タグ抗体の紹介
タグ抗体は、さまざまな市販の発現ベクター上のタグ配列の検出と精製に使用され、ターゲットタンパク質の発現レベルと機能を分析および決定します。その使用原理は抗原抗体反応であり、タグ抗体は対応するタグ融合タンパク質に特異的に結合します。以下は、タグ抗体での使用に適した一般的なタンパク質タグの簡単なリストです。
表1. さまざまなタンパク質タグの紹介
タグ |
順序 |
特徴 |
適用可能なシナリオ |
フラグ |
やべぇ |
1. 分子量が小さく、融合タンパク質の機能を変えず、類似のタグよりも親水性が高い。 2. エンテロキナーゼ認識部位(DDDDK)を含み、標的タンパク質のN末端に融合した場合のタグ除去に便利です。 |
真核生物発現システムにおける低発現レベルの融合タンパク質の精製および検出に適しています。 |
ハ |
ありがとう |
インフルエンザウイルスのヘマグルチニン表面抗原決定基に由来します。アポトーシス細胞に関連する実験では使用しないでください。 |
タンパク質の精製および検出に適しています。 |
マイク |
グル-グル-ン-リス-ロイ-イル-セル-グル-グル-アスプ-ロイ |
ヒトの原癌遺伝子 Myc に由来するため、ヒト細胞に関連する実験には使用しないでください。 |
一般的にタンパク質の精製には使用されませんが、検出には適しています。 |
製品シリーズ |
精製樹脂シリーズ |
免疫磁気ビーズシリーズ |
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製品番号 |
20584ES |
20586ES |
20587ES |
20565ES |
20566ES |
20567ES |
20564ES |
製品名 |
抗HAマグビーズ |
抗MycMagビーズ |
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リガンド |
高品質のマウスIgGモノクローナル抗体 |
高品質のマウス抗GFP/Flag/HA/Mycモノクローナル抗体 |
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タンパク質結合能 |
≥1.1 mg フラグタグ融合タンパク質/mL ゲル ≥1.5 mg HAタグ融合タンパク質/mLゲル ≥0.9 mg Mycタグ融合タンパク質/mLゲル |
≥0.8 mg GFPタグ融合タンパク質/mgビーズ ≥0.6 mg フラグタグ融合タンパク質/mg ビーズ ≥0.4 mg HAタグ融合タンパク質/mgビーズ ≥0.5 mg Mycタグ融合タンパク質/mgビーズ |
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マトリックス |
4%架橋アガロースゲル |
シリカベースの磁性ビーズ |
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粒子サイズ |
45~165µm |
200nm |
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利点 |
非特異的結合が低く、容量が大きい |
高純度、高容量、高特異性、磁気ラックで便利に使用可能 |
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推奨アプリケーション |
あらゆる規模のタグ付き融合タンパク質のアフィニティー精製、免疫沈降(IP) |
免疫沈降法 (IP)、共免疫沈降法 (COIP) |
テストデータ
1.

図1.
M: タンパク質マーカー; 1: Flag-N、M、C タンパク質のプレカラム溶解物; 2: Flag-N、M、C タンパク質のポストカラム透過物; 3: 溶出 (pH 2.7 溶出); 4: 溶出 (pH 12 溶出)
2. 下図の矢印はターゲットのタグ付きタンパク質を示しており、磁気ビーズを直接煮沸した後の上から下の3つのバンドはBSA、抗体の重鎖、抗体の軽鎖です。
図2. 抗Flag MagBeadsによるFlagタグ付きタンパク質の精製
1: Flagタグ付きタンパク質を含む大腸菌ライセート 10 μL; 2: Flagタグ付きタンパク質を含む大腸菌ライセートを磁気ビーズとインキュベートした後の上清 10 μL; 3: Flagタグ付きタンパク質を抗Flag MagBeads 10 μLと直接煮沸; 4: 抗Flag MagBeadsを直接煮沸; 5: マーカー
3.
図3. GFPタグ付きタンパク質の抗GFPマグビーズ精製
1: GFPタグタンパク質を含む大腸菌ライセート 10 μL; 2: GFPタグタンパク質を含む大腸菌ライセートを磁気ビーズとインキュベートした後の上清 10 μL; 3: GFPタグタンパク質を抗GFP MagBeadsと直接煮沸したもの 10 μL; 4: 抗GFP MagBeadsを直接煮沸したもの; 5: マーカー
製品情報
製品名 |
製品番号 |
仕様 |
20584ES03/08/25 |
1mL/5mL/25mL |
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20586ES03/08/25 |
1mL/5mL/25mL |
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20587ES03/08/25 |
1mL/5mL/25mL |
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20565ES03/08 |
1mL/5mL |
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抗HAマグビーズ |
20566ES03/08 |
1mL/5mL |
抗Mycマグビーズ |
20567ES03/08 |
1mL/5mL |
20564ES03/08 |
1mL/5mL |