された超クリーンな製造プロセスを通じて製造されています。
• 「医薬品適正製造基準」のシステムに準拠
• 品質承認証明書（COA）を取得している
• 無菌技術と二次滅菌濾過
• 医薬品原料生産拠点

品質保証管理

• 経営人材育成制度の責任者を設置
• 機器のメンテナンスと校正手順を確立する
• 原材料・サプライヤー管理システム
• バッチ生産記録、バッチ検査記録、梱包記録などを完備。
• 品質文書記録はQAによって監査および検査されています
• 完全なバッチ生産および検査記録
• 分析方法の検証

品質管理システム

• 中華人民共和国薬局方2020年版の第三一般規則「生物学的製剤の製造における原材料および添加剤の品質管理」に準拠する

オルガノイド培養の検証

Yeasen サイトカインは、肺がん、子宮頸がん、卵巣がん、膵臓がん、腸がんなどのヒト腫瘍オルガノイド、およびヒトやマウスの小腸オルガノイドなどの正常オルガノイドで検証されています。

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