説明
これは、野生型 T7 RNA ポリメラーゼから派生し、大腸菌で生成される、改変された T7 RNA ポリメラーゼ変異体 (低 dsRNA) です。キャップ類似体を効率的に組み込みながら二本鎖 RNA (dsRNA) の生成を大幅に削減し、野生型 T7 RNA ポリメラーゼに匹敵する非常に効率的な in vitro 転写 (IVT) を示します。T7 プロモーター配列 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') から二本鎖 DNA 上の RNA の 5'→3' 合成を触媒し、NTP を基質として使用します。
注: G* は RNA 転写の最初の塩基です。
特徴
- dsRNAレベルは約1/100000に低下
- Trilink CleanCap AGと互換性あり
- WTに匹敵する高収量
- キャップ入力を下げる
- 動物由来原料不使用(AOF)
コンポーネント
コンポーネント番号 |
名前 |
10628ES10 |
10628ES60 |
10628ES72 |
10628ES86 |
|
|
(10 KU) |
(100 KU) |
(250 KU) |
(2,500 KU) |
10628 |
CleaScrip™ T7 RNAポリメラーゼ(低dsRNA、250 U/μL) |
40μL |
400μL |
1mL |
10mL |
仕様
ソース |
組み換え T7 RNAポリメラーゼ遺伝子を持つ大腸菌 |
最適温度 |
37℃ |
ストレージ バッファ |
50 mM トリス-HCl、1 mM EDTA、10 mM DTT、100 mM NaCl、0.1% トリトンX-100、50% (v/v) グリセリン、25℃でpH7.9 |
ユニットの定義 |
37℃、pH8.0で1時間以内に1nmolの[ 3H ]GMPを酸不溶性沈殿物に取り込むために必要な酵素量を1単位と定義する。 |
推奨Mg2+ |
30mM酢酸マグネシウム |
QC標準
項目 |
仕様/規格 |
酵素 活動 |
250 - 300U/μL |
タンパク質の純度 |
≥95% |
エンドトキシン |
<20 EU/mg |
プロテアーゼ |
ネガティブ |
エキソヌクレアーゼ |
ネガティブ |
ニッカセ |
ネガティブ |
RNアーゼ |
ネガティブ |
大腸菌宿主タンパク質 |
<50ppm |
大腸菌宿主 DNA |
<10 fg/U |
マイコプラズマ検査 |
ネガティブ |
関連製品
数字
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図 2. マウス RAW264.7 細胞における IVT 産物の免疫原性の評価 (図 2A および 2B)。変異体によって生成された mRNA を導入した RAW264.7 細胞では、野生型と比較して IFN-β mRNA およびタンパク質レベルが低下しました。これは、野生型 T7 RNAP によって合成された mRNA が最も強力な免疫応答を引き起こし、変異体からの mRNA では応答が大幅に低下したことを示しています。
図 3. セルロース処理後、CleaScript™ T7 RNA ポリメラーゼで合成された mRNA の dsRNA 含有量は、野生型酵素で合成された mRNA の dsRNA 含有量よりも低くなります。
配送と保管
商品はドライアイスと一緒に発送され、-15℃~-25℃で1年間保管可能です。
出版物:
FADSと半合理的設計により改変されたT7 RNAポリメラーゼはdsRNAの産生を減少させ、末端転移酵素とRDRPの活性を低下させた。
文書
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