バイオメディカル研究の分野において、タンパク質の精製は生命の謎を解明する鍵となる技術です。しかし、従来の精製方法は、特に構造生物学研究の焦点である膜タンパク質の場合、非効率性と高コストに悩まされています。これらのタンパク質は構造が複雑で、細胞膜での発現レベルが低く、環境条件に敏感であるため、精製が特に困難です。現在、優れた研究開発能力を持つYeasen Biotechは、アップグレードされたAnti-DYKDDDDK（Flag）Affinity Gel （Cat#20584ES）を発売しました。これは、困難な膜タンパク質であっても、効率的で便利なタンパク質精製のための強力なツールです。
製品のパフォーマンス
1. 高い特異性と高い結合能力：標的タンパク質捕捉における主な利点
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) アフィニティー ゲル(カタログ番号 20584ES)は、高品質のマウス IgG2b モノクローナル抗体を 4% の高度に架橋されたアガロース ゲルと共有結合して製造されます。この独自の製造プロセスにより、この製品は非常に高い特異性を備え、Flag タグとの融合タンパク質を正確に認識して結合することができます。Met によって修飾された N 末端 Flag 融合タンパク質 ( Met-Flag-Protein )、N 末端 Flag 融合タンパク質 ( Flag-Protein )、または C 末端 Flag 融合タンパク質 ( Protein-Flag) のいずれであっても、このゲルは簡単に処理できます。
膜タンパク質の精製では、これらのタンパク質は構造的に複雑で、他のタンパク質と非特異的に結合しやすいため、この特異性は特に重要です。Flag ゲルの高い特異性により、非特異的タンパク質による干渉が効果的に低減され、精製された膜タンパク質の純度が高くなります。さらに、このゲルは Flag タグ付き融合タンパク質に対する結合能力が高いです (少なくとも1.1 mg タンパク質/mLゲル)。つまり、ターゲット タンパク質の発現レベルが低い場合でも、Flag ゲルを使用して効率的に捕捉および精製できます。
2.高純度と高収率：下流アプリケーションを実現
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) アフィニティー ゲル(カタログ番号 20584ES)は、不純物の非特異的結合が最小限に抑えられ、精製後のタンパク質サンプルの純度が非常に高くなります。これは、生物活性アッセイや構造分析などの下流アプリケーションにとって非常に重要です。高純度のタンパク質サンプルは、より正確な実験データを提供し、研究者の研究に強固な基盤を築きます。
3.最適化された実験ワークフロー: タンパク質精製の課題を簡素化
タンパク質の精製は、特に複雑な膜タンパク質の場合、タンパク質の構造的損傷を避けるために穏やかな条件下で行う必要があります。Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) アフィニティー ゲル(カタログ番号 20584ES)は、この点を考慮して設計されています。保存バッファーはpH 7.4 の50% グリセロールを含む TBSで、ゲルの活性を保護するだけでなく、タンパク質の精製に穏やかな環境を提供します。
Flag ゲルを使用した精製プロセスはシンプルで効率的です。1×Flag ペプチド溶出の使用を容易にするために、製品パッケージには無料の 1×Flag ペプチド (カタログ番号 20572ES) が含まれています。これにより、溶出プロセスが穏やかになり (タンパク質へのダメージがほとんどありません)、非常に便利になります (実験の容易さがさらに向上します)。
4. 多様なサイズと柔軟な配送オプション: 多様な実験ニーズに対応
Yeasen は、さまざまな研究室の規模やニーズを考慮して、 1 mL、5 mL、25 mL、100 mLなど、複数のサイズの Flag ゲルを提供しています。小規模な予備調査でも、大規模なタンパク質生産でも、適切なオプションが用意されています。年間大量購入の場合、お客様はバッチで出荷を受け取ることを選択できるため、過剰在庫の圧力を回避しながら価格割引を受けることができます。
テストデータ
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M: タンパク質マーカー 1: Flag-N/ Flag-M/Flag-Cタンパク質のプレカラム粗サンプル 2: Flag-N/ Flag-M/Flag-Cタンパク質のポストカラムフロースルー 3: 溶出（pH2.7溶出） 4: 溶出（pH12溶出） 5: 溶出（1 ×フラグペプチド溶出） 6: 精製ゲル（pH 2.7溶出） 7: 精製ゲル（pH 12溶出） 8: 精製ゲル（1 × Flagペプチド溶出） a ：旗-N b ：旗-M c ：旗-C |
図1 . Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag) アフィニティーゲル精製の結果、低発現タンパク質 (Flag-N (a)、Flag-M (b)、Flag-C (c)) が SDS-PAGE に表示されます。
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M: タンパク質マーカー 1: Flag-Cタンパク質のプレカラム粗サンプル 2: Flag-Cタンパク質のポストカラムフロースルー 3: 溶出（pH2.7溶出） 4: 溶出（pH12溶出） 5: 溶出（1 ×フラグペプチド溶出） 6: 精製ゲル（pH 2.7溶出） 7: 精製ゲル（pH 12溶出） 8: 精製ゲル（1 × Flagペプチド溶出） a ：イェーセン b ：ブランドS* c ：ブランドG* |
図2. SDS-PAGE で示される低発現タンパク質 (膜タンパク質など) の精製におけるYeasen (a) とB rand S* (b) およびB rand G* (c) Anti-Flag ゲルの比較。
結論:
1. Yeasen抗 DYKDDDDK(Flag) アフィニティー ゲル(カタログ番号 20584ES)は特異性が高く、さまざまな位置の Flag タグ (N 末端 Flag 融合タンパク質、Met 修飾 N 末端 Flag 融合タンパク質、C 末端 Flag 融合タンパク質) に結合できます。
2.標的タンパク質の発現が非常に低い条件（膜タンパク質など）では、Yeasen Anti-DYKDDDDK(Flag)アフィニティーゲル（カタログ番号20584ES）は、競合製品と比較して大幅に高い収量と純度を実現します。Yeasen 溶出用の無料の 1×Flag ペプチド (Cat#20572ES) を使用すると、さらに優れた結果が得られます。
フラグタグ融合タンパク質の完全なソリューション:
組み換えエンテロキナーゼ (カタログ番号 20395ES) : 4 つのアスパラギン酸が先行するリジンのカルボキシル末端を切断する特定のプロテアーゼ: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys。この配列は、オクタペプチド フラグ タグ (DYKDDDDK) の一部です。組み換えエンテロキナーゼ (rEK) は、融合タンパク質からフラグ タグを簡単に除去できるため、ネイティブ タンパク質の構造と機能を研究するための理想的なツールです。
抗DYKDDDDK(Flag) MagBeads (Cat#20565ES) : 高品質のマウス抗DYKDDDDK(Flag)モノクローナル抗体をシリカベースの磁性ビーズ(直径 の これらのビーズは、Flag タグ付きのタンパク質の免疫沈降 (IP) または共免疫沈降 (Co-IP) に適しています。
製品情報
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製品名 |
製品番号 |
仕様 |
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1 ミリリットル/ 5 mL/25mL |
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酵母で発現した組み換えウシエンテロキナーゼ、His |
100 500位 U/5000 U |
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反DYKDDDDK(旗)マグビーズ |
1 ミリリットル/ 5 ミリリットル |