説明
この製品は、大腸菌での組み換えタンパク質発現から得られたバクテリオファージ T7 RNA ポリメラーゼです。T7 プロモーター配列 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') から二本鎖 DNA 上の 5'→3' RNA 合成を触媒し、NTP を基質として使用します。二本鎖の直線状平滑末端または 5' 突出末端を持つ DNA は、T7 RNA ポリメラーゼのテンプレートとして使用できるため、直線化プラスミドおよび PCR 産物は、RNA の in vitro 合成のテンプレートとして使用できます。
注: G* は RNA 転写の最初の塩基です。
この製品は GMP 規制に従って製造され、液体の形で提供されます。
特徴
- 長い転写産物と短い転写産物を合成し、1μgのDNAテンプレートで100～200μgのRNAを生成できる。
- 高い収量と簡単な操作
- エンドトキシンの低下
- エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、RNaseが存在しないことを確認済み
応用
- 放射性標識RNAプローブの調製
- RNAの構造、処理、触媒作用の研究のためのRNA生成
- アンチセンスRNAによる発現制御
- mRNA、sgRNA合成
仕様
| ソース | 大腸菌で発現 組み換えT7 RNAポリメラーゼ遺伝子 |
| 最適温度 | 37℃ |
| ストレージ バッファ | 50 mM トリス-HCl、1 mM EDTA、10 mM DTT、100 mM NaCl、0.1% トリトンX-100、50% (v/v) グリセリン、25℃でpH7.9 |
| ユニットの定義 | 37℃、pH8.0で1時間以内に1nmolの[3H]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込むために必要な酵素量を1単位と定義する。 |
品質
| COAアイテム | 標準 |
| 活動 | 250～300U/μL |
| タンパク質 集中 | ≥0.5mg/mL |
| 純度 | ≥95% |
| エンドトキシン | <20 EU/mg |
| 残留プロテアーゼ | ネガティブ |
| 残留エキソヌクレアーゼ | ネガティブ |
| 残留ニッカーゼ | ネガティブ |
| 残留RNase | ネガティブ |
| E. 大腸菌宿主タンパク質 | <50ppm |
| 大腸菌宿主 DNA | <10 fg/U |
| マイコプラズマDNA | ネガティブ |
コンポーネント
| コンポーネント番号 | 名前 | 10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | 10625ES86 (2,500 KU) | 10625ES99 (100 MU) |
| 10625 | T7 RNAポリメラーゼGMPグレード（250 U/μL） | 40μL | 400μL | 10mL | 400mL |
配送と保管
T7 RNAポリメラーゼGMPグレード製品はドライアイスとともに出荷され、-15℃〜-25℃で1年間保存できます。
数字
図 1. 標準 RNA は、T7 RNA 合成キットを使用して in vitro で合成されました。
反応はPCR装置で37℃で2時間インキュベートされ、その後磁気ビーズ（カタログ番号12602）で精製されました。収量結果は、図1に示すようにNanoDrop分光光度計で分析されました。
図2. T7キットによる異なる長さのRNAの転写の実証。それぞれ電気泳動図（図2A）、キャピラリー電気泳動図（図2B）、クロマトグラム（図2C）で示されています。
図 3. キャップされた RNA の in vitro 合成。
反応物はPCR装置で37℃で2時間インキュベートされ、その後磁気ビーズ（カタログ番号12602）で精製されました。収量結果は、図3Aに示すようにNanoDrop分光光度計で分析されました。完全性の結果は、図3Bに示すようにキャピラリー電気泳動で分析されました。
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
特定のアプリケーションでは、追加のサードパーティの知的財産権が必要になる場合があります。